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    Cultivo in Vitro Anteras

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    Este documento describe la técnica de cultivo de anteras, la cual permite producir líneas homocigotas a partir de poblaciones segregantes mediante el doblamiento cromosómico del polen haploide y la regeneración de plantas. El proceso implica inducir la formación de microcallos en las anteras usando un medio rico en auxinas, y luego regenerar plantas a partir de estas células. El cultivo de anteras tiene aplicaciones como la producción de haploides y la obtención de plantas homocigotas para acortar los c

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    Cultivo in Vitro Anteras

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    Este documento describe la técnica de cultivo de anteras, la cual permite producir líneas homocigotas a partir de poblaciones segregantes mediante el doblamiento cromosómico del polen haploide y la regeneración de plantas. El proceso implica inducir la formación de microcallos en las anteras usando un medio rico en auxinas, y luego regenerar plantas a partir de estas células. El cultivo de anteras tiene aplicaciones como la producción de haploides y la obtención de plantas homocigotas para acortar los c

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    CULTIVO IN VITRO ANTERAS

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    Este documento describe la técnica de cultivo de anteras, la cual permite producir líneas homocigotas a partir de poblaciones segregantes mediante el doblamiento cromosómico del polen haploide y la regeneración de plantas. El proceso implica inducir la formación de microcallos en las anteras usando un medio rico en auxinas, y luego regenerar plantas a partir de estas células. El cultivo de anteras tiene aplicaciones como la producción de haploides y la obtención de plantas homocigotas para acortar los c

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    El sueño de todo

    fitomejorador es la
    obtención de un nuevo
    cultivar mejorado en el
    menor número posible de
    generaciones
    Con esta técnica, es posible la
    obtención de plantas haploides, cuyo
    número (n) de cromosomas puede ser
    duplicado mediante tratamientos con
    colchicina, mediante el cultivo de
    células sexuales, ya sean las
    microsporas o los óvulos (aunque es
    más común el cultivo de anteras y
    granos de polen), y la subsiguiente
    regeneración de plantas.
    El número de especies en la que se produjeron
    plantas haploides es importante e incluye a plantas
    hortícolas (ají, tomate, berenjena, papa, nabo),
    frutícolas (manzano, vid, cerezo), cereales (trigo,
    centeno, cebada, maíz), forrajeras (ray grass,
    festuca), forestales (álamo).
    El cultivo de anteras (CA) es
    una técnica por medio de la
    cual es posible producir
    líneas homocigotas a partir
    de poblaciones segregantes,
    mediante el doblamiento
    cromosómico del polen
    haploide y la regeneración
    de plantas en un ciclo de
    cultivo in vitro.
    En una primera fase del C.A. se induce la formación
    de microcallos colocando las anteras en un medio
    cuya composición estimule selectivamente la división
    mitótica de las microspóras, a expensas de las células
    somáticas en el filamento, el tejido conectivo y la
    pared de la antera.
    El medio para inducir esa
    formación debe tener altas
    concentraciones de auxinas.
    Posteriormente se produce
    la regeneración de plantas.
    En cuanto al estado fisiológico y edad de la planta
    donadora de las anteras o microsporas
    las plantas madre deben ser vigorosas y estar libres
    de cualquier tipo de estrés ambiental o problema
    fitopatológico.
    Salvo en muy raras ocasiones, el polen maduro no
    responde al cultivo, por lo que debe ser colectado en
    cierto estadio de desarrollo antes de su maduración.
    Por lo general el polen colectado durante la primera
    división mitótica de las microsporas uninucleadas es el
    que tiene una mayor capacidad de desarrollo in vitro.
    Se recomienda así mismo realizar un pre tratamiento,
    el más recomendable es con frío, es decir, colocar los
    botones a 5-8°C por 7-10 días. Este tratamiento con
    frío tiene un efecto sincronizador en el desarrollo del
    polen lo cual resulta benéfico al momento de obtener
    el cultivo.
    Para la inducción de la embriogénesis pueden
    cultivarse directamente las anteras aisladas en un
    medio con agar o en un medio líquido, provocándose
    la embriogénesis dentro de la antera, o puede aislarse
    el polen de la antera, mecánica o naturalmente, y se
    cultiva en un medio líquido. Las plántulas haploides
    emergen de las anteras cultivadas entre tres y ocho
    semanas después
    PARTE PRÁCTICA
    CULTIVO DE ANTERAS
    Tipo de Explante
    Pimpollos de cualquier especie disponible, según la época del año.

    Metodología:
    1- Desinfección del tejido:
    -Tratar los pimpollos con etanol (70%) 1 minuto.
    -Colocar en solución de hipoclorito de sodio 20% durante 5 minutos.
    -Enjuagar tres veces con agua estéril, bajo campana de flujo laminar.

    2- Disección de las anteras: este trabajo debe realizarse en forma aséptica (bajo
    campana de flujo laminar).

    -Esterilizar los instrumentos a utilizar (bisturí, agujas, pinzas).


    -Limpiar el área de disección con una solución de etanol 70%.
    -Sostener el pimpollo desinfectado con una pinza estéril y remover el cáliz y la
    corola.
    -Con un bisturí fino separar las anteras de los filamentos y depositarlas
    suavemente en el medio de cultivo.
    -Incubar en la cámara de cultivo, bajo condiciones controladas de luz y
    temperatura.

    Aplicaciones
    * Producción de haploides.
    ** Obtención de plantas homocigotas en todos sus caracteres.
    *** Acortar los ciclos de mejoramiento

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