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    Colorimetria

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    Andrea Suárez
    Este documento describe una práctica de laboratorio sobre espectrofotometría molecular. La práctica involucra preparar soluciones de diferentes concentraciones de un colorante alimentario y utilizar un espectrofotómetro para generar un espectro de absorción y una curva de calibración para determinar la concentración desconocida.

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    Este documento describe una práctica de laboratorio sobre espectrofotometría molecular. La práctica involucra preparar soluciones de diferentes concentraciones de un colorante alimentario y utilizar un espectrofotómetro para generar un espectro de absorción y una curva de calibración para determinar la concentración desconocida.

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    Practica de

    espectrofotometría
    molecular
    Andrea Suarez Montoya
    Ingeniería Biológica

    Daniela García Ruiz


    Ingeniería Biológica
    Índice
     Introducción
     Objetivos
     ¿ Que es espectrofotometría?
     ¿Como funciona un espectrofotómetro?
     Ley de Beer
     Practica de laboratorio
     Conceptos
     Resultados
     Espectro de Absorción
     Curva de calibración
     Discusión
     Conclusiones
     Bibliografía
    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica
    Introducción
    Los métodos ópticos de análisis
    químico son los que miden la radiación
    electromagnética que emana o
    interactúa con la materia. Estos,
    tienen como objeto, la medida de la
    radiación que es emitida, absorbida, o
    transmitida al interactuar con las
    moléculas.

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    Objetivos
     General
     Utilizar la técnica de espectrofotometría,
    para determinar las partes por millón
    de un determinado colorante de
    alimentos.
     Específicos
     Comprender los conceptos de
    espectrofotometría.
     Comprender la ley de beer y sus
    limitaciones



    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica
    ¿Qué es espectrofotometría?
     Se denomina espectrofotometría a la
    medición de la cantidad de energía
    radiante que absorbe un sistema
    químico en función de la longitud de
    onda, de la radiación, y a las mediciones
    a una determinada longitud de onda.

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    Aplicaciones de la
    espectrofotometría
     La principal aplicación de la
    espectrofotometría es la
    determinación de la concentraciones
    ya sea de sustancias químicas o de
    microorganismos presentes en una
    solución

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    ¿COMO DETERMINAR CONCENTRACIONES
    POR ESPECTROFOTOMETRÍA?

    Para comenzar se deben definir 3


    conceptos fundamentales:

     Absorbancia
     Transmitancia
     Concentración

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    Para comenzar: Espectro de
    absorción

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    Curva de calibración

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    Ley de Beer
     Laley de Beertiene en cuenta el área
    y el número de partículas qué
    atraviesa un haz de luz, deduciendo
    de esto la energía que queda
    atrapada. Con estas variables se
    desarrollo la siguiente ecuación:
     A = ε·b·c

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    LIMITACIONES DE LA LEY DE
    BEER
     Solodescribe el comportamiento de la
    absorción en concentraciones mucho
    menor a 0,01M

     Se observa una adhesión estricta a la


    ley de Beer solamente cuando la
    radiación es monocromática
    verdadera

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    ¿Como funciona un
    espectrofotómetro?
     El funcionamiento de un
     Espectrofotómetro

     consiste básicamente en

     iluminar la muestra con

     luz blanca y calcular la

     cantidad de luz que

     refleja dicha muestra en

     una serie de intervalos

     de longitudes de onda.

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    Practica de laboratorio

    1- Se preparo una solución de 3- Con la longitud de onda hallada,
    482,8 ppm de rojo ponceau calculamos la absorbancia de las
    (4R), y a partir de esta se anteriores disoluciones para crear la
    crearon, distintas disoluciones curva de calibración
    de:
    10ppm, 15ppm, 20ppm,

    25ppm, 30ppm


    4- Tomamos la absorbancia de la
    2- Con la disolución de 15ppm, muestra, y con esta se puede
    calculamos en el espectrofotómetro, determinar las ppm del colorante
    en cual longitud de onda, se tiene
    mayor absorbancia.

    Colorimetría - Laboratorio Química Analítica


    Conceptos


     Colorante
     Colorante artificial o sintéticos
     Colorantes azoicos

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    Colorante Rojo Ponceau (4R):
     Según el Ministerio de salud (resolución
    numero 10593 de16 de Julio de 1985):


     Origen: 
    Colorante sintético azoico.
     Función & características: 
    Colorante rojo alimentario. Muy soluble
    en agua.
     Ingesta diaria: 
    Máximo 4 mg/kg de peso corporal.
     Efectos colaterales: 
    Desde 1976 no se utiliza en Estados
    Unidos. Se ha discutido su posible efecto
    cancerígeno. Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica
    Estructura química del 4R

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    Espectro de absorción: sln 15
    ppm

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    Curva de calibración

    Colorimetría - Laboratorio Química Analítica


    Resultados
    Grupo 1
     Absorbancia de la muestra: 0,803
     Ppm diluida: 28.82 ± 3,035x10-5
    Grupo 2:

     Absorbancia de la muestra: 0,757


     Ppm diluida: 27,07 ± 2,850x10-5
    Grupo 3:

     Ppm diluida: 29,45± 3,101x10-5


    Grupo 4:

     Ppm diluida: 29.07± 3,062x10-5

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    Resultados

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    Resultados
    Concentraciones iniciales:


     Grupo 1: Ci: 1441,25 ppm
     Grupo 2: Ci: 1353,85 ppm
     Grupo 3: Ci: 1472,5 ppm
     Grupo 4: Ci: 1453,85 ppm

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    Resultados
     Promedio partes por millón de colorante
    diluido: 28,6055 ± 3,012x10-5 ppm
     Concentración inicial promedio:
     CixVi=CfxVf
     Cix1ml=28,6055x50ml
     Ci= 1430,27 ppm

    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    Conclusiones
     Se puede concluir que la
    espectrofotometría es un método
    bastante preciso pues los valores dieron
    todos bastante cercanos.
     Podemos concluir que un error se pudo
    haber dado al medir inexactamente los
    volúmenes al preparar las soluciones.
     Podemos afirmar que la solución estudiada,
    sobrepasa en 7 veces, la cantidad
    permitida por en invima, entidad que
    regula los alimentos y medicamentos.
     Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica


    Bibliografía
     SKOOG, D.A y WEST D.M. Química analítica. 5ª ed.
    España, 2002
     Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y
    Alimentos – Invima
    (http://web.invima.gov.co/portal/documents/portal/
    documents/root//resolucion_10593_1985.pdf).
    Citado Jueves 11-nov 1:35pm
     Dirección Nacional de Servicios Académicos Virtuales
    (http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/200
    1184/lecciones/Cap05/05_04_01.htm) Citado
    Sabado 13-nov 7:35pm
     Sistema de Bibliotecas - Universidad Nacional de
    Colombia – SINAB
    (http://www.sinab.unal.edu.co/ntc/NTC1325.pdf).
    Citado Jueves 11-nov 1:43pm
    Colorimetría - Laboratorio Quimica Analitica
    Fin
    Gracias por la atención.

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