Tecnológico Nacional de México

Instituto Tecnológico de Ciudad Madero

Departamento de Ingeniería Química y Bioquímica
Microbiología 3575 A
Ingeniería Ambiental

Práctica 2.
Material y Equipo de Laboratorio

Quinto Semestre
Estudiantes: Barragán Salas Michelle Ayerim 22071111
Medrano Balderas Ximena Guadalupe 22071381
Sifuentes Martínez Valeria Guadalupe 21071377
Docente: Lorena Margarita Salas Ordaz
Ciudad Madero Tam. Octubre 2024
 Guía de Observación y Lista de Cotejo para el trabajo de
laboratorio de Microbiología Ambiental y Toxicología Ambiental

Barragán Salas Michelle Ayerim

Nombre del alumno: Medrano Balderas Ximena Guadalupe
Sifuentes Martínez Valeria Guadalupe
Nombre del profesor: M.G.C. Lorena Margarita Salas Ordaz
Institución: Instituto Tecnológico de Ciudad Madero
Fecha de realización: 02 de octubre del 2024
Nombre de la práctica: Material y Equipo de laboratorio

Criterios de Evaluación

Aspecto a Observar Si No % Observaciones

Número y Nombre de la práctica

Objetivo

Introducción o Marco Teórico

Apartado de Seguridad

Procedimiento

Diagrama de flujo

Resultados y Observaciones

Conclusiones

Cuestionario

Bibliografía

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 Trabajo en clase presencial (Laboratorio)

Aspecto a Observar Si No % Observaciones

Tuvo disponibilidad,
disciplina, trabajo de equipo
Llevó paso a paso el
desarrollo
Seguimiento del formato
establecido por el instructor

El resultado de la evaluación del contenido tiene un valor de 100 puntos.

El cumplimiento del alumno fue: ____________ puntos.
Para una calificación aprobatoria se requiere como mínimo 70 puntos.

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Objetivo
a) Reconocer y manejar el material de uso común en el laboratorio de
microbiología.
b) Tomar conciencia y aplicar las reglas de bioseguridad en el laboratorio de
microbiología.

Introducción
Además de un ambiente apto para el trabajo microbiológico, el laboratorio de
microbiología requiere de una instrumentación básica de uso corriente en
microbiología, como la siguiente.
Los instrumentos básicos de uso corriente en el laboratorio de Microbiología son: a) y
b) Tubo de ensayo con tubo o “campana” Durham, c) Placa de Petri, d) Pipeta
graduada con tapón de algodón, e) Pipeta Pasteur, f) Espátula de Drigalsky, g) Aguja,
h) Ansa, i) Portaobjeto y j) Erlenmeyer

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Marco teórico
Un laboratorio de microbiología es un establecimiento que realiza evaluaciones
microscópicas, tanto para prevenir o ejecutar diagnósticos, después de tomar y recibir
muestras biológicas y parasitológicas. En este sentido, se tiene como objetivo principal
identificar los microorganismos que causan las enfermedades, para poder recibir un
tratamiento adecuado. Como puedes comprobar, el papel que se realiza en este tipo
de laboratorios es esencial para nuestra sociedad y, sobre todo, para nuestra salud y
bienestar.

Por otro lado, al ser un centro para la salud, debe ser un sitio seguro, cómodo y
eficiente. Por ello, se deben tomar medidas de higiene y seguridad, tanto para el
personal que allí labora, como para las personas que acudan a él. Además, debe
poseer un lugar de almacenamiento para la respectiva toma de las muestras. Muchos
cultivos y comprobaciones no pueden llevarse a cabo si no se dan una serie de
condiciones muy concretas de temperatura, humedad, etc. Por ello, es esencial que
el estado de un laboratorio de microbiología esté siempre donde debe estar.

Material de laboratorio de Microbiología:

Pipetas y Micropipetas: Herramientas de precisión para medir y transferir volúmenes
pequeños de líquidos, utilizadas en la preparación de muestras y diluciones.
Placas de Petri: Recipientes planos y circulares utilizados para cultivar
microorganismos en medios
de agar, permitiendo el estudio de su crecimiento y características.
Tubos de Ensayo y Frascos: Contenedores utilizados para contener y manipular
líquidos y muestras biológicas, proporcionando un espacio controlado para realizar
pruebas y experimentos.
Medios de Cultivo: Sustancias nutritivas utilizadas para proporcionar el entorno
adecuado para el crecimiento y desarrollo de microorganismos, facilitando su estudio
y análisis.
Microscopios: Equipos ópticos que permiten la observación de microorganismos a
nivel celular, facilitando la identificación y estudio de sus características morfológicas.
Centrífugas: Instrumentos que utilizan la fuerza centrífuga para separar componentes
de una muestra líquida, facilitando la obtención de células o partículas específicas.

Equipo de laboratorio de Microbiología:

Autoclave: Dispositivo utilizado para esterilizar material mediante vapor a alta presión
y temperatura, asegurando la eliminación de microorganismos y esporas.

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Incubadora: Equipamiento diseñado para proporcionar condiciones controladas de
temperatura y humedad, favoreciendo el crecimiento y reproducción de
microorganismos en cultivos.
Cabinas de Seguridad Biológica: Estructuras diseñadas para proteger al personal y
evitar la contaminación durante la manipulación de agentes patógenos,
proporcionando un ambiente seguro.
Termociclador (PCR): Instrumento utilizado en la amplificación de ácidos nucleicos
mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), una técnica esencial en la
identificación y estudio genético de microorganismos.
Espectrofotómetro: Dispositivo que mide la absorbancia de la luz por una muestra,
utilizado en microbiología para cuantificar la concentración de células en un cultivo.
La selección y uso adecuado de este material y equipo en el laboratorio de
microbiología son críticos para garantizar la validez y confiabilidad de los resultados
obtenidos, así como para mantener un entorno de trabajo seguro y controlado. El
conocimiento profundo de estas herramientas y su correcta utilización son
fundamentales para el éxito de las investigaciones microbiológicas.

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Materiales y Reactivos

• Tubos de ensayo.
• Placas de Petri.
• Pipetas graduadas.
• Pipetas Pasteur.
• Espátula de Drigalsky.
• Mango o cabo de Koll.
• Marcador permanente al solvente.
• Portaobjetos.
• Portaobjetos excavados.
• Cubreobjetos.
• Tubos o “campanas” de Durham.
• Matraz Erlenmeyer.
• Mecheros.
• Gradillas.

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PROCEDIMIENTO

Tubos de ensayo: destinados a conservar medios de cultivo en pequeños

volúmenes. Se utilizan tubos de vidrio de diversos tamaños, con tapa a rosca o a
presión. El vidrio debe ser de buena calidad, neutro, transparente e inalterable a los
tratamientos.

Placas de Petri: cajas de vidrio de sección circular, con tapa. Existen de diferentes
tamaños según su uso, aunque las más frecuentemente utilizadas tienen 10 cm de
diámetro.

Pipetas graduadas: para su uso en el laboratorio de microbiología se les coloca un

tapón de algodón en el extremo superior, de manera de impedir que el operador aspire
líquidos potencialmente contaminados, o que contamine el medio de cultivo al
aspirarlo. Se utilizan para realizar inoculaciones y diluciones. Para manejar pequeños
volúmenes (menores de 1 ml) se recomienda el uso de pipetas automáticas que miden
exactamente el volumen deseado (500, 150, 50 Ul etc.); en el extremo se colocan
puntas o tips estériles que se reemplazan cuando se desea.

Pipetas Pasteur: son tubos de vidrio terminados en capilar. Se usan para transportar
pequeños volúmenes de líquido o para sembrar a partir de medios de cultivo líquidos.

Espátula de Drigalsky: Se construye con una pipeta Pasteur larga o con una varilla
de vidrio. Se calienta el extremo en la llama del mechero y se dobla en ángulo recto
unos 4 cm, esta última porción se dobla nuevamente del mismo modo. Se utiliza para
distribuir una muestra líquida que se siembra sobre la superficie de un medio de cultivo
sólido.

Mango o cabo de Koll: sirve para sujetar al ansa, aguja o espátula de platino o
aleaciones metálicas de lenta oxidación y rápido enfriamiento. Está compuesto por un
mango de un material aislante, que se prolonga en un vástago metálico que sostiene
mediante una tuerca un alambre. Cuando el extremo del alambre tiene forma de anillo
se denomina ansa; si se deja el extremo recto se llama aguja y si se dobla en ángulo
recto al extremo libre se lo llama gancho.

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Marcador permanente al solvente: son marcadores resistentes al agua, se utilizan
para marcar o escribir sobre superficies de vidrio.

Portaobjetos: lámina rectangular de vidrio incoloro de 2,5 cm x 7,5 cm y

aproximadamente 1 cm de espesor. Se utilizan para hacer observaciones
microscópicas de los microrganismos, ya sea en fresco o fijados.

Portaobjetos excavados: se utilizan para realizar exámenes con gota pendiente,

para ello presentan una depresión de unos 10 a 12 mm de diámetro. En este caso el
material a observar es una gota de líquido suspendido.

Cubreobjetos: pequeñas láminas de vidrio transparente, de poco espesor (0,11 a

0,23 mm), usados para cubrir los preparados realizados sobre el portaobjetos para su
posterior observación microscópica.

Tubos o “campanas” de Durham: pequeños tubos (de unos 5x30 mm) que son
colocados en forma invertida dentro de los tubos de ensayo que contienen medio de
cultivo líquido, sirven para verificar la producción de gas por parte de los
microorganismos.

Matraz Erlenmeyer: se utilizan para preparar los medios de cultivo, o para el

desarrollo de microorganismos en medio líquido con agitación o aireación.

Otros elementos y aparatos: Al material citado debe agregarse por su uso frecuente,
mecheros y gradillas. Los aparatos más comúnmente usados en el laboratorio de
microbiología son: microscopios, lupas, autoclave, estufas de esterilización y cultivo,
baño termorregulable, balanzas, espectrofotómetro, centrífuga, incubadoras, etc.

LIMPIEZA Y PREPARACIÓN DEL MATERIAL

El material que se emplea en microbiología debe estar perfectamente limpio y estéril.

La limpieza es importante ya que restos de sustancias que permanecen en los tubos,
placas y demás elementos, pueden impedir el posterior desarrollo de los
microorganismos; la esterilización es fundamental para evitar la presencia de
microorganismos extraños o contaminantes. Para ello el material deberá ser

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acondicionado de tal forma que mantenga estas condiciones por tiempo
indeterminado.

1. Tubos de ensayo. Para su uso deben estar perfectamente limpios. Si en ellos

se ha realizado algún cultivo deben esterilizarse previamente a su limpieza,
para lo cual deben colocarse boca abajo y sin tapón en un recipiente para
favorecer que escurran los medios de cultivo en ellos contenidos. Se lava con
agua caliente jabonosa o con detergentes neutros con la ayuda de cepillos
limpia tubos. Luego se enjuaga abundantemente con agua potable y finalmente
con agua destilada. Posteriormente se colocan en canastos u otros recipientes
para su escurrido y secado.
2. Placas de Petri. Se las esteriliza y lava de la misma manera que se describió
anteriormente y se las coloca boca para abajo para su secado. Luego, cada
caja con su respectiva tapa se envuelve individualmente en papel, realizándose
un doblez con el mismo en la parte superior para evitar que entre polvo hacia
el interior. Luego pueden envolverse de a grupos para garantizar la esterilidad
ante una eventual rotura del papel. Así preparadas se esterilizan en autoclave
y se secan en estufa.
3. Pipetas. Para su uso deben estar limpias desengrasadas, estériles y secas.
Luego de ser utilizadas se deben colocar en probetas u otro recipiente
destinado a tal fin, que contenga solución desinfectante (hipoclorito, formol 4%,
fenol 5%); se quita el trozo de algodón colocado en la boquilla con un alambre.
Se colocan luego en solución de detergente para asegurar su limpieza. Se
enjuagan primero con agua corriente y luego con agua destilada, y
posteriormente se secan. Para volver a prepararlas se coloca en la boquilla un
pequeño tapón de algodón lo suficientemente ajustado como para aspirar con
facilidad sin que se salga. Luego se colocan en porta pipetas metálicos o se
envuelven individualmente, y luego en paquetes, y posteriormente se esteriliza.
4. Portaobjetos. Para lograr que estén limpios y desengrasados se los sumerge
en soluciones de detergentes en las que se hierven, luego se enjuagan y dejan
secar.

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Apartado de seguridad
Esta práctica no se trabajo con reactivos.

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Diagrama de Flujo
No se trabajó con un diagrama de flujo, ya que solo costó en la identificación.

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RESULTADOS Y OBSERVACIONES
En esta práctica no se realizaron experimentos que podamos observar y reportar.

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CONCLUCIONES
Las conclusiones de la práctica sobre el uso de materiales de laboratorio en
microbiología destacan la importancia de una correcta manipulación y comprensión
de los equipos utilizados para llevar a cabo investigaciones precisas y seguras.
Durante la práctica, se pudo observar que el uso adecuado de instrumentos como
placas de Petri, pipetas, microscopios y autoclaves es esencial para garantizar
resultados confiables y evitar la contaminación de muestras, lo cual es clave en
cualquier estudio microbiológico.
Se concluyó que una de las competencias fundamentales en el laboratorio de
microbiología es la destreza técnica para manejar estos materiales bajo estrictos
protocolos de higiene y bioseguridad. La correcta desinfección y esterilización de
instrumentos, junto con la utilización de equipo de protección personal (EPP), juega
un papel crítico en la prevención de contaminaciones cruzadas y en la protección del
personal contra agentes biológicos potencialmente peligrosos.
Además, la práctica permitió reconocer la relevancia de seguir procedimientos
estandarizados en cada etapa del experimento, desde la preparación de medios de
cultivo hasta la manipulación de microorganismos, asegurando la reproducibilidad de
los resultados. Se evidenció que el orden, la limpieza y el control preciso de los
materiales son elementos esenciales para garantizar un entorno de trabajo eficiente y
seguro.
Finalmente, se destacó que el conocimiento profundo sobre los materiales de
laboratorio y su correcto manejo no solo es esencial para proteger la salud de los
trabajadores, sino también para asegurar la validez científica de las investigaciones,
evitando errores experimentales que puedan comprometer los hallazgos obtenidos.

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Investigación
1. ¿Para qué se emplea cada una de las piezas de material de laboratorio?
• Vasos de precipitados: Son recipientes cilíndricos con fondo plano que
se usan para mezclar, calentar y realizar reacciones químicas.
• Probetas: Se utilizan para medir volúmenes de líquidos de manera
precisa.
• Pipetas: Instrumentos empleados para medir y transferir volúmenes
pequeños de líquidos.
• Matraz Erlenmeyer: Se utiliza para mezclar soluciones y contener
reacciones químicas, su forma facilita la agitación de líquidos.
• Tubos de ensayo: Pequeños cilindros utilizados para contener muestras
líquidas o realizar reacciones a pequeña escala.
• Mecheros Bunsen/Fisher: Dispositivos utilizados para calentar
sustancias en el laboratorio mediante la combustión controlada de gas.

2. Elabore un esquema del mechero Fisher, en el que se indique la posición

del tornillo de control de flujo de gas, el arillo de control de flujo de aire y
la entrada del gas.

3. Elabore un esquema de la forma correcta de calentar un líquido en un tubo

de ensayo.
Para calentar un líquido en un tubo de ensayo, se debe sujetar el tubo con una pinza,
inclinándolo ligeramente para evitar que el calor directo impacte en el fondo. Es
recomendable agitarlo suavemente durante el calentamiento para distribuir el calor de

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manera uniforme. El tubo debe mantenerse alejado del cuerpo y apuntar hacia una
dirección segura, evitando que el contenido pueda salpicar. También es ideal utilizar
una llama suave o moderada, y controlar el proceso de calentamiento para evitar
sobrecalentamientos o explosiones.

4. Elabore un esquema y dé una explicación de la forma correcta de pipetear.

Las pipetas se usan principalmente para verter alícuotas de líquidos. Mediante el uso
de propipetas, que ajustan en la parte superior de la pipeta, se llenan por succión y su
vaciado se regula por admisión de aire en el extremo superior de la pipeta.

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5. Elabore un diagrama de la balanza granataria, analítica y digital, señalando la
posición del botón de encendido y apagado, del botón de tara y el de registro
(R). ¿Cuáles son los cuidados que se debe tener con una balanza?

• Ubicarla en un lugar adecuado. Colocarla en una superficie firme y estable, libre

de vibraciones y corrientes de aire. También es importante que la sala donde
se encuentre la balanza tenga una temperatura constante y una humedad entre
45% y 60%.
• Limpiarla regularmente. Antes y después de usarla, limpiar la balanza con un
paño húmedo y jabón suave. Si hay algún residuo en el platillo, se puede retirar
con un cepillo suave.

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 • Calibrarla periódicamente. Para obtener resultados fiables, es necesario
calibrar la balanza de forma regular.
• Manipularla con cuidado. Evitar tocar la balanza con las manos, ya que la grasa
de la piel o las huellas dactilares pueden afectar el resultado. En su lugar, se
recomienda usar pinzas o guantes para coger la muestra.
• Protegerla de la humedad. Si la balanza lo requiere, se pueden usar agentes
desecantes para mantener el interior exento de humedad.
• Evitar el contacto directo con reactivos. Se debe usar un recipiente adecuado
para pesar el compuesto.
• Verificar la batería. Si la balanza es digital, es importante verificar que la batería
esté en buen estado.
• No trasladarla con frecuencia. Solo se debe trasladar la balanza si es
estrictamente necesario, y siguiendo las recomendaciones del fabricante.

6. Investiga las Normas Generales para el trabajo en el laboratorio de

Microbiología.
• Uso adecuado de equipo de protección personal (EPP): Bata, guantes y
gafas.
• Limpieza y desinfección: Limpiar y desinfectar las áreas de trabajo antes y
después de usar.
• Manejo de residuos biológicos: Disponer correctamente de residuos
microbiológicos.
• Lavado de manos: Obligatorio antes y después de cada sesión de trabajo.

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BIBLIOGRAFÍAS

• Baird, T. (2003). Manual de técnicas básicas de laboratorio químico. Editorial

Acribia.
• Martínez, G. (2015). Técnicas de pipeteo y manejo de soluciones químicas.
Editorial Pearson.
• Castells, J. (2009). Instrumentación en el laboratorio químico: Uso y
mantenimiento. Editorial McGraw-Hill.
• Brown, R. (2007). Guía práctica para el uso de balanzas de precisión en
laboratorios. Editorial Thompson.
• Jiménez, A., & Morales, F. (2012). Manual de seguridad en laboratorios de
microbiología. Editorial Elsevie

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