AGENTES ANTIMICROBIANOS. 5T0. Teórico.

Susana Oriani

CARÁCTERÍSTICAS:

El agente antimicrobiano que se emplea en la terapia de las enfermedades

infecciosas deberá tener: TOXICIDAD SELECTIVA (destruir al patógeno, sin
dañar al huésped. Es preferible que presente ACCION BACTERICIDA antes
que acción BACTERIOSTATICA.

Es conveniente además que los microorganismos susceptibles no se vuelvan

geneticamente resistentes a dichos antimicrobianos.

Antibiótico: sustancia producida por un microorganismo o una sustancia similar

elaborada en forma total o parcial por síntesis química, la cual en baja
concentraciones inhibe el desarrollo de otros microorganismos.

Los antibióticos más útiles son producidos por cuatro especies de

microorganismos: Bacillus, Penicillum, Streptomyces y Cephalosporium, que
se encuentran natural y abundantemente en el suelo.

La actividad inhibidora está dirigida hacia un número de sitios vulnerables de la

célula.

Estos agentes interfieren en: 1) la síntesis de la pared celular, 2) la función de la

membrana, 3) la síntesis proteica, 4) el metabolismo de los ácidos nucleídos
5)interfiriendo con metabolitos de la célula bacteriana.

PARED

MEMBRANA

METABOLITOS
ADN
SINTESIS DE PROTEINAS
INHIBIDORES DE LA PARED CELULAR:

La formación de la pared bacteriana comienza en

el citoplasma de la bacteria, donde existen
precursores como el N- acetil glucosamina y N-
acetil murámico. En la síntesis de la pared vimos
que parte de NAG se transforma en NAM esto
esta mediado por la enolpiruvil transferasa. La
Fosfomicina es un antibiótico que es análogo al
fosfoenol piruvato que inhibe a la enzima.

Al NAM se le unen en el citoplasma 5

L-ala D-ala aminoácidos, siendo los últimos alanina que se
incorporan al final de la síntesis de la pared,
RACEMASA estas alaninas están en forma L y por acción de
una enzima la racemasa se transforman en D
CICLOSERINA alanina, que es el modo en que los aminoácidos
pueden unirse a los otros tres restantes; la
D-ala D-ala
cicloserina inhibe el pasaje de L ala a D ala.
Los dos últimos aminoácidos son D ala-D ala
SINTETASA esta unión la realiza una sintetasa que es
inhibida por la vancomicina. Una vez formado el
VANCOMICINA N- acetil muramil -pentapéptido, ingresa a la
membrana para encontrarse con un lípido
BACTOPRENOL transportador (bactoprenol) que lo transporta a la
membrana externa , donde se une con el N-
acetil glucosamina quién está unida a cinco
glicinas que actúan a manera de puente entre las
BACITRACINA
D-alaninas. El bactoprenol es inhibido por la
NAG- bacitracina.
NAM-
AA

Durante el proceso de división celular se realiza la síntesis de la nueva pared y

este nuevo material debe agregarse a la pared ya existente. Se forman pequeñas
aberturas en la estructura molecular de la pared por medio de enzimas que son
producidas dentro de las células (autolisinas) similares a la lisozima.

La pared bacteriana además de conferirle la forma a la bacteria, es esencial para

la integridad de la bacteria. La mayoría de los ambientes bacterianos tienen
concentraciones de solutos muy inferiores que la de las células, por lo que existe
una tendencia al hinchamiento y la posterior lisis de la célula. Si tratamos una
célula con lisozima (rompe enlaces β1-4 entre N-acetilmurámico y N-
acetilglucosamina) o algunos de los ATB que actúan a nivel de la pared, sucede
que la célula bacteriana se lisa, salvo que agreguemos al medio externo solutos
como la sacarosa que no pueden ingresar a la célula, en este caso se forman
protoplastos o esferoplastos.

Antibióticos β-lactámicos: Penicilina

Β
Ampicilina LACTÁMICOS
Lactamicos
Carbenicilina
Β

Meticilina Lactamicos

Cefalosporinas

El mecanismo básico de acción es el mismo para todos: inhiben la enzima

responsable de la unión de dos péptidos conectados a las cadenas laterales de
polisacáridos. La enzima responsable es la transpeptidasa. De esta manera se
bloquea la síntesis del peptidoglican y la célula progresa a la lisis osmótica.
Actualmente se ha comprobado que para que la penicilina actúe la bacteria debe
estar en división, o sea que se hayan liberado las enzimas autolíticas que
expongan dichas uniones. También se ha probado que se unen a proteínas
específicas de membrana y activan a las propias enzimas autolíticas de la célula.

Debido a las diferencias de la pared con las células eucarioticas estos antibióticos
son relativamente inocuos para el huésped.

DROGAS QUE ALTERAN LA FUNCION DE LA MEMBRANA:

La membrana celular desempeña un papel vital en la célula: constituye una

barrera osmótica para la libre difusión entre el medio externo y el interno, tiene a
su cargo la concentración de metabolitos y nutrientes dentro de la célula y sirve
como sitio para las actividades respiratorias y algunas de biosíntesis. Los
antibióticos que atacan las membranas celulares tienen menor facilidad para
diferenciar entre membrana de procarionte y de eucarionte, por lo que presentan
considerable toxicidad.

La acción de estos es independiente de la multiplicación y su acción se inicia en el

mismo momento en que las células y los antibióticos se ponen en contacto.

Polimixina (Bacillus polymyxa) actúa sobre Gram(-) .

 El daño se produce por una unión
electrostática y una
desorganización en la estructura
de los componentes fosfolipídicos y
lipopolisacáridos, probablemente
por desplazamiento competitivo de
Mg+2 o el Ca+2 de grupos fosfatos
POLIMIXINA en los lípidos de membrana.
Ca++ Mg++ Polienos: Anfotericina B y
Nistatina: inhiben de manera
selectiva a los microorganismos que presentan en sus membranas esteroles o sea
que son activos contra levaduras, hongos y células eucarísticas, no actúan sobre
procariotas. Mecanismo de muerte: la interacción entre el ergosterol y los polienos
conduce a la formación de poros letales que atraviesan la membrana, lo que
provoca aumento de la permeabilidad y perdida de metabolitos vitales para la
célula.

Azoles: Ketoconazol. Antimicóticos de amplio espectro. Inhiben la síntesis de

ergosterol.

INHIBIDORES DE LA SÍNTESIS DE PROTEÍNAS:

La síntesis proteica es el resultado final de dos procesos principales: 1) la

transcripción y 2) la traducción.

Inhibidores de la transcripción:

Actinomicina D: actúa sobre un

amplio espectro de
microorganismos Gram (+) y (-).
ACTINOMICINA
Mecanismo de acción: forma
complejos con el ADN, debido a la RIFAMPICINA
presencia de un anillo planar del
grupo cromóforo le permite
intercalarse entre la pila de pares
de bases adyacentes de la doble
hélice. Muy tóxica.
ARNm
Rifampicina: droga principal para
el tratamiento de la tuberculosis. RNA polimerasa
Inactiva la RNA polimerasa DNA dependiente. Su actividad sobre las RNA
polimerasas DNA dependientes de núcleos eucarióticos es nula.

Inhibidores de la traducción:

INHIBIDORES DE LA SUBUNIDAD 30s:

AMINOGLICOSIDOS: Estreptomicina, Kanamicina, gentamicina, tobramicina,

amikacina. Inhiben la síntesis de proteínas insertándose y bloqueando la función
de la subunidad 30 s del ribosoma bacteriano. Este grupo de antibióticos basan su
toxicidad en selectiva en los ribosomas bacterianos 70 s y no en los eucarióticos
80s.

La unión en la subunidad 30 s
Corresponde insertar alanina
determina que sean insertados
aminoácidos erróneos en la
cadena polipeptídica,
formándose proteínas no
conformes con el plan
proveniente en el DNA, así que
se sintetizan proteínas
defectuosas, no
funcionales.(une a la proteína
S12 ,altera la unión codón-
anticodón ya que se altera la
al estar alterado el codón inserta otro zona de reconocimiento)
aminoácido bactericidas. Daña la
membrana celular al penetrar.
Proteína normal

Proteína defectuosa

TETRACICLINAS: Tetraciclina,
oxitetraciclina, clortetraciclina:
interfieren en la unión del RNAt con
el aminoácido al sitio del ARNm.
Bacteriostáticos. INHIBEN LA
SÍNTESIS DE PROTEÍNAS EN
PROCARIONTES Y EUCARIONTES.
La selectividad reside en la
propiedad suicida de las bacterias
que acumulan la droga en la membrana celular, cosa que no sucede en las células
eucarióticas.

Nitrofuranos: inhiben la síntesis de enzimas inducibles como los operones lactosa

y galactosa, no así al operón triptofano.

Inhibidores de la subunidad 50s:

CLORANFENICOL: bacteriostático. Bloquea la unión de los aminoácidos de la

cadena peptídica en la fracción 50 s del ribosoma, impidiendo la acción de la
peptidiltransferasa. Para ejercer esta acción se une a la proteina L16 de la 50s,
especificamente al ARNr 23s.

Lincomicina y Clindamicina: bloquean el paso de formación de la unión

peptídica.

Macrólidos: grupo de antibióticos que incluye a eritromicina, oleandomicina,

espiramicina, producidos por actinomicetes. Bacteriostático, en algunos mo.
bactericida. Mecanismo de acción: su sitio de acción es 23s ARNr , proteína L 15,
esta tiene función de peptidil transferasa, la función de la L 15 está modulada por
la L 16. El bloqueo de la translocación se produce por interferencia específica en
la liberación del ARN t cargado unido en el sitio P del ribosoma después de la
formación de la unión peptídica, la persistencia de este ARN t impide la
traslocación del ribosoma. No se conoce si persiste en el sitio A o en un sitio
cercano adyacente, que impide la ubicación adecuada para la formación de la
unión peptídica.

Puromicina: es estructuralmente análogo al extremo aminoacil adenosina del

ARN t por lo tanto inhibe la síntesis de proteínas por terminación de las cadenas
polipeptidicas. Actúa en cel. procarioticas y eucarióticas.

Acido fusídico: en presencia de este el factor de elongación EF-G y el GTP

forman un complejo estable con el ribosoma. El ATB congela al complejo EF-G-
GDP-ribosoma e impide la liberación de EF-G del ribosoma, un proceso necesario
para el siguiente ciclo de traslocación.

INHIBIDORES DEL ENSAMBLAJE DE PROTEÍNAS:

Griseofulvina: inhibe la mitosis en metafase, la base molecular se atribuye a la

interferencia en el ensamblaje de la tubulina en los microtúbulos. La griseofulvina
se une a las proteínas implicadas en el ensamblaje de la tubulina. Por
consiguiente los procesos celulares que dependen de la función del microtúbulo,
como el movimiento de los cromosomas durante la mitosis son inhibidos por la
droga. Actividad selectiva sobre hongos que contienen quitina en su pared.
 CLORANFENICOL

puromicina

MACROLIDOS

ANTIBIÓTICOS QUE ALTERAN LA

REPLICACIÓN:

QUINOLONAS: DNA girasa

Grupo de antimicrobianos sintéticos(ácido

nalidíxico, Norfloxacina, Ciprofloxacina,
Fluorquinolonas y otras). Mecanismo de
acción: se unen en forma irreversible a la
DNA girasa, enzima responsable de QUINOLONAS
plegar y desplegar en forma alternada el
DNA en el proceso de replicación.

INHIBIDORES METABÓLICOS:

SULFONAMIDAS: síntesis química. Son bacteriostáticos.

Las bacterias sintetizan el ácido fólico, un intermediario en la síntesis del ácido
fólico es el ácido para amino benzoico( PABA). La incorporación del PABA al ácido
fólico es por una enzima, a la que se une competitivamente las sulfas. Las sulfas
compiten con el PABA por la enzima que cataliza su incorporación al ácido
dihidrofólico. Las células eucarióticas como no lo sintetizan no se ven afectadas.
Acido p-aminobenzoico +Pteridina

SULFONAMIDAS Pteridin sintetasa

Acido dihidropteicoico

Dihidrofolato sintetasa

Acido dihidrofólico
TRIMETROPRIM Dihidrofolato reductasa

Acido Tetrahidrofólico

Bases nitrogenadas – síntesis de ADN

TRIMETOPRIMA: inhibe a la enzima reductasa necesaria para la formación del

acido tetrahidrofólico, actúa en forma sinérgica con las sulfas.

ISONIACIDA: similitud con la niacina y el piridoxal, inhibiendo la formación del

ácido micólico de las micobacterias.

RESISTENCIA A LAS DROGAS:

origen de la resistencia: 1) mutación cromosómica

2) intercambio genético.
Uno de los principales interrogantes sobre la aparición de microorganismos
resistentes a las drogas fue determinar si las células resistentes son el producto
de una adaptación fenotípica inducida por alguna interacción de la droga con el
microorganismo o si se trata de mutantes que surgen de forma independiente del
antibiótico. Ya se ha establecido de modo concluyente que la resistencia a las
drogas se produce por el segundo de estos mecanismos, es decir por una
mutación al azar que genera una alteración en la susceptibilidad a la droga donde
ésta actúa solo como un agente de selección favoreciendo la supervivencia de los
microorganismos resistentes sobre los sensibles una vez que la alteración
genética ha tenido lugar y se ha expresado fenotípicamente.

En general las mutaciones se producen con una frecuencia de 1cada 10 5 A 1010

divisiones celulares. Ej. tratamiento combinado en tuberculosis la probabilidad de
mutación a dos drogas es 1 cada 1015 divisiones celulares.

RESISTENCIA MEDIADA POR INTERCAMBIO GENÉTICO: la información

genética que controla la resistencia a los antibióticos se produce en el
cromosoma bacteriano y en el DNA de los plásmidos, especialmente en los
plásmidos conjugativos.

MECANISMOS BIOQUÍMICOS DE RESISTENCIA A LAS DROGAS:

Disminución de la permeabilidad celular.

Inactivación enzimática de la droga.

Modificación del sitio receptor de la droga .

Disminución de la permeabilidad celular: muchos patógenos son

resistentes a las drogas por que previenen su entrada, por ej. muchas bacterias
Gram(-) son resistentes a la penicilina porque esta no puede penetrar la
membrana externa. Las bacteria Gram(-) debido a los lípidos de su pared forman
una barrera contra los antibióticos , los compuestos hidrófilos penetran a través de
las porinas (canales llenos de agua) que discriminan la entrada de moléculas
hidrofobas.

Inactivación enzimática de la droga: consiste en inactivar la droga a

través de enzimas como las β-lactamasas que hidrolizan los β-lactámicos. Otro
ej.es la inactivación del cloranfenicol por medio de enzimas codificadas por
plásmidos: la cloranfenicol acetiltransferasa. Inactivación de aminoglicósisdos
transmitida por plasmidos, las enzimas inactivan la droga por acetilación de grupos
aminos y fosforilación de grupos oxidrilos.
 Modificación del sitio receptor de la droga: cambian las proteínas
fijadoras de penicilina. Otras bacterias son resistentes porque mutan alguna
subunidad de el sitio de acción de la droga.

Otros mecanismos: Algunas bacterias son resistentes a las sulfas por que
usan el acido fólico de la célula más que es sintetizado por ellas mismas.

ESQUIVA

CAMUFLAJE

BLANCO

INTERFERENCIA

plásmido
Enzimas que lo
degradan

Genes de resistencia

METODOS PARA DETERMINAR SENSIBILIDAD Y RESISTENCIA A LOS

ANTIMICROBIANOS ESTAN DETALLADOS EN LA GUÍA DE TRABAJOS
PRÁCTICOS.