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    Inmunodx Perfil Tiroideo Exudado Faringeo

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    Renato Sánchez Julca
    El documento describe varios métodos inmunológicos como el radioinmunoanálisis, la inmunofluorescencia, el enzimoinmunoanálisis y la quimioluminiscencia. Estos métodos se utilizan para la detección de antígenos y anticuerpos con alta sensibilidad y especificidad. También se detallan los principios, usos y ventajas de cada método.

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    Inmunodx Perfil Tiroideo Exudado Faringeo

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    Renato Sánchez Julca
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    El documento describe varios métodos inmunológicos como el radioinmunoanálisis, la inmunofluorescencia, el enzimoinmunoanálisis y la quimioluminiscencia. Estos métodos se utilizan para la detección de antígenos y anticuerpos con alta sensibilidad y especificidad. También se detallan los principios, usos y ventajas de cada método.

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    El documento describe varios métodos inmunológicos como el radioinmunoanálisis, la inmunofluorescencia, el enzimoinmunoanálisis y la quimioluminiscencia. Estos métodos se utilizan para la detección de antígenos y anticuerpos con alta sensibilidad y especificidad. También se detallan los principios, usos y ventajas de cada método.

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    Renato Sánchez Julca
    El documento describe varios métodos inmunológicos como el radioinmunoanálisis, la inmunofluorescencia, el enzimoinmunoanálisis y la quimioluminiscencia. Estos métodos se utilizan para la detección de antígenos y anticuerpos con alta sensibilidad y especificidad. También se detallan los principios, usos y ventajas de cada método.

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    PRUEBAS INMUNOLOGICAS

    En los ltimos 25 aos se han descrito una serie de mtodos


    para la determinacin de antgeno anticuerpo, de gran
    sensibilidad y marcada especificidad.
    Tenemos:
    Radioinmunoanlisis (RIA)
    Inmunofluorescencia
    Enzimoinmunoanlisis (ELISA)
    Quimioluminiscencia

    RADIOINMUNOANALISIS
    (RIA)

    Consiste en la medicin de la radiactividad de


    los complejos antgeno (Ag) Anticuerpo (Ab)
    marcados con material radioactivo.
    Prueba de alta sensibilidad.
    Utiliza muestras de pequeos volmenes.
    Cuantifica pequeas cantidades de Ag. No
    detectables por mtodos convencionales.
    Es muy utilizado en Endocrinologa para
    cuantificacin de hormonas pptidas.

    PRINCIPIO
    El RIA mas utilizado es el de competicin.
    Consiste en la inhibicin competitiva de la unin
    del Ag. Marcado (radioactivo) a un anticuerpo
    especfico por parte del Ag. No marcado.

    Ab.
    Anticuerpo Especfico

    Ag.*
    Antgeno marcado con
    material radioactivo

    Ab. - Ag.*
    Complejo soluble Anticuerpo
    y Antgeno marcado

    RADIOINMUNOANALISIS
    (RIA)
    Como consecuencia se emite radioactividad que es
    captado por aparatos especiales.
    Para las lecturas se hace teniendo en cuenta las curvas
    patrones de titulacin.
    Se pueden determinar concentraciones de Ag. en
    muestras complejas de fludos biolgicos con suficiente
    sensibilibad y especifidad.

    Actualmente es usada en medicina nuclear.

    Desventajas:
    Empleo de Isotopos radioactivos como
    marcadores (Yodo radioactivo, C14, H3), por lo
    que los laboratorios estan sujetos a
    reglamentacin especial, en cuanto al manejo,
    almacenamiento y eliminacin.
    Costos altos y perodos cortos de duracin.

    Inmunofluorescencia
    Tcnica histoqumica o citoquimica, que permite la deteccin de antigenos y
    anticuerpos.

    Inmunoflorescencia Directa
    Principio:
    Ac

    Marcado

    Ag
    Sin Marcar

    Complejo Ag - Ab
    Marcado

    Usa un Ab marcado ( especifico para cada Ag) que habia interaccionar


    directamente con el Ag.
    La metodologia consite en colocar en un porta objetos el material que contiene
    el Ag a analizar,este se recubre con el antisuero marcado con fluoresceina,
    luego lavar para eliminar la sustanciaq fluorescente no fijado especificamente
    .Obsevar al microscopio con luz ultravioleta y los filtros aqdecuados.

    usos
    Permite investigar la presencia de Ag en la superficie de las clulas,
    bacterianas y parsitos en frotis de sangre u biopsias.

    INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA.
    Principio:
    Primera Etapa:
    Ab

    Sin Marcar

    Ag

    Ag Ab

    Sin Marcar

    Sin Marcar

    Segunda Etapa:
    Ag Ab
    Sin Marcar

    Ab
    Marcado con antigamma
    globolina

    Complejo Ag Ab
    Marcado

    Usa dos anticuerpos, el primero dirigido contra el Agente


    patgeno ( Ag )
    El segundo es el Ab marcado con compuesto flourescentes
    dirigido al primer Ab.
    Las sustancia flourecentes son excitadas con longitudes de
    onda del rango ultravioleta emitiendo luz de mayor longitud.
    Usos:
    Permite detectar autoanticuerpos circulantes contra
    antigenos tisulares como por ejemplo Ac antinucleares,
    antitiroideos, anti DNA, antimitocondriales
    Sustastancias flourescentes mas usados:
    Isotiocionato de florosceina, lisomina- rodamina.

    ENZIMOINMUNOANALISIS
    (ELISA)

    Resulta de las iniciales Enzime Linked Inmuno


    Sorbent Assay (ELISA).
    Los fundamentos son similares a la de
    Inmunofluorescencia de la que se diferencia en
    que emplea Ab. (mtodo directo) o
    Antigammaglobulinas (Mtodo Indirecto)
    marcados con una enzima capaz de desarrollar
    una reaccin coloreada, que puede ser leda
    espectrofotomtricamente.
    La Enzima mas utilizada es la peroxidasa.
    El sustrato mas usado es la o-fenilendiamina y el
    H2O2
    Placas plsticas de poliestireno y polipropileno

    ELISA

    ELISA

    ELISA

    USOS

    Sirve para la medicin de hormonas,


    inmunoglobulinas, Ag. y Ab. En infecciones
    bacterianas, micsicas, parasitarias o virsicas.

    Es considerado como el primer sustituto del


    RIA.

    TIPOS DE ELISA
    a. Por el tipo de Ag. Utilizado.
    1. De primera generacin:
    Utiliza Ag. Lisados de partculas.
    ejemplo Hepatitis C (NS4)

    2. De segunda generacin:
    Utiliza Ag. Recombinantes (producidos por
    otros microorganismos).ejemplo HBc
    (core)

    3. De Tercera generacin:
    Utiliza Ag. recombinantes y pptidos sintticos
    ejemplo Hepatitis C (NS3, NS5 y core, NS4 )

    4. De Cuarta generacin:
    Utiliza varios Ag. Recombinantes y pptidos sintticos.
    ejemplo: HIV (HIV-1: gp120, gp41, P24, HIV-2 gp36)

    QUIMIOLUMINISCENCIA:

    Consiste en la emisin de luz apartir de


    una reaccin qumica especifica ( Enzima - Sustrato)
    Se involucra las siguientes sustancia segn el sistema
    automatizado que se a utilizado:
    Ester de acridina- Peroxido cido; Hidrxido de sodio
    Fosfatasa Alcalina.
    En este caso el agente quimioluminiscente es el ester de
    acrimina (contiene el Ab marcado), es oxidad por el peroxido
    cido y el hidrxido de sodio da el Ph necesario para que la
    oxidacin ocurra. Como consecuencia algunas molculas de
    sustrato luminiscente emiten fotones y otra emiten calor .
    El equipo contiene un foto detector que detecta lo fotones de
    la luz emitida.

    Ventajas
    Es un mtodo de mayor sensibilidad.
    Evita desecho toxicos.
    Su sistema cuenta con refigeracin integrada para reactivos.
    Cuenta con un lector de barras para identificar muestras y
    reactivos y evitar confuciones.
    El equipo trabaja hasta 5 perfiles de pruebas a una sola muestra
    sin necesidad de cambiarla.
    Tiene la capacidad para trabajar con urgencia sin interrumpir ya
    el trabajo programado.
    El tiempo de obtencion de resultados va de 15 a 50 minutos: un
    perfil tiroideo o ginecologico se obtiene en 20 a 40 minutos un
    HIV en 20 minutos.

    PERFIL TIROIDEO
    NIVELES NORMALES DE REFERENCIA

    T4 Total
    T4 Libre
    T3
    TSH

    4.5 12.5
    0.9 - 2.4
    80 - 180
    0.2 - 2.0

    ug/dl
    ng/dl
    ng/dl
    uU/ml

    * Los valores de referencia pueden variar segn el mtodo de medicin

    ALTERACIONES DEL PERFIL TIROIDEO


    T4 L
    Hipertiroidismo primario:
    Hipertiroidismo subclinico:
    Hipertiroidismo Secundario
    Hipotiroidismo Primario:
    Hipotiroidismo Subclinico:
    Hipotiroidismo Secundario:

    TSH

    Normal

    Normal
    Normal

    PERFIL TIROIDEO
    NIVELES DE TSH EN DIVERSAS SITUACIONES FUNCIONALES

    TSH uU/ml

    Situacin Funcional

    0.1 o menor

    Probable Hiperfuncin

    0.2 a 2.0

    Rigurosamente Normal

    2.0 a 4.0

    Situacin Dudosa (mantener control)

    4.0 a 10.0

    Hipotiroidismo Subclnico

    mayor de 10.0

    Hipotiroidismo Clnico

    EXUDADO FARINGEO
    Toma de Muestra
    Se pide al paciente que se siente y coloque su cabeza
    hacia atrs. Se ilumina bien la cavidad orofarngea y con
    un abatelenguas se empuja la lengua hacia abajo para
    facilitar el acceso a la parte posterior de la faringe. Con
    un hisopo de algodn se hace un raspado de las reas
    hipermicas, purulentas o necrticas, as como de las
    membranas o manchas de Koplic, si es que las presenta.

    EXUDADO FARINGEO

    PATOGENOS POCO FRECUENTES

    Estreptococos no hemolticos
    Estafilococos
    Micrococos
    Corynebacterium sp
    Estafilococos coagulasa Negativos
    Neisseria sp (excluyendo N. meningitidis y N. gonorrhoeae)
    Lactobacillus sp
    Veillonella sp
    Espiroquetas

    PATOGENOS POSIBLES

    Acinetobacter, Estreptococos viridans


    Estreptococos betahemolticos, Streptococcus pneumoniae,
    Staphilococcus aureus,
    Corynebacterium diphtheriae, Neisseria meningitidis
    Cryptococcus neoformans, Mycoplasma sp
    Haemophilus influenzae, Haemophilus parainfiuenzae
    Branhamella catarrhalis, Candida albicans
    Virus herpes simple, Enterobacteriaceae
    Mycobacterium sp, Pseudomonas sp
    Hongos filamentosos, Klebsiella ozaenae
    Eikenella corrodens, Bacteroides sp
    Fusobacterium sp, Peptostreptococcus sp
    Actinomyces sp

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