CONSERVACIÓN DE LOS RECURSOS NATURALES

LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR

PRÁCTICA No. 01
USO Y CUIDADO DE UN MICROSCOPIO
DURACIÓN: 1.5 horas
MATERIAL DIDÁCTICO:
-Pizarrón
-Videoproyector
-Marcadores
MATERIAL:
-Papel o libreta
-Lápiz/lapiceros
OBJETIVO:
Conocer la importancia del microscopio en el campo de la Biología Celular, así
como las partes que lo integran, uso y cuidado de este.
FUNDAMENTO:
Un microscopio es un instrumento que permite observar objetos no perceptibles
a simple vista. Ello se consigue mediante un sistema óptico compuesto por
lentes de cristal, que, al ser atravesadas por los rayos de luz reflejados por el
objeto, forman una imagen amplificada de este.
Los microscopios se pueden clasificar desde un punto de vista muy sencillo en:
Simples y compuestos. Se le da el nombre de microscopio simple a todas
aquellas lentes con montura o sin ella, de distintos espesores y diámetros,
biconvexas o plano convexas, que nos permiten amplificar los objetos,
comúnmente conocidas como lupas. Un microscopio compuesto está
constituido por la combinación de dos sistemas de lentes convergentes. Uno
próximo al ojo del observador, por lo cual se llama ocular y que actúa como
microscopio simple. Otro próximo al objeto denominado objetivo.
GENERALIDADES:
Descripción del microscopio compuesto: Sistema de soporte:
• Pie o base: la función de esta pieza es dar estabilidad al microscopio y
soporte a las demás partes que lo integran.
• Platina: es una pieza metálica cuadrada con un orificio en el centro por el
cual pasa la luz, posee a su vez un carro móvil con una pinza que sujeta la
muestra permitiendo su movilización para la observación.
• Brazo: es el soporte que va desde la base hasta el sistema óptico, es el sostén
de dicho sistema.
Sistema óptico:
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• Oculares: son lentes que se encuentran en el cabezal del microscopio,
separados por un diafragma que permite el movimiento de estos para obtener
una imagen con mejor calidad y comodidad de visión.
• Objetivos (seco débil 10X, seco fuerte 40X e inmersión 100X): es la parte
mas importante del microscopio, se conforman por varias lentes que corrigen
las aberraciones, se encuentran en la parte baja del cabezal sujetos a un
carrusel o revolver que permite el cambio de un objetivo a otro.
Sistema de iluminación:
• Fuente luminosa: es la luz proporcionada por una lámpara ubicada en la base
del microscopio, la cual pasa a través de la platina proporcionando iluminación
a la muestra.
• Condensador: es un sistema de lentes con gran abertura, que se encuentra
entre la platina y la fuente de iluminación; puede subir o bajar dependiendo del
objetivo que se este utilizando.
• Diafragma: se encuentra situado debajo de la platina y permite regular la
cantidad de luz que pasa por el condensador.
Sistema de ajuste:
• Tornillo macrométrico o de enfoque rápido: se utiliza para conseguir un
ajuste aproximado de la imagen a observar.
• Tornillo micrométrico o de enfoque fino: su desplazamiento es mucho más
lento y permite enfocar claramente nuestra imagen.
• Tornillo de carro móvil: se utiliza para desplazar la laminilla sobre la
platina hacia los lados, hacia atrás y hacia delante (ver figura 1).
Figura 1. Componentes del microscopio óptico.
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MANIPULACIÓN DE UN MICROSCOPIO:
1. El banco y la mesa deberán encontrarse a una altura que le permita al observador el uso
del microscopio en posición vertical y de manera confortable.
2. Encender la fuente de iluminación.
3. Montar la preparación que se desea observar.
4. Separar los binoculares ajustándolos a su propia distancia interpupilar.
5. Enfocar entre el ojo derecho y el izquierdo. Los tubos porta oculares son susceptibles de
ajuste, esto se logra enfocando primero la imagen con el objetivo de menor aumento,
usando los tornillos macro y micrométrico. Si la imagen no es clara, sube o baja el ocular
izquierdo mediante el movimiento del anillo que rodea el tubo porta ocular hasta
obtener una imagen nítida, así el microscopio queda ajustado a su propia visión
ocular.
6. Para enfocar con cualquier objetivo, específicamente el seco fuerte (40 X) y
con el de inmersión (100X), deberás acercar el objetivo a la preparación,
mirándolo de lado para controlar el descenso hasta que la lente frontal de dicho
objetivo quede dentro de la distancia focal. Solamente entonces deberás mirar
por el ocular alejando lentamente el objetivo hasta obtener el enfoque correcto,
el cual se obtendrá moviendo el tornillo micrométrico.
A) Objetivos de menor aumento (5X Y 10X): descender el condensador
afondo, bajar el objetivo sobre la preparación (sin tocarla), subir el objetivo
con el tornillo macrométrico hasta ver la imagen a través de los oculares. Suba
un poco el condensador en caso de que la iluminación sea insuficiente.
B) Objetivo de gran aumento (40X): colocar el condensador a la mitad de la
distancia, bajar el objetivo sobre la preparación (sin tocarla). Subir el objetivo
con el tornillo macrométrico muy lentamente hasta ver la imagen en el campo y
perfeccionar el enfoque con el tornillo micrométrico. Mover el condensador
hasta obtener iluminación suficiente.
C) Objetivo de inmersión: colocar la preparación perfectamente seca, poner
una pequeña gota de aceite de inmersión sobre la parte a examinar, subir el
condensador a tope. Observa por los oculares y enfoca con el tornillo
micrométrico.
ABERTURA NUMÉRICA.
La abertura numérica (A.N.) de un objetivo es una cifra exacta calculada
matemáticamente a partir de su diámetro y su longitud focal equivalente, pero a
pesar de ser una característica importante, sólo es necesario saber que la
abertura numérica se encuentra marcada sobre la lente, que expresa el tamaño
del cono de la luz y que de ella depende la cantidad que atraviesa la lente y en
particular su poder de resolución y su máxima amplificación útil.
CUIDADOS PARA UN MICROSCOPIO.
El microscopio deberá guardarse en un lugar seco y cubierto del polvo, ya que éste además
de dificultar la observación, daña las lentes cuando se frotan sin que éstas se hayan
limpiado.
• Al trasladarlo de un lugar a otro debe tomarse del brazo con una mano y con
la otra sostenerlo de la base.
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• Deberás de cerciorarte que las lentes se encuentran limpias de polvo antes de
utilizarlo, de no ser así, deben limpiarse cuidadosamente utilizando para ello
un papel especial para lentes, el cual se obtiene en las ópticas o en las tiendas
de artículos fotográficos.
• Las lentes no deberán quitarse del sitio que les corresponde para que no se
llene de polvo el interior del equipo, además es necesario desmontar partes
internas para limpiarlo.
• Cuando emplees aceite de inmersión deberás limpiar las lentes una vez
terminada la observación, ya que si llegara a secarse sería difícil de limpiarse,
esto puedes hacerlo con el mismo papel para las lentes.
• Nunca deberás desarmar un microscopio, ya que, si lo llegaras a hacer sin
tener conocimientos de ello, podrás desajustarlo o dañarlo de sus partes. Es por
ello por lo que existe personal especializado.
• Las lentes podrán limpiarse con agua destilada, partes metálicas o plásticas
del microscopio deberán limpiarse con un trapo de algodón y se les da brillo
con aceite mineral.
• Todas las preparaciones que se hagan y se tengan que teñir, limpiarlas del
reverso para que no pierdan nitidez.
• Al terminar la observación, deberás limpiar perfectamente las lentes.
• En caso de tener alguna duda en el cuidado del equipo o alguna falla
mecánica o eléctrica, deberás de dar aviso al encargado del laboratorio.
FACTORES QUE DAÑAN AL MICROSCOPIO.
1. Lavar las lentes con alcohol.
2. Mojar los objetivos con xilol o alcohol, o bien con alguna otra sustancia.
3. Usar papel ordinario para limpiar las lentes.
4. Poner los dedos sobre las lentes.
5. Limpiar el soporte o la platina con xilol.
6. Limpiar el interior de las lentes con tela o papel, en caso de que sea
completamente necesario, utiliza un pincel de cerdas muy pequeñas y/o utiliza
papel seda.
7. Dejar el microscopio sin oculares.
8. Guardar el microscopio con aceite de inmersión en el objetivo.
9. Transportar el microscopio con una sola mano.
OTROS TIPOS DE MICROSCOPIOS:
• Microscopio de Contraste de Fases.
Su sistema está compuesto por lente ocular, anillo de fases, lente del objetivo,
lente del condensador y diafragma anular. Tiene una amplificación de 1,000 a
2,000 nm. Permite observar estructuras muy difíciles de distinguir. No requiere
de una tinción.
• Microscopio de Fluorescencia.
Se compone de un primer filtro de corte o filtro de excitación, espejo dicroico,
segundo filtro de corte o filtro de emisión, fuente de iluminación y
condensador. Se observan muestras teñidas, inmunofluorescencia directa o
indirecta.
•Microscopio de Interferencia.
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Es un instrumento que permite la medida de la masa de regiones pequeñas y
transparentes de células vivas, obteniéndose datos de tipo cualitativo y
cuantitativo. Sus componentes son analizador rotable, un cuarto de longitud de
onda, objetivo de interferencia, condensador, polarizador y filtro de
interferencia.
•Microscopio Electrónico de Barrido.
Está compuesto por un cañón de electrones (ánodo, cátodo y electroimán),
sistema de barrido y de lentes. Su resolución depende de la cantidad de
electrones emitidos, contando así con un límite de resolución. Tiene una
amplificación de 100,000 a 200,000 veces y una alta resolución en 3D.
•Microscopio Electrónico de Transmisión.
Está compuesto por cañón electrónico, lente condensadora, cámara de muestra, lente
objetiva, lente intermedia, proyector, pantalla fluorescente y cámara (placa fotográfica).
Utiliza electrones con una longitud de onda de 0.5 Å. Proporciona un aumento de las
células de 100, 000 veces aproximadamente.
RESULTADOS:
Se anotará en una tabla la información obtenida de las partes y función de los componentes
del microscopio, así como su correcto manejo y manipulación, incluido los factores que lo
dañan.
DISCUSIÓN:
Se contrastarán los datos obtenidos de la tabla, con los diferentes tipos de microscopios que
existen, analizando sus ventajas y desventajas, dependiendo del tipo de muestras que se
pueden analizar en cada uno de ellos.
EVALUACIÓN:
El profesor evaluará a los estudiantes de acuerdo con la disposición para realizar la práctica
solicitada. La evaluación se completará con un examen exploratorio del tema y el reporte
completo de la práctica.
CONCLUSIONES:
¿Se logró el/los objetivo(s) de la práctica? ¿Si No? ¿Porqué?
BITÁCORA COL:
¿Qué aprendí? ¿Qué sentí?
CUESTIONARIO:
1) ¿Cuál es la diferencia entre un microscopio simple y uno compuesto?
2) ¿Qué importancia tiene el uso del microscopio en la Biología Celular?
3) ¿Por qué es necesario utilizar aceite de inmersión al utilizar el objetivo del
mismo nombre?
4) ¿Qué significa resolución, poder de resolución y amplificación, asimismo de
qué factores depende cada uno de ellos? Presenta tus respuestas a manera de
tabla.
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5) Realiza una tabla comparativa de todos los tipos de microscopios
incluyendo: fuente de iluminación, condensador, longitud de onda, tipo de
tinción, resolución, amplificación, tipo de lentes, etc.
FECHA DE REALIZACIÓN:
BIBLIOGRAFÍA:
-Burke, J. Biología celular. Interamericana, México, 2012.
-Harvey L. Biología Celular y Molecular. 7ª edición. Buenos Aires. Editorial
Panamericana. 2016.
-Karp, G. Biología celular. Mc Graw Hill. México. 2ª. Edición. 2014.
-Alberts, B. et al. Introducción a la biología celular. Editorial Médica Panamericana. 3a
edición. México. 2011.
-Karp G. et al. Biología celular y molecular; conceptos y experimentos. Editorial
McGraw-Hill Interamericana. 7a Edición. México, 2014.
-NOM-087-ECOL-SSA1-2002. Protección ambiental-Salud ambiental-Residuos
peligrosos biológico infecciosos- clasificación y especificaciones de manejo.
-Reglamento Interno de la Facultad de QFB. Universidad Veracruzana, Xalapa Ver.
Disponible en: https://www.uv.mx/legislacion/files/2018/12/Reglamento-QFB-Xalapa.pdf