Chapitre 3.

NUTRITION AZOTEE

Pr Abderrahman OUIJJA
Quelle importance joue l’azote pour la plante ?

L’azote, élément fondamental des tissus végétaux (d’un point de vue

quantitatif, c’est le 4e élément nutritif le plus abondant des plantes
par rapport à leur matière sèche), est déterminant de la croissance et
du fonctionnement des plantes et donc du rendement.

Il entre dans la composition chimique de nombreux constituants

végétaux (protéines, enzymes, coenzymes, acides nucléiques, acides
aminés, chlorophylles, alcaloïdes, substances de croissance, etc.).
Comment s’effectue la nutrition azotée chez les plantes ?

(i) Azote minéral : (ii) Azote gazeux :

Généralement, la plupart des plantes Seules les plantes réalisant des

terrestres utilisent, pour leur nutrition symbioses avec des bactéries (plantes
azotée, principalement des formes symbiotiques telles les légumineuses et
minérales de l’azote qu’elles tirent du les plantes actinorhiziennes) peuvent
sol sous forme de nitrates (NO3-) ou de utiliser l’azote atmosphérique gazeux
sels d’ammonium (ou sels (N2).
ammoniacaux, NH4+), qui sont produits
lors de la décomposition des matières
organiques par des microorganismes.
Comment s’effectue la nutrition azotée chez les plantes ?

(iii) Azote organique :

L’utilisation de l’azote organique par les

plantes supérieures est exceptionnelle ;
cependant, ce mode de nutrition
azotée est rencontré chez tous les
végétaux carnivores, saprophytes ou
parasites.
1. UTILISATION DE L’AZOTE MINERAL
1.1. L’azote du sol
 L’azote du sol

Sous les climats tempérés elle est de l'ordre de 1 g

pour 1000 g de sol dans les horizons superficiels
dont :
La majeure partie de l'azote de la
➢ 1 à 2% en moyenne sont sous
biosphère se trouve dans
forme minérale soluble
l'atmosphère (l’air contient
(principalement nitrates (NO3-) et
environ 80% d’azote sous forme ammoniaque (NH4+); en quantités moindres :
gazeuse). nitrites (NO2-) et oxyde nitrique (N2O)) ;

➢ la plus grande partie est essentiellement à l’état

organique
La teneur des sols agricoles en
sous forme de résidus organiques, d'humus et
dérivés azotés est faible. d’autres composants organiques (tels les protéines,
les nucléotides, les acides nucléiques, les acides
aminés, etc.).
 L’azote du sol

Pour les plantes, les formes les plus La matière organique du sol est
constituée de débris d’origine :
utilisables d’azote sont principalement :
- végétale (résidus végétaux, exsudats),
- les nitrates (NO3-) et
- l'ammonium (NH4+). - animale (déjections, cadavres),

Cet azote minéral soluble est obtenu - fongique et microbienne (organismes

grâce à la dégradation de la matière morts, exsudats).

organique du sol.
Phases de dégradation de la matière organique du sol :

(i) Humification (formation de l’humus) :

➢ Opération ayant lieu sous l’action de ➢ Une des caractéristiques

la microflore (bactéries, importantes de ce processus est
actinomycètes, champignons) et/ou l’incorporation de l’azote (N) dans
de la pédofaune (organismes les macromolécules humiques (acide
animaux décomposeurs tels : vers, fulvique, acide humique et humine ;
insectes, acariens, etc.). ces trois macromolécules
constituant l’humus représentent 70
à 90% des matières organiques du
sol), conduisant à un stockage de
l’azote sous forme organique dans le
sol.
 Phases de dégradation de la matière organique du sol

(ii) Minéralisation de l’humus

(transformation de la matière organique
dégradée en substances minérales) :

Ce processus produit principalement

NH4+, NO3-, CO2 (et HCO3-), H2PO4-, SO42-
ainsi que cations (Ca2+, Mg2+, K+, etc.) et
anions (Cl-) plus ou moins liés à la
matière organique.
Réactions de production de l’azote minéral lors de la décomposition de la
matière organique :

Au cours de la décomposition de la
matière organique, l’azote organique est
transformé en azote minéral par une
série de microorganismes au cours des
diverses réactions suivantes : (i) L’ammonification ou l’ammonisation;

(ii) La nitrification;

(iii) La dénitrification.
 Réactions de production de l’azote minéral
lors de la décomposition de la matière organique

(i) L’ammonification ou l’ammonisation :

Consiste en la libération de l’ammonium (NH4+), Dans les sols où le pH est élevé, l’ammonium se

à partir de la matière organique (lors de la transforme en ammoniac gazeux selon la

réaction de réduction (1) suivante :
minéralisation de l’humus);

elle est réalisée par des bactéries NH4+ + OH- → NH3 + H2O (1)

ammonifiantes. ammonium hydroxyle ammoniac eau

(gaz)
 Réactions de production de l’azote minéral
lors de la décomposition de la matière organique

(ii) La nitrification :

Consiste en la production de nitrites (NO2-) et

de nitrates (NO3-) par oxydation de la plus
La nitrification est réalisée par deux groupes
grande partie de l’ammoniac gazeux produit
de bactéries nitrifiantes (bactéries nitreuses
lors de la réaction (1)
et bactéries nitriques) :
(une partie de l’ammoniac peut être volatilisée
et retourne dans l’atmosphère).
 Réactions de production de l’azote minéral
lors de la décomposition de la matière organique

La nitrification La nitrification
+ bactéries nitreuses + bactéries nitriques

Nitrosomonas, Nitrococcus, Nitrospira, Nitrobacter.

Nitrocystis. Ces bactéries agissent après les bactéries

nitreuses, réalisant la nitratation selon la
Ces bactéries réalisent la nitrosation selon la
réaction d’oxydation (3) suivante :
réaction d’oxydation (2) suivante :

2 NO2- + O2 → 2 NO3- (3)

2 NH4 + 3 O2 → 2 NO2 + 2 H2O + 4
+ - H+ (2)
ammonium oxygène nitrite eau hydrogène
nitrite oxygène nitrate
 Réactions de production de l’azote minéral
lors de la décomposition de la matière organique

(iii) La dénitrification :

Par prélèvement de l’azote du sol, les plantes Cette réaction de dénitrification est réalisée selon l’équation
terrestres entrent en compétition vis-à-vis (4) suivante :
de l’azote avec des bactéries dénitrifiantes
(ex : Thiobacillus denitrificans).
4 NO3- + 5 (CH2O) + 4 H+ → 2 N2 + 5 CO2 + 7 H2O (4)
nitrate matière hydrogène azote gaz eau
organique (gaz) carbonique
La dénitrification consiste en la réduction
d’une partie des nitrates issus de la
nitrification en azote gazeux (diazote N2) qui
retourne dans l’atmosphère.
1.2. Utilisation de l’azote minéral
par les végétaux
Préférences des plantes pour l’azote minéral (ammonium ou nitrates) ?

Dans la majorité des sols, grâce aux bactéries nitrifiantes, l’ammonium est
rapidement converti en nitrates (équations 2 et 3).

Avec l’azote organique, l’azote ammoniacal est la forme qu’utilisent la plupart des
champignons.

L’ammonium est une forme très assimilable par les végétaux supérieurs. Certaines
plantes cultivées (telle la Pomme de terre) ont un meilleur rendement avec
l’ammonium ; par contre pour les Graminées, un meilleur rendement est obtenu
avec les nitrates.
Préférences des plantes pour l’azote minéral (ammonium ou nitrates) ?

Les préférences des plantes, pour l’ammonium ou les nitrates, dépendent souvent
de l’âge et des conditions de culture, ainsi :

- Les plantes jeunes préfèrent généralement NH4+ (cas de la Tomate, du Maïs, du

Riz) ; mais il y a des exceptions (Canne à sucre, Cotonnier).

- Le pH a une importance capitale : une diminution du pH favorise l’absorption

et l’assimilation des nitrates (anion), alors qu’une augmentation du pH favorise
celle des ions ammonium (cation).
pH externe

pH conséquences

4 ≤ pH ≤ 9 la diminution du pH réduit
l’absorption des cations,

l’Augmentation du pH réduit
celle des Anions (fig. 1).

pH < 4 entraînent des lésions de la

membrane plasmique et
augmentent les
phénomènes d’exsorption
(sortie des éléments
Fig. 1 - Variation de l’absorption des nitrates
minéraux vers le milieu en fonction de leur concentration dans le
extérieur). milieu (cas du Maïs à pH = 6 et pH = 7,4). 19
1.2.1. Absorption de l’ammonium et des nitrates
 * Absorption de l’ammonium et des nitrates

La richesse du sol en tel ou tel élément minéral implique des interactions ioniques jouant
généralement en sens opposé pour l’ammonium et les nitrates, ainsi :

 NH4+ se comporte comme un cation antagoniste de K+, Ca2+ ou Mg2+.

Des excès de NH4+ peuvent provoquer la carence en ces éléments (cas du Blé) ;
inversement une addition de calcium aux cultures diminue la toxicité de l’ammonium.

 NO3- en tant qu’anion, favorise la pénétration des cations et principalement celle de

K+.

 NH4+ favorise l’entrée des ions phosphoriques, entrée gênée au contraire par NO3-.
1.2.1.1. Azote ammoniacal
 Absorption de l’ammonium

➢ L’entrée des ions NH4+ est passive, et ▪ Ceci pour satisfaire à l’équilibre
se fait par un canal transmembranaire, acido-basique du milieu et pour

sous l’effet de la différence de éviter les dommages que causerait

potentiel créée par l’efflux de protons une augmentation des charges

(pompe H+-ATPase). positives à l’intérieur des cellules

(élévation du potentiel électrique,
➢ L’absorption des ions NH4+ n’est baisse du pH)
possible que si elle est associée au
cotransport d’un anion ou au
(une cellule ne peut fonctionner que si
contretransport d’un cation.
ces paramètres [potentiel électrique et
▪ Les ions qui sont le plus souvent pH] se situent entre certaines limites
associés à cette absorption sont les [homéostasie]).
ions phosphoriques et les protons.
 Absorption de l’ammonium

Milieu extérieur Racine

ex : les engrais ammoniacaux sont
acidifiants :
NH4+ NH4+ → NH3 + H+

H+
le contretransport avec les protons H+
est d’autant plus privilégié que pH

l’assimilation de NH4+ passe par une

déprotonation (fig. 1).
membrane plasmique

Figure 1. Nutrition ammoniacale et variation de

pH.
 Absorption de l’ammonium

Les ions NH4+ sont beaucoup plus toxiques pour les plantes que les ions NO3-, de ce
fait la plupart des végétaux n’accumulent pas NH4+ libre qui peut être en excès dans
la cellule mais l’incorporent rapidement dans les acides aminés pour éviter tout
problème de toxicité

(l’ammonium interfère avec le métabolisme énergétique de la cellule, en particulier

avec la production d’ATP : même faiblement concentré, NH4+ découple la formation
d’ATP du transfert d’électrons aussi bien dans les chloroplastes que dans les
mitochondries).
1.2.1.2. Azote nitrique
 Absorption des nitrates

Pour les végétaux qui ne forment pas d’associations symbiotiques fixatrices d’azote

avec certains microorganismes, la source principale de l'azote est en fait constituée

par le nitrate NO3- qui est la forme azotée la plus abondante dans le sol et la plus

disponible pour les végétaux.

 **Absorption des nitrates

➢ Le transport de NO3- se fairait à ➢ L’absorption des nitrates met en jeu

travers les membranes cellulaires un transporteur (protéine
des racines par un mécanisme constitutive de la membrane). Le
exigeant de l’énergie issue de transporteur est une ATPase
l’hydrolyse de l’ATP (transport actif). spécifique inductible par le nitrate
lui-même. Il n’est donc actif qu’en
présence de NO3- (fig. 2).
➢ L’absorption des ions NO3- se fait
contre le gradient électrochimique
(potentiel électrique endocellulaire
négatif par rapport au milieu
extracellulaire).
 Absorption des nitrates

Démonstration expérimentale :

Une racine maintenue pendant un

certain temps sans NO3- absorbera le
nitrate ajouté après un temps de
latence. Les protéines de transport du
NO3- sont alors synthétisées (fig. 2).

Figure 2. Induction de l’assimilation des nitrates dans

les racines de Maïs. Les racines se sont développées
Au contraire, l’ion Cl- est absorbé dans un milieu dépourvus de chlorures Cl- ou de
directement après avoir été ajouté (par nitrates NO3-. Les chlorures sont absorbés
diffusion facilitée par canaux à Cl-) (fig. immédiatement après leur addition, contrairement

2). aux nitrates qui le sont après un temps de latence.

 Absorption des nitrates

➢ Pour des raisons d’homéostasie, Pour le cation, il s’agit en général de K+

l’absorption des ions NO3- doit être (très mobile et sensible aux variations de
associée au cotransport d’un cation potentiel électrique).
ou au contretransport d’un anion.
Pour l’anion, il s’agit de l’hydroxyle OH-.
 Absorption des nitrates

Les nitrates sont les engrais azotés

minéraux les plus utilisés en
agriculture.

Ils sont très solubles et peuvent être

drainés dans le sol par les eaux de
surface ou très rapidement entraînés
lors de l’écoulement des eaux de
surface vers les cours d’eau et les
nappes phréatiques (ce qui entraîne
une pollution en nitrates de
l’environnement).
 Absorption des nitrates

Les engrais nitriques sont alcalinisants : Milieu extérieur Racine

NO3- NO3- + 8H+ + 8e-

des hydroxyles OH- sont libérés lors de NH3 + 2H2O + OH-

la réduction des nitrates (fig. 3).

pH OH-

membrane plasmique
Figure 3. Nutrition nitrique et variation de
pH.
1.2.2. Assimilation de l’azote minéral
 Assimilation de l’azote mineral

L’assimilation de l’azote par les végétaux assure le passage des formes azotées
minérales absorbées à partir de l’environnement ambiant des végétaux aux
aminoacides et autres composés organiques nécessaires à ces organismes vivants.

**

Cette assimilation s’effectue en 2 phases : (a) la réduction des nitrates ; (b) la

synthèse de la glutamine et du glutamate (acides aminés).
1.2.2.1. Réduction des nitrates
 Réduction des nitrates

La réaction globale de réduction des nitrates (5) s’écrit :

NO3- + 8H+ + 8e- → NH3 + 2H2O + OH- (5)

Comme pour l’absorption des nitrates, leur réduction est également

induite par NO3- et NO2- ; NH4+ a un effet répresseur.

La réduction des ions nitrates s’effectue en deux étapes :

a) la réduction des nitrates NO3- en nitrites NO2-
b) la réduction des nitrites NO2- en ammoniac NH4+
 Réduction des nitrates

a) la réduction des nitrates NO3-

en nitrites NO2-

Réaction catalysée par une nitrate

réductase (NR) (réaction 6 et fig. 4) :

NO3- + 2H+ + 2e- → NO2- + H2O (6)

Figure 4. Activité nitrate réductase dans les racines et

les feuilles de petits pois en fonction de la
concentration en NO3- dans la racine (d’après Wallace
et Pate, 1967).
 Réduction des nitrates NO3- en nitrites NO2-

Nitrate réductase (NR)

➢ La NR est une enzyme contenant du fer,

du molybdène (Mo) et du FAD.

La NR est la principale enzyme

cytosolique à molybdène des plantes
qui ne fixent pas le diazote.

L’une des conséquences de la carence

en molybdène chez les plantes est une
diminution marquée de l’activité de la
NR et donc une carence en azote.
Figure 5. Réduction des nitrates dans les cellules vertes.
 Réduction des nitrates NO3- en nitrites NO2-

Nitrate réductase (NR)

➢ La NR est inductible, c’est-à-dire

qu’elle n’est synthétisée qu’en
présence de NO3-.

➢ Le donneur d’électrons au NO3- est

le NADH (fourni (i) à l’obscurité par
la respiration; (ii) à la lumière
indirectement par la photosynthèse
à partir du NADPH formé dans le
chloroplaste) (fig. 5).

Figure 5. Réduction des nitrates dans les cellules vertes.

 Réduction des nitrates

b) La réduction des nitrites NO2-

en ammoniac NH4+

Grâce à la nitrite réductase (NiR). Les nitrites sont toxiques à haute dose et sont
rarement trouvés en forte concentration dans les
La réduction des nitrites produits dans
plantes. Ceci est dû au fait que l’activité de la NiR est
le cytosol des cellules racinaires
normalement plus élevée que celle de la NR.
s’effectue ensuite - après leur migration
- dans les leucoplastes (pour les racines)
ou dans les chloroplastes (pour les
feuilles) selon la réaction 7 suivante :
Le NH3 formé dans la réaction catalysée par la NiR est
réduit en NH4+ avec libération de OH-.
NO2- + 6 H+ + 6 e- → NH3 + H2O + OH- (7)
 Réduction des nitrites NO2- en ammoniac NH4+

Nitrite réductase (NiR)

➢ La nitrite réductase est un complexe

enzymatique constitué d’une
protéine Fe-S, du sirohème
(groupement tetrapyrrole contenant
le Fe) et d’un FAD.

➢ Dans les feuilles vertes, la

ferrédoxine, qui s’oxyde, est le
donneur d’électrons de la nitrite
réductase chloroplastique.

Figure 5. Réduction des nitrates dans les cellules vertes.

 Réduction des nitrites NO2- en ammoniac NH4+

Nitrite réductase (NiR)

La NiR transfert les électrons sur les

nitrites.

La ferrédoxine sera de nouveau réduite,

dans la feuille par le photosystème I, et
dans la racine par le NADPH (qui tire son
pouvoir réducteur de la respiration,
après transfert de ce pouvoir des
mitochondries aux leucoplastes).

Figure 5. Réduction des nitrates dans les cellules vertes.

 Assimilation de l’azote mineral
Chez la plupart des arbres (Rosacées en particulier), la
réduction des nitrates est si avancée dans la racine que la
sève brute ne contient plus de nitrates mais seulement des
traces de sels ammoniacaux alors que la sève élaborée est
riche en aminoacides et autres composés organiques.
La concentration des nitrates NO3- est
faible dans la racine.
La preuve d’une assimilation suffisante des nitrates dans la
racine est également fournie par le fait que les racines
excisées (racines isolées cultivées in vitro) se développent
parfaitement dans une solution nutritive ne contenant
Une grande partie des ions nitrates, qui
l’azote que sous forme nitrique.
ne peuvent être assimilés directement,
une fois absorbés, sont ensuite réduits
Toutefois, chez de nombreuses espèces, surtout herbacées
en NH4+ d’abord dans les racines.
(Blé), pour les nitrates qui n’ont pas été réduits dans la
racine, la réduction s’effectue dans les feuilles vertes, à la
lumière.
1.2.2.2. Synthèse de la glutamine
et du glutamate
 Assimilation de l’azote mineral

Synthèse de la glutamine et du glutamate

Dans la plante, il existe une coordination entre la

réduction des nitrates et la photosynthèse.
Les aminoacides (glutamine,
glutamate) étant des composés
organiques nécessaires aux végétaux,
La réduction du nitrate ne peut se faire que si la
d’où viennent les squelettes carbonés
photosynthèse est pleinement active et capable de
nécessaires pour leur fabrication ?
fournir l’énergie nécessaire ainsi que les squelettes
carbonés indispensables à l’incorporation de
l’ammonium.
 Assimilation de l’azote mineral

Synthèse de la glutamine et du glutamate

- la glutamine synthétase (GS) catalyse la réaction 8 :

2 Glutamate + 2 NH4+ + 2 ATP → 2 glutamine + 2 ADP + 2 Pi
L’ammonium NH4+ contribue à la
synthèse des premiers acides aminés
(glutamine et glutamate) lorsqu’il est
incorporé dans des molécules
organiques par l’action combinée de - la glutamate synthase (GOGAT ou glutamine-2-oxoglutarate-
deux enzymes : la glutamine synthétase amino-transférase) catalyse la réaction 9 :
Glutamine + α - cétoglutarate + NADH + H+ → 2 glutamates +
(GS) et la glutamate synthase (GOGAT)
NAD+
(voie du cycle de la glutamate
synthase).
 Assimilation de l’azote mineral

Synthèse de la glutamine et du glutamate

Dans les espèces qui ne fixent pas le La GS est localisée dans le cytosol et dans les
diazote atmosphérique, la GS ainsi que chloroplastes des cellules foliaires.
la GOGAT sont habituellement
rencontrées dans les cellules des racines
La GOGAT est une enzyme plastidiale, située dans les
et des feuilles.
leucoplastes des racines et les chloroplastes des
feuilles.
 Assimilation de l’azote mineral

Synthèse de la glutamine et du glutamate

Les acides aminés ne s'accumulent pas, L’azote contenu dans la glutamine et la glutamate
ils sont immédiatement métabolisés par est alors transféré à des acides organiques pour
des réactions catalysées par différentes permettre la synthèse de métabolites primaires et
enzymes et sont le point de départ de secondaires.
nombreux métabolites.
 Assimilation de l’azote mineral

Synthèse de la glutamine et du glutamate

(i) Métabolites primaires : (ii) Métabolites secondaires :

les peptides et d’autres acides aminés alcaloïdes, terpénoides, hétérosides et composés

sont utilisés pour la synthèse des phénoliques par des réactions catalysées par

protéines (de structure et de réserve, des différentes enzymes.

vitamines, des enzymes du métabolisme),
nucléotides, acides nucléiques et toutes
les molécules contenant de l’azote
(auxine, éthylène, etc.);
 Assimilation de l’azote mineral

Synthèse de la glutamine et du glutamate

Le carbone provenant de la photosynthèse

est fourni, à partir du cycle des acides
tricarboxyliques (cycle de Krebs), sous
forme d’α-cétoglutarate, molécule
nécessaire pour la réaction catalysée par le
GOGAT.

Dans certaines conditions physiologiques,

l’α-cétoglutarate peut provenir de la
réaction catalysée par la glutamate
déshydrogénase (GDH) (fig. 9). Figure 9. Principales étapes de l’assimilation de l’azote chez
les plantes supérieures.
 Assimilation de l’azote mineral

Synthèse de la glutamine et du glutamate

La forte affinité de la GS pour NH4+ ainsi que

la concentration élevée en GS, permettent le
maintien d’une concentration en NH4+ libre,
inférieure au seuil de toxicité.
Régulation de l’absorption des nitrates :

a) Par les acides aminés :

Une forte inhibition de l'absorption des nitrates Ceci laisse penser que les acides aminés
par les racines est notée dans les cas suivants : ou les peptides qui circulent dans le

➢ la composition de la sève élaborée en acides phloème interviendraient dans le

aminés (comme l'arginine, l'alanine et la contrôle de la quantité de nitrates

glutamine). absorbée par les racines et ceci par une

possible inhibition de l'activité de la
➢ lors d'un apport directe d'acides aminés dans
glutamine synthétase (GS) responsable
le milieu de culture (Muller et Touraine,
de l'assimilation de l'ammoniaque.
1992).
Régulation de l’absorption des nitrates :

b) Par les acides organiques :

Au cours de la réduction des nitrates en ammonium Pour des raisons d’homéostasie du pH, la
il y a libération des ions hydroxyles OH- (réaction 7). plante synthétise des acides organiques
en utilisant ces ions OH-.

Ces ions OH- sont transférés sur un maillon

-
NO2 + 6 H+ +6 e- → NH3 + H2O + OH- (7)
carboné pour former le bicarbonate (HCO).
Par la suite ce bicarbonate réagit avec le
Ces ions hydroxyles ont tendance à alcaliniser le phosphoénolpyruvate (PEP) grâce à une
suc vacuolaire des cellules foliaires. PEP carboxylase et forme l'oxaloacétate
qui va se transformer par la suite en
d’autres acides organiques.
 Régulation de l’absorption des nitrates

Acides organiques

Ainsi une réduction importante des nitrates Ces acides organiques s'associent au K+ et
entraîne une accumulation importante d'acides sont transportés vers les racines où ils sont
organiques dans les feuilles. décarboxylés. Le bicarbonate est excrété
par les racines, et le K+ accompagne de
nouveau les anions nitrates vers les feuilles
par voie du xylème (Touraine et al., 1988).
 Régulation de l’absorption des nitrates

Acides aminés et acides organiques

Les acides aminés circulant dans le la libération dans le milieu extérieur du

phloème et les acides organiques ont bicarbonate HCO (grâce à la

deux effets opposés sur le contrôle de décarboxylation des acides organiques)

l'absorption des nitrates : stimule l'absorption des nitrates, tandis

qu’un taux élevé d’acides aminés inhibe
cette absorption des nitrates.

Ces deux phénomènes ne fonctionnent

pas d'une façon parallèle sur la
régulation de l'absorption des nitrates,
ainsi :
 Régulation de l’absorption des nitrates / Acides aminés et acides organiques

(i) Pendant la période de croissance (ii) Durant la formation du fruit :

végétative :

(a) Les taux de réduction des nitrates, de Grâce à la protéolyse des protéines foliaires,
synthèse des carboxylates et de synthèse la concentration des acides aminés exportés
des acides aminés sont élevés. vers le fruit augmente, (b) le phloème
s'enrichit donc en composés azotés et en
La majeure partie des acides aminés est
même temps (a) le taux de réduction des
utilisée localement pour la synthèse des
nitrates au niveau des feuilles baisse et
chlorophylles et de plusieurs protéines et par
l'efficacité des ions bicarbonates au niveau
conséquent (b) le taux des acides aminés
des racines diminue.
dans le phloème diminue.

Par ailleurs (c) les carboxylates sont exportés

rapidement vers les racines et l'absorption
des nitrates est alors favorisée.
2. UTILISATION DE L’AZOTE MOLECULAIRE
L’air atmosphérique terrestre renferme
environ 80% d’azote.

Cependant, cet azote moléculaire libre

gazeux (diazote, N2) ne constitue une (i) des microorganismes libres, nommés

source d’azote que pour des espèces aussi diazotrophes ou fixateurs libres ;

appartenant à deux groupes d’organismes

(ii) des végétaux symbiotiques, nommés
vivants (nommés fixateurs d’azote)
aussi fixateurs symbiotiques.
seulement :
(i) Microorganismes libres (ii) Végétaux symbiotiques
(ou diazotrophes ou fixateurs libres) : (ou fixateurs symbiotiques) :

il s’agit : il s’agit :

α - des légumineuses (fève, pois, soja, haricot,

α - des bactéries des genres Azotobacter,
lentilles, etc.), pour lesquelles l’association
Clostridium, Bacillus, Aerobacter,
symbiotique est réalisée entre la plante et une
Chromatium, ...;
bactérie appartenant à l’un des quatre
principaux genres suivants : Rhizobium,
Bradyrhizobium, Mesorhizobium ou Ensifer
β - des cyanobactéries (algues bleues) des (désignés sous le terme Rhizobia ou Rhizobiums).

genres Anabaena, Nostoc, Calothrix, …. ;

β - des plantes actinorhiziennes (qui sont des
arbres ou des arbustes tels l’Aulne, etc.), pour
lesquelles la symbiose est réalisée entre la plante
et une Actinomycète (bactérie filamenteuse) du
genre Frankia.
Dans ce cours, l’attention sera mise seulement sur les végétaux symbiotiques.
2.1. Développement des nodosités des légumineuses
A l'état libre dans le sol :

les Rhizobia et Frankia (représentant les

symbiontes) sont incapables de fixer
l'azote atmosphérique.
Dans les associations symbiotiques :
Ces bactéries aérobies (Rhizobia et
Frankia) acquièrent la propriété de
fixation de l’azote moléculaire nodosité
lorsqu'elles pénètrent dans les jeunes
racines des plantes (représentant l’hôte).

La réaction de l'hôte se traduit par la

formation, sur les racines, de petits
renflements appelés nodosités ou nodules
de couleur rose (couleur due à une
chromoprotéine nommée
Figure 10 . Racines de soja (Glycine max) portant des
léghémoglobine) (fig. 10). nodosités.
 Développement des nodosités des légumineuses

L’établissement de la symbiose Rhizobia - légumineuses ou Frankia - plantes

actinorhiziennes est complexe.
Etapes clés du développement des nodosités chez les légumineuses :

A – Courbure, en forme de crochet, à l’extrémité

des poils absorbants :

L'infection par les Rhizobia se produit au

niveau des poils absorbants.

Sous l'influence des bactéries qui les

envahissent en grand nombre, les poils
absorbants se recourbent en forme de

Figure 12. Représentation schématique du crochet à leur extrémité (fig. 12).

mécanisme d’infection des racines de
légumineuses par des rhizobiums provoquant
la formation d’un nodule (dans Hopkins,
2003).
 Etapes clés de la formation des nodosités chez les légumineuses

B – Formation d’un cordon d’infection bactérien

et différenciation des bactéroïdes :

(i) Formation du cordon d’infection bactérien :

Après une dégradation partielle de la paroi cellulaire

des poils absorbants de la plante hôte par les

bactéries, un cordon d’infection bactérien

(invagination en forme de tube de la membrane

plasmique de la cellule hôte renfermant des

Figure 12. Représentation schématique du bactéries en multiplication active) pénètre dans les
mécanisme d’infection des racines de
légumineuses par des rhizobiums provoquant poils absorbants puis atteint, en se ramifiant, le
la formation d’un nodule (dans Hopkins,
2003). parenchyme cortical de la racine (fig. 12).
 Etapes clés de la formation des nodosités chez les légumineuses
B – Formation d’un cordon d’infection bactérien
(ii) Différenciation des bactéroïdes :
et différenciation des bactéroïdes
Dans les cellules du parenchyme racinaire, les cordons
d’infection éclatent. Les Rhizobia libérés cessent de se
multiplier et subissent des modifications
morphologiques (accroissement de taille, acquisition
de formes plus ou moins globuleuses) et des
différenciations biochimiques (synthèse de protéines
particulières, acquisition de la capacité de fixer l’azote
atmosphérique) : les bactéries sont devenues alors
des bactéroïdes.

Les bactéroïdes sont enfermés dans des vésicules

limitées par une membrane péribactéroïdienne et
Figure 11. Schéma d’une vue au microscope électronique constituent un ensemble nommé symbiosome (fig.
de nodules de Soja (légumineuse) (dans Heller et al.,
1998). 11).
 Etapes clés de la formation des nodosités chez les légumineuses

C - Formation des nodosités : La nodosité se forme par multiplication des cellules

infectées par les bactéries (fig. 12).

Des faisceaux vasculaires se différencient dans les

nodules et rejoignent ceux des racines. Le rôle de
ces connexions des tissus conducteurs est
d’importer dans le nodule le carbone issu de la
photosynthèse et d’exporter l’azote fixé vers les
autres parties de la plante hôte (on a donc bien
une symbiose, c’est-à-dire une association à
bénéfice réciproque).
Figure 12. Représentation schématique du
mécanisme d’infection des racines de Généralement, à la floraison, les nodules
légumineuses par des rhizobiums provoquant dégénèrent suite à la lyse des bactéroïdes et à la
la formation d’un nodule (dans Hopkins,
dégradation de la léghémoglobine.
2003).
2.2. Aspects biochimiques de la fixation de l’azote
moléculaire
 Biochimie de la fixation de l’azote moléculaire

**

L’assimilation de l’azote gazeux par les végétaux symbiotiques s’effectue en

deux phases :

a) Réduction de l’azote moléculaire.

b) Synthèse de la glutamine et du glutamate.
2.2.1. Réduction de l’azote moléculaire
 Aspects biochimiques de la fixation d’azote

**

L’azote moléculaire N2 subit une

réduction en ammoniac (NH3, NH4+ ou
R-NH2) selon l’équation globale (10)
suivante :

N2 + 8e- + 8 H+ + 16 ATP → 2 NH3 + H2 + 16 ADP + 16 Pi (10)

Cette réaction catalysée par une enzyme : la nitrogénase

2.2.1.1. Rôles du symbionte et de la plante hôte dans la symbiose Rhyzobiums - légumineuses

(i) Le symbionte :

Seuls les procaryotes fixateurs de l’azote La fixation de l’azote moléculaire par les
atmosphérique possèdent la nitrogénase. Rhizobia au niveau des nodosités des
légumineuses exige la fourniture permanente à
la nitrogénase : (i) d'énergie (sous forme d’ ATP)
et (ii) d'un pouvoir réducteur important
(habituellement la ferrédoxine). Ces composés
biochimiques sont obtenus par une respiration
active du symbionte (Rhizobium).
 Rôles du symbionte et de la plante hôte
dans la symbiose Rhyzobium - légumineuse

(ii) La plante hôte :

L'activité photosynthétique de la plante hôte Il existe donc une relation étroite entre la
assure l'approvisionnement des nodosités en fixation de l'azote et la photosynthèse,
molécules oxydables et permet de disposer aussi
cette dernière fonction métabolique peut
de squelettes carbonés (photoassimilats ou
constituer un des premiers facteurs limitants
photosynthétats : glucides) pour l'assimilation du
du rendement de la symbiose (l’assimilation
NH3 produit.
de l’azote moléculaire est très faible à
l’obscurité).
2.2.1.2. Régulation de la nitrogénase

➢ La synthèse et l’activité de la nitrogénase sont inhibées par l’ammonium ainsi que par les
nitrates, en général.

➢ La nitrogénase est également inactivée par l’oxygène, d’où le rôle de la léghémoglobine

comme régulateur de la tension d’oxygène au niveau des nodules du fait de sa forte
affinité pour l’O2 (comme l’hémoglobine sanguine des animaux).

Dissoute dans le cytoplasme des cellules racinaires contenant les bactéroïdes (et ne pénètre
donc pas dans les vésicules bactéroïdiennes (fig. 11)), la léghémoglobine assure à ces derniers
une teneur suffisante en oxygène pour permettre leur respiration (qui fournit l’ATP et les
réducteurs), tout en abaissant sensiblement la pression partielle d’oxygène, ce qui
permettrait l’action de la nitrogénase.
Remarque :

La nitrogénase n’est pas spécifique.

Elle possède en particulier une activité hydrogénase et catalyse la réaction de réduction des
protons en H2 moléculaire selon l’équation (11) suivante :

2 e- + 2 H+ → H2 (11)
2.2.2. Synthèse du glutamate
et de la glutamine
2.2.2.1. Exportation de l’azote fixé dans les nodosités vers la plante hôte

Environ 80 à 90% de l’azote fixé est L’ammonium formé n’est pas exporté tel

rapidement exporté des nodosités vers le quel à partir des bactéroïdes, mais il est

reste de la plante hôte. incorporé rapidement au glutamate pour

former la glutamine, premier produit

organique formé source de l’azote aminé

dans les nodules de légumineuses.

 Exportation de l’azote hors des nodosités

L’assimilation de l’ammonium dans la

glutamine emprunte la voie du cycle de la

glutamate synthase, voie qui implique

l’action de la glutamine synthétase (GS) et

de la glutamate synthase (GOGAT).

La GS et la GOGAT sont deux enzymes

présentes dans le cytoplasme des cellules
de la plante hôte infectées par les Rhizobia.
 Exportation de l’azote hors des nodosités

Ces deux enzymes (GS et GOGAT) catalysent les deux

réactions du cycle de la glutamate synthase (fig. 13)
selon les équations (8) et (9) précédentes.

GS
2 Glutamate + 2 NH4+ + 2 ATP → 2 glutamine + 2 ADP + 2 Pi (8)

GOGAT
Glutamine + α-cétoglutarate + NADH + H+ →
→ 2 glutamates + NAD+ (9)
GOGAT

Figure 13. Assimilation de l’ammonium par le cycle de la

glutamate synthase. Par l’addition d’ions ammonium à deux
molécules de glutamate, deux molécules de glutamines sont
formées ; la réaction est catalysée par la glutamine synthétase
(GS). Une molécule de glutamine génère deux molécules de
glutamate après réaction avec
l’α-cétoglutarate, tandis que l’autre est exportée vers la plante
hôte ; cette seconde réaction est catalysée par la glutamate
synthase (GOGAT).
 Exportation de l’azote hors des nodosités

L’α-cétoglutarate est un intermédiaire de

l’oxydation du glucose produit lors de la
respiration.

Les squelettes carbonés fournis par la

photosynthèse de l’hôte et l’azote fixé par
les symbiontes se combinent pour former
de l’azote organique qui est exporté hors
du nodule afin d’être utilisé par la plante
hôte.
 Exportation de l’azote hors des nodosités

Les composés azotés produits dans les nodosités Glutamine

et exportés à partir de celles-ci sont soit des C5H10N2O3
C4H8N2O3
amides (glutamine et asparagine) soit des
uréides (dérivés de l’urée tels la citrulline (acide
aminé non protéique identifié la 1ère fois chez la
pastèque), l’urate, l’allantoïne (acide aminé qui
participe à la biogenèse de l’urée), etc.). Urée
CO(NH₂)₂

Ces produits azotés se déversent principalement

dans le xylème de la plante hôte et assurent
ainsi, en transitant avec la sève brute, la Allantoïne
C6H13N3O3 C4H6N4O3
nutrition azotée de tous les organes de la plante
hôte ou sont mis en réserve dans les graines.
2.2.2.2. Exsudats racinaires

Entre 10 et 20% de l’azote fixé sont excrétés

sécrétés (ou exsudés) dans la rhizosphère
(environnement de la racine) sous forme
d’acide aspartique ou glutamique.

Ces faibles teneurs enrichissent le sol en

azote organique mis à la disposition de la
microflore édaphique et des végétaux non
fixateurs d’azote.
3. UTILISATION DE L’AZOTE ORGANIQUE
Toutes les plantes ont la faculté d'absorber l'azote sous forme de petites molécules
organiques (acides aminés (surtout acides glutamique et aspartique, glutamine, asparagine),
urée, acide urique, etc.).

Toutefois, pour les végétaux supérieurs, cette voie est toujours minime pour la racine (acides
aminés), mais elle a une importance significative lorsqu'on a recours aux pulvérisations
foliaires.
L’assimilation de l’azote sous forme organique se produit chez les organismes vivants suivants :

(i) Les plantes carnivores :

(Dionea, Drosera, Nepenthes, ...) (fig. 14) :

elles sont capables de capturer des insectes, de les

digérer par la sécrétion de protéases et d'absorber, par
voie foliaire, les acides aminés et les petites molécules
organiques azotées ainsi produites.

Ce type d'alimentation azotée est le fait d'une

adaptation des plantes se développant sur des
substrats pauvres en azote minéral (plantes de
marécages et de tourbières à sols très acides assurant
une mauvaise minéralisation des déchets azotés).
L’assimilation de l’azote sous forme organique se produit chez les organismes vivants suivants :

(i) Les plantes carnivores :

Les organes préhenseurs sont généralement des

feuilles modifiées transformées en pièges passifs
(urnes de Nepenthes) ou actifs (poils immobilisant la
proie chez Drosera, volets du limbe garnis de griffes
et se renfermant sur l’insecte chez les Dionées, etc.)
(fig. 14).
 Organismes vivants montrant une assimilation de l’azote organique

(ii) Les plantes parasites : Cuscute

(Cuscute, Gui, Orobanche) :

elles vivent fixées sur les parties aériennes ou

souterraines de leurs hôtes ;

elles prélèvent au niveau des tissus conducteurs -

grâce à leurs suçoirs contenant des enzymes Gui
hydrolysant les protéines des plantes hôtes - les
produits azotés issus de la dégradation de ces Orobanche
protéines.
 Organismes vivants montrant une assimilation de l’azote organique

(iii) Les champignons carnivores, saprophytes,

a.
parasites ou symbiotes :

- Les champignons carnivores (Dactylella acrochaete,

etc.), dont les filaments mycéliens immobilisent et
digèrent les nématodes du sol.
b.
- Les champignons saprophytes (Saprolenia, …).

- Les champignons parasites (mildiou : Plasmopara

viticola).

- Les champignons symbiotes (champignons de

a, b : filaments mycéliens de
lichens).
Dactylella immobilisant des
nematodes du sol.
Fin_Chapitre 3/ Nutrition azotée.