Actividad Evaluable TEMAS 1 - 4 TIB 24 - 25

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Técnicas Instrumentales CALIFICACIÓN

Básicas
Actividad Evaluable 1
(temas 1-4) 2024/2025

APELLIDOS NOMBRE

1. Un laboratorio biotecnológico recibe una muestra proteica de origen


desconocido. Un empleado de este laboratorio realiza diferentes
mediciones de la concentración de proteína en el extracto mediante
absorción molecular en el UV/Vis obteniendo los siguientes resultados:
143.12, 147.23, 151.89, 140.73, 139.34, 144.23 y 150.12 mg de
proteína/mL de extracto. A partir de los datos aportados determine:
a) El valor medio de la muestra.
b) La desviación estándar de los resultados, así como el coeficiente de
variación de estos.
c) Sabiendo que el valor de referencia es 134.7mg, determine si existe
indicio de error con un nivel de confianza del 99%.
d) El investigador, a la vista de los resultados obtenidos, se plantea
rechazar el tercer valor obtenidos (151.89). ¿Qué debería hacer para
poder rechazarlo adecuadamente? ¿Podría rechazarlo con un nivel de
confianza del 90%?
e) Conociendo que la variabilidad permitida en este tipo de estudios es de
3,48% y el sesgo absoluto aceptado de 0,05, ¿podría considerarse las
determinaciones realizadas como precisas? ¿Y veraces?
Valores de t para varios niveles de
Grados confianza (%)
de libertad

2. Un método para la determinación cuantitativa de paladio en la sangre


proporciona una absorbancia de 0,712 en una muestra de 5mL de sangre.
Tras añadir a la muestra de sangre 5mL de un patrón de paladio de 1,560
ppb se determina una absorbancia de 1,546. A partir de los datos
aportados, calcule la concentración de paladio en la muestra de sangre
original.
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Actividad Evaluable 1
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APELLIDOS NOMBRE

3. La presencia de determinados compuestos azucarados como excipientes


en fármacos puede producir efectos severos en pacientes diabéticos. Un
laboratorio farmacéutico ha recibido un fármaco en el que se quiere analizar
la existencia o no de trazas de sacarosa. Para ello se procedió de la
siguiente forma:
Se llevó a cabo una espectroscopía de absorción en el UV/VIS siguiendo el
siguiente protocolo experimental. Inicialmente, se preparó un calibrado a
partir de una disolución de sacarosa obteniendo los resultados que se
muestran en la siguiente tabla:

En este estudio, los valores de absorbancia triplicados de la muestra


problema fueron: 0,445, 0,389 y 0,542. Dado que el investigador no estaba
demasiado seguro de la existencia de efecto matriz, tras este estudio
decidió realizar otro empleando en este caso una disolución patrón de
12,43ppm de sacarosa. Para ello, se pipetearon los volúmenes indicados
en la tabla a matraces aforados de 50mL, añadiendo en todos ellos los
reactivos necesarios y enrasando con agua destilada. Los resultados
obtenidos tras la fotometría en llama fueron los siguientes:

Calcule:
a) Las ecuaciones de las rectas de calibración mediante ambos métodos
instrumentales.
b) Discuta la existencia o no de efecto matriz e indique el proceso de
calibración correcto para su análisis. Tras ello, determine, mediante el
método correcto, la concentración de sacarosa en el producto
farmacéutico.
c) Calcule el límite de cuantificación y la sensibilidad para el análisis de la
sacarosa.
DATOS: PMsacarosa=342,3g/mol; sacarosa= 9880; Sblanco=0,03; L=1cm.
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4. A continuación, se muestran dos moléculas con capacidad de absorción


molecular en el UV/Vis.

Indique:
a) Número de electrones tipo sigma, pi y n en cada una de ellas.
b) Orbitales moleculares con capacidad de absorción molecular.
c) Cromóforos y auxocromos presentes en las moléculas.
d) Realice los diagramas de Jablonski para cada molécula.
e) Se sabe que la molécula B presenta su máximo de absorción molecular
a 468nm. Si dicha molécula se encontrase en un medio polar al realizar
la medición, ¿qué longitud de onda máxima presentaría en dicho caso?
Justifique su respuesta.
5. Un laboratorio biotecnológico ha recibido una muestra problema que
contiene dos compuestos con capacidad absorbente y cuyas
concentraciones se desean conocer. El primer compuesto (X) presenta su
máximo de absorción a 455nm y a esta longitud de onda tiene una
absortividad molar de 3000mol·L-1·cm-1. El máximo de absorción para el
segundo compuesto (Y) es a 652nm y presenta a dicha longitud de onda
una absortividad molar de 2100mol·L-1·cm-1. A 455nm, el compuesto Y
presenta una absortividad molar de 500M·cm -1, mientras que a 652nm el
compuesto X tiene una absortividad molar de 160M·cm -1. A ambas
longitudes de onda se midió la absorbancia obteniendo los siguientes
resultados: a 455nm la absorbancia fue de 0,450, mientras que ese
parámetro a 652nm fue de 0,565. Considerando que el paso óptico de la
celda fue de 1cm, determine:
a. La concentración de ambas sustancias en la disolución.
b. ¿Qué concentración del compuesto X daría una transmitancia del
25% a 455nm en la misma celda?

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