Chapitre 5 BioChimie Clinique 2ème Partie

Chapitre 5
Contrôle Qualité en
Biochimie Clinique
2ème Partie
FIABILITE
Ensemble des performances analytiques
d'une méthode permettant de lui faire confiance
 Exactitude
 Qualité de l'accord entre la valeur mesurée et la valeur "vraie"
mesure : écart absolu
Exacte, précise
Fausse , imprécise Référence = Courbe noire
Fausse , précise
Exacte, imprécise
 Précision
 Qualité de l'accord entre des mesures répétées d'un même échantillon
mesure : CV %=100 s/m
 Répétabilité : intra-série n > 30 éch.
 Reproductibilité : jour à jour n > 30 j
 Linéarité
 Domaine de concentration où L = k x C (ex. 1 à 1000 µg/l)
 Limite de Détection
 Plus petite quantité détectable : Blanc m + 3 s (ex. 0.5 ng)
 Sensibilité analytique
 Grandeur de la pente k = I / C , aptitude à différencier 2 concentrations

voisines
 Spécificité analytique
 Aptitude à ne doser que cette substance , à l'exclusion d'interférences
 Robustesse
 Capacité à ne pas être affectée par de faibles variations de paramètres

( température, concentration réactifs, pH...)
Valeur Diagnostique
d'une Analyse
 Un bon test de dépistage doit :
 être fiable et reproductible
 être facile à appliquer et à accepter par les bien portants (surtout
si on doit le répéter assez souvent)
 n'avoir que peu d'effets secondaires
 être de coût modéré.
 En outre, il doit être efficace, c’est à dire diminuer la mortalité
ou la morbidité.
Valeur Diagnostique
d'une Analyse
 On définit un test de dépistage par les valeurs suivantes :
 vrais positifs (VP)

 vrais négatifs (VN)
 faux positifs (FP)
 faux négatifs (FN)
 valeur prédictive positive (VPP)
 valeur prédictive négative (VPN)
Valeur Diagnostique
d'une Analyse
 La valeur prédictive positive correspond à la probabilité qu'un

sujet soit réellement malade lorsque le test est positif.
 La valeur prédictive négative correspond à la probabilité qu'un

sujet soit vraiment non-malade quand le test est négatif.
Valeur Diagnostique
d'une Analyse
Malades Bien Total tests Valeur
Portants prédictive
Test positif Vrai positifs Faux Positifs Total positifs VPP = VP/TP
(VP) (FP) (TP)
Test négatif Faux négatifs Vrai négatifs Total négatifs

VPN= VN/TN
(FN) (VN) (TN)
Total tests Total malades

Total (TBP)
(TM)
Sensibilité = Spécificité =
VP / TM VN/TBP
Valeur Diagnostique
d'une Analyse
Signe clinique ou Malades Témoins
Analyse Biologique
+ 1 2 (faux +)
- 3 (faux -) 4
 Sensibilité diagnostique 1 / 1+3

 fréquence du signe dans la maladie
 Spécificité 4 / 2+4 100 %=pathognomonique
 fréquence de l'absence du signe chez les sujets sains
 Valeur prédictive positive 1 / 1+2
 Probabilité de maladie en présence du signe
 Valeur prédictive négative 4 / 3+4
 Probabilité d'absence de la maladie en l'absence du signe
Seuils de décision et spécificité épidémiologique
Du fait de:
Test parfaitement discriminant:
- Variabilité biologique
pas de chevauchement des distributions entre
- production basale de marqueurs tumoraux
sujets sains / malades
non liée aux cancers
Seuil de décision facilement déterminé
Distribution qui serait observée pour un marqueur idéal Distributions sujets sains / malades se chevauchent
Seuils de décision et spécificité épidémiologique
Sensibilité:100 % Spécificité:100 %
Malades S sains Total Valeur

tests prédictiv
e
Test Vrai positifs Faux Total VPP =
positif (VP) Positifs positifs VP/TP
(FP) (TP)
Test Faux négatifs Vrai Total VPN=
négatif (FN) négatifs négatifs VN/TN
(VN) (TN)
Total Total malades Total (SS)

tests (TM)
Sensibilité = Spécificité
VP / TM = VN/TSS
Relation Sensibilité Spécificité
Courbe ROC
(Receiver Operating Characteristic)
Sensibilité
1 --- Bon marqueur
0.8 --
0.6 --
0.4 --
0.2 --
0 ----
1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 Spécificité
LES EXIGENCES NORMATIVES
ISO/CEI 17025 / 5.1 Généralités
« De nombreux facteurs déterminent l'exactitude et la fiabilité des essais :

- facteurs humains
- installations et conditions ambiantes
- méthodes d'essai et de leur validation
- équipement
- traçabilité du mesurage
- manutention des objets d'essai et d'étalonnage »
« Le laboratoire doit appliquer des méthodes et procédures appropriées pour tous les essais relevant de son
domaine d'activité. Celles-ci comprennent l'échantillonnage, la manutention, le transport, le stockage et la
préparation d'objets à soumettre à l'essai et l'estimation de l'incertitude de mesure ainsi que des techniques
statistiques pour l'analyse de données d'essai ». ISO/CEI 17025
LES EXIGENCES NORMATIVES
ISO/CEI 17025 / 5.4
METHODES D’ESSAI ET D’ETALONNAGE - VALIDATION DES METHODES
SÉLECTION DES MÉTHODES

- Les méthodes doivent répondre aux besoins des clients
- Bibliographie et publications scientifiques
- Méthodes normalisées, adoptées ou développées par le laboratoire
- Le client est informé de la méthode que le laboratoire a la capacité de réaliser
MÉTHODES DÉVELOPPÉES PAR LE LABORATOIRE
Projet planifié – Personnel qualifié – Ressources adéquates
MÉTHODES NON NORMALISÉES
Accord du client et documentation technique préalable - Validation avant emploi
VERIFICATION DES PERFORMANCES SUR SITE
ET VALIDATION DES METHODES
Les critères fondamentaux de validation

En principe déterminés par le fabricant de coffrets réactifs et systèmes commerciaux. (exemple dossier
de marquage CE)
Si ces coffrets réactifs et systèmes sont utilisés strictement dans les conditions préconisées par le
fabricant, le laboratoire doit uniquement valider (vérifier) la mise en application dans son
environnement propre.
Beaucoup de facteurs peuvent affecter les performances d’une méthode tels que :
- les différents lots de calibrateurs et de réactifs,
- les changements dans les consommables et de fournisseurs d’accessoires,
- les changements selon les lots de fabrication des instruments et/ou des réactifs,
- les conditions d’expédition et de stockage,
- les conditions ambiantes locales, la qualité de l’eau, la stabilité de l’alimentation électrique
- la compétence (« habileté, dextérité ») de l’utilisateur, …
REPETABILITE
Analyse d’un même échantillon pour la même analyse dans des conditions standardisées :
même opérateur, même lots et réactifs, même instrument, même calibrateur, au cours d’une
même série.
Exploitation des résultats : calculer la moyenne (m), l’écart-type (s) et le coefficient de

variation (CV) des valeurs expérimentales de chaque série.
Plusieurs niveaux de concentration (« bas », « moyen » , « élevé ») choisis en fonction des
valeurs physiopathologiques. Le nombre de détermination dépendra de la cadence de
l’automate, du coût des réactifs,… (compris entre 10 et 30. La valeur statistique des résultats
obtenus dépend de ces effectifs.
Le CV = ( s / m ) x 100, représente la répétabilité de la méthode, exprimé en %.
Il est comparé au CV limite admissible.
Ce calcul répété pour chacun des échantillons (sérum, urine, LCR,…).
REPRODUCTIBILITE / FIDELITE INTERMEDIAIRE
Analyse d’un même échantillon pour la même analyse dans des conditions différentes :
l’opérateur, les lots de réactifs, les calibrateurs et courbes de calibration peuvent être des
données variables.
Réalisée au cours de séries successives, en général 1 à 2 par jour, par le passage des
échantillons de contrôle de qualité interne quotidiens.
30 déterminations minimum sont nécessaires pour chacun des échantillons.
Les modalités de calcul sont identiques à celles de la répétabilité, avec calcul de la
moyenne (m), de l’écart-type (s) et du coefficient de variation (CV) sur les valeurs
expérimentales de chaque série ; le CV ainsi calculé sera comparé au CV limite
admissible.
Le CV représentera la reproductibilité de la méthode, exprimé en %.
JUSTESSE
En biologie médicale, il est impossible de parler stricto sensu de « valeur vraie » et par là-même de justesse.
la valeur cible retenue sera la moyenne des résultats cumulés de l’ensemble des utilisateurs de la méthode. Il
est souhaitable d’utiliser des échantillons de différentes origines commerciales
La justesse est estimée en comparant la moyenne obtenue (m) lors de l’étude de répétabilité et/ou de
reproductibilité à la valeur cible attendue assimilée à la valeur « vraie » (v) de l’échantillon testé. Exprimée en
pourcentage de la valeur cible = ( m – v ) / v x 100
Contrôlée éventuellement à l’aide des valeurs de référence qui pourront être comparées à celles de la littérature.

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Chapitre 5

 Domaine de concentration où L = k x C (ex. 1 à 1000 µg/l)

 Plus petite quantité détectable : Blanc m + 3 s (ex. 0.5 ng)

 Grandeur de la pente k = I / C , aptitude à différencier 2 concentrations

 Aptitude à ne doser que cette substance , à l'exclusion d'interférences

 Capacité à ne pas être affectée par de faibles variations de paramètres

 vrais positifs (VP)

 La valeur prédictive positive correspond à la probabilité qu'un

 La valeur prédictive négative correspond à la probabilité qu'un

Test négatif Faux négatifs Vrai négatifs Total négatifs

Total tests Total malades

 Sensibilité diagnostique 1 / 1+3

Malades S sains Total Valeur

Total Total malades Total (SS)

ISO/CEI 17025 / 5.1 Généralités

« De nombreux facteurs déterminent l'exactitude et la fiabilité des essais :

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Les critères fondamentaux de validation

Exploitation des résultats : calculer la moyenne (m), l’écart-type (s) et le coefficient de

REPRODUCTIBILITE / FIDELITE INTERMEDIAIRE

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