Experiencia N° 7

Experiencia N° 7
Cromatografía de compuestos orgánicos

1. LLAJARUNA PURIZACA, Valeria Stephanie.
2. CHAVEZ ALBURQUEQUE, Yoskar Isaac
3. SANCHEZ VELASQUEZ, Oscar Juhnior
4. MENDOZA ROJAS, Sebastian Rafael
I. Introducción
La cromatografía es una técnica fundamental en el campo de la química analítica, empleada para

separar, identificar y cuantificar los componentes de una mezcla. Desde su desarrollo inicial por el
botánico ruso Mikhail Tswett en 1903, la cromatografía ha evolucionado considerablemente, dando
lugar a diversas modalidades como la cromatografía de gases (GC), cromatografía líquida de alta
resolución (HPLC) y cromatografía en capa delgada (TLC), entre otras. Cada una de estas técnicas se
adapta a diferentes tipos de análisis dependiendo de las características de las muestras y los
compuestos de interés.
En particular, la cromatografía en capa delgada (TLC) es una técnica versátil y de bajo costo que
permite el análisis cualitativo y, en algunos casos, cuantitativo de mezclas complejas. Esta técnica
utiliza una fase estacionaria, comúnmente una capa de silicagel, y una fase móvil que puede ser una
mezcla de solventes. Los componentes de la mezcla migran a través de la fase estacionaria a
diferentes velocidades, permitiendo su separación y posterior identificación mediante distintos
métodos de revelado.
La cafeína, un alcaloide presente en diversas bebidas y alimentos, es uno de los compuestos

frecuentemente analizados mediante TLC debido a su importancia tanto en la industria alimentaria
como en estudios de toxicología y farmacología. La identificación de cafeína en productos de
consumo, como las bebidas gaseosas, es crucial para el control de calidad y la regulación de su
contenido.
II. Materiales y métodos

2.1. Materiales
● Beaker
● Capilares
● Mechero de alcohol
● Papel filtro
● Cromatofolios de Silicagel F254
● Pera de decantación
● Cámara de revelado
● Probeta
● Lápiz
● Regla
● Pinza
● Papel aluminio
● Luna de reloj
● Guantes
2.2. Reactantes
● Gaseosa Coca cola
● Yodo al estado sólido
● Cafeína
● Diclorometano
● Cloroformo
● Metanol
● NaOH 1 M.
2.3. Procedimiento experimental

Soporte: Silicagel F254
Fase móvil: Cloroformo-MeOH (8:1)
Sustancia: Cafeína
Revelador: Vapores de yodo
Técnica Operatoria:
a) Extracción y separación de cafeína: Proceder a agitar la botella de gaseosa con cuidado para
eliminar el CO2. Medir 10 mL aproximadamente de gaseosa y trasladar el volumen a la pera de
decantación. Agregar unos 2 mL de NaOH 1 M y agitar. Luego, en una probeta medir 10 mL de
CH2Cl2 y agregar a la pera de decantación, agitar con cuidado eliminando los gases generados, y
esperar a la separación de las fases. Recuperar la fase orgánica en un vaso de precipitado y esperar
unos minutos la evaporación del solvente. El vaso contiene la muestra.
b) Identificación de cafeína: Proceder a colocarse los guantes y en los cromatofolios de sílica gel F254
marcar líneas con lápiz a 1 cm del borde inferior y superior. En la línea inferior proceder a marcar con
lápiz puntos equidistantes separados 1 cm uno del otro. Disponer de capilares para el estándar y la
muestra; y proceder a aplicar entre 1 y 3 veces sobre los puntos marcados en el cromatofolio. Entre las
aplicaciones esperar la evaporación del solvente. En la cuba cromatográfica/vaso de precipitado,
proceder a colocar la fase móvil unos mL, y tapar con el papel aluminio/luna de reloj, esperar a la
saturación del sistema. Con la pinza colocar el cromatofolio en la cuba cromatográfica y esperar a que
la fase móvil alcance 5 la marca en la parte superior. Evaporar la fase móvil y colocar el cromatofolio
en la cámara de revelado que contiene vapores de yodo. Comparar las manchas en el estándar y la
muestra y determinar el Rf de la cafeína. Realice el registro fotográfico para la presentación de su
informe.
III. Resultados y discusión

3.1. Resultados
Se logró identificar la cafeína contenida en la coca-cola mediante el método de cromatografía.
La relación de flujo (Rf) que nos dió el experimento es:

Rf = 1.2/6.2 = 0.24
3.2. Discusión
Se utilizó cloroformo como fase móvil en lugar del solvente habitual. Después de colocar las
sustancias en el cromatofolio, el cloroformo las llevó a la parte superior, pero como son incoloras, no
se vieron inicialmente. Se cambió a metanol como fase móvil, se dejó evaporar y luego se llevó a una
cámara de revelado con yodo.
IV. Conclusiones
El proceso de extracción de cafeína fue completado satisfactoriamente, ya que se notaron las
separaciones de fases y la presencia de la fase orgánica de la cafeína que buscábamos.
El Rf hallado fue de 0.24, la muestra de cafeína casi alcanzó la cuarta parte de la distancia de
la fase móvil.
V. Recomendaciones
● Probar con diferentes concentraciones de fase móvil para optimizar la separación.
● Implementar controles adicionales para asegurar la reproducibilidad de los resultados.
● Explorar el uso de otros reveladores para mejorar la visualización de las manchas.
VI. Referencias
Corzo, A.(2019). Técnicas de análisis en química orgánica cromatografía.
https://fcf.unse.edu.ar/archivos/series-didacticas/SD-44-Cromatografia-CORZO.pdf
UNAM.(2007). Técnicas cromatográficas.
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatograficos 6700.pdf
VII. Cuestionario
1. ¿Qué es una serie eluotrópica?
Una serie eluotrópica es una secuencia de solventes ordenados según su capacidad para eluir o
desplazar solutos de una fase estacionaria durante el proceso de cromatografía. Esta capacidad
depende de la polaridad de los solventes. En cromatografía, los solventes más polares tienden
a desplazar los solutos más rápidamente. La serie eluotrópica es útil para seleccionar el
solvente adecuado o la mezcla de solventes para una separación cromatográfica eficiente. Por
ejemplo, en una serie eluotrópica típica para fase normal, el hexano sería el menos polar y el
agua el más polar.
2. Mencionar aplicaciones prácticas de la capa delgada en fase normal.
La cromatografía en capa delgada (TLC) en fase normal es ampliamente utilizada en diversas

aplicaciones prácticas. En química orgánica, se emplea para monitorear el progreso de las
reacciones químicas, permitiendo a los químicos determinar el momento adecuado para
detener una reacción. En el campo de la farmacéutica, se utiliza para la identificación de
principios activos y la detección de impurezas en medicamentos. En la industria alimentaria,
la TLC en fase normal es utilizada para el análisis de aditivos, contaminantes y componentes
naturales en alimentos y bebidas. Además, se utiliza en toxicología para la identificación de
drogas y sus metabolitos en muestras biológicas.
3. Indicar aplicaciones de la cromatografía HPLC y gaseosa en la industria.
La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) y la cromatografía de gases (GC) son

técnicas analíticas esenciales en diversas industrias.
● HPLC: En la industria farmacéutica, se utiliza para el análisis de medicamentos,
control de calidad, y estudios de estabilidad. En la industria alimentaria, HPLC se
emplea para la detección de contaminantes, aditivos y la cuantificación de nutrientes.
En biotecnología, HPLC es fundamental para la purificación y análisis de proteínas y
ácidos nucleicos. Además, en la investigación química, HPLC se usa para separar y
analizar compuestos orgánicos e inorgánicos.
● GC: En la industria petroquímica, la cromatografía de gases es crucial para el análisis
de hidrocarburos y compuestos volátiles. En la industria alimentaria, GC se utiliza
para la detección de pesticidas y otros residuos químicos. En toxicología, GC permite
la identificación de sustancias tóxicas y sus metabolitos en muestras biológicas.
También se emplea en estudios ambientales para la detección de contaminantes en
aire, agua y suelo.
4. De acuerdo a su carrera profesional mencionar método cromatográfico a utilizar.
● Control de Calidad: La cromatografía de gases (GC) y la cromatografía líquida de
alta resolución (HPLC) son cruciales para el control de calidad de materias primas y
productos finales en la manufactura. Estas técnicas permiten la identificación y
cuantificación de compuestos específicos para asegurar que los productos cumplan
con las especificaciones requeridas.
● Optimización de Procesos: En la optimización de procesos industriales, HPLC
puede ser utilizada para analizar muestras de procesos químicos y biotecnológicos,
proporcionando datos esenciales para ajustar y mejorar los parámetros del proceso.
● Seguridad y Medio Ambiente: La cromatografía es utilizada en el monitoreo de
contaminantes ambientales y en la gestión de residuos industriales, ayudando a
garantizar que las operaciones industriales cumplan con las normativas ambientales y
de seguridad.

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Cromatografía de compuestos orgánicos

La cromatografía es una técnica fundamental en el campo de la química analítica, empleada para

La cafeína, un alcaloide presente en diversas bebidas y alimentos, es uno de los compuestos

II. Materiales y métodos

2.3. Procedimiento experimental

III. Resultados y discusión

La relación de flujo (Rf) que nos dió el experimento es:

1. ¿Qué es una serie eluotrópica?

2. Mencionar aplicaciones prácticas de la capa delgada en fase normal.

La cromatografía en capa delgada (TLC) en fase normal es ampliamente utilizada en diversas

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