Tratamientos Térmicos y Controles en Leche: Área Leche y Productos Lácteos Inst. Tecnología de Alimentos (ITA-FIQ-UNL)
Tratamientos Térmicos y Controles en Leche: Área Leche y Productos Lácteos Inst. Tecnología de Alimentos (ITA-FIQ-UNL)
Tratamientos Térmicos y Controles en Leche: Área Leche y Productos Lácteos Inst. Tecnología de Alimentos (ITA-FIQ-UNL)
y
Controles en Leche
MOs alterantes
(alteración
organolépticas)
MOs Banales
(indistintos/propios
Aplicación de tratamientos térmicos de la leche)
banalesalterantes
patógenos Termización: 65ºC / 15 seg patógenos
alterantes
patógenos alterantes patógenos
banales
banales alterantes banales banales
patógenos patógenos alterantes
banales
patógenos
alterantes
Pasteurización 72ºC / 15 seg (HTST))
Toma de muestra de Inclinación de paleta a Adición de igual vol. Mezcla total del contenido Tiempo de rxn 20 s
cada cuarto (aprox. 2 modo de nivelar el de Reactivo CMT. con mov. Circulares (no > aprox. Se recibe
ml). Previo despunte. contenido de leche. a 10 seg). una calif. visual.
Lectura del CMT Examinación visual sobre rxn de gelificación.
mayor Gel formado mayor (peor) calificación otorgada.
Interpretación: el grado de CMT se relaciona directamente con el promedio del conteo de CS.
Grado T (trazas):
1 rxn o más indica
que hay mastitis
subclínica.
Negativo - No Infectado. Positivo – Infectado. Inmediato
Sin espesamiento de la espesamiento de la mezcla con
mezcla. ligera formación de gel. Fuente: Roger Mellenberger, Dpto. Ciencia Animal, Univ. del Estado de Michigan.Abril, 2020.
Control de Calidad de la Leche - Laboratorio
Importancia del Análisis
Control de procesos, calidad de materia prima y en productos terminados.
Asegurar el cumplimiento de lo establecido en la legislación (CAA).
Pago a los productores.
Control de fraudes o adulteraciones.
Requerimientos para el etiquetado nutricional (Ca, Na, etc.)
La Calidad del producto que llega al consumidor, depende del control que se realice sobre la leche
cruda.
Procedimiento de Muestreo (CAA art 556/2020 – FIL 50 C:1999)
Realizado por personal calificado y entrenado, en buen estado de salud.
Lograr adecuada homogeneidad del producto antes del muestreo.
La muestra a tomar deberá ser representativa del material en estudio (Nº muestras: las necesarias a fin de reservar
una de ellas por cuestiones de disputa o problemas legal).
Documentar el procedimiento – Rotular.
Uso de material adecuado (inertes, c/ cierre herméticos, limpios, etc.).
Adecuada conservación de la muestra.
En caso de efectuar análisis microbiológico, tomar la muestra en cond. de esterilidad (recipientes, utensilios, etc.) y
luego proceder al análisis fisicoquímico.
Técnicas de Análisis Fisicoquímicos
Acidez titulable y pH
Técnicas rutinarias – control.
Criterio de evaluación sobre la Calidad Higiénico – Sanitario de la leche (cuidado en el ordeño, trasporte y
conservación).
No puede ser utilizado como único indicador de calidad sanitaria (pruebas de alcohol,de ebullición,fosfatasa alcalina,etc).
Importantes en el control de procesos en prod.fermentados (ej:yogur,queso).
Acidez titulable Grado Dornic: expresa contenido de HLa. Se define como los ml de NaOH N/9 necesarios
IRAM 14005 / basada en para neutralizar 100 ml de leche, usando como indicador Fenolftaleína (Fn) [viraje: 8,0 – 9,6].
AOAC 947.05 Ed 15 th Cálculos/Relaciones: %HLa (mg/100ml) = m: cant. muestra (ml)
Vg: vol gastado NaOH (ml)
(Vg*N*Peq*100)/m
N: N exacta sol.NaOH (meq/ml)
1 ºD = 0,01 %HLa (gr/100ml) 1 ºD = 0,1 ml sol. Dornic (bureta) (c/10 ml leche) Peq: 90 (mg/meq) HLa
Det. Potenciométrica
(pH)
Método rápido y no
destructivo.
Permite cuantificar la
[H+] libres en el
medio. Valores aceptados: ºD: 14 – 18 y
pH < 6,6 exec. desarrollo de BAL y/o alta concent. proteínas
pH > 6,8 mastitis pH: 6,57 – 6,96 (Cap.VIII – CAA)
Estabilidad al Etanol (prueba de alcohol) [FIL 48: 1969] – Cap. VIII - CAA
Técnica cualitativa/presuntiva. Permite evaluar estabilidad de la leche (fracción proteica/caseína) frente a los Tratam.Térmicos (TT).
No es por sí sola definitiva – se realiza junto con la Prueba de Estabilidad por Ebullición.
Fundamento: se añade a la leche una cant. de alcohol etílico (1:1), la cual produce una deshidratación parcial o total en la fase
proteica que puede desembocar su desnaturalización, con posterior pérdida de equilibrio y floculación de las mismas.
Factores de inestabilidad al alcohol: composición anormal de proteínas (exceso de albúminas); desequilibrio salino (mastitis:
eleva contenido Cl, Na ó inicio y final del período de lactación: leche c/mayor contenido de Cl, Na, Ca y Mg).
Uso (Industria): leche cruda (alcohol 70ºGL) y leche tratada (destinada a prod.) alcohol 75ºGL y con alcohol 80ºGL en
leche UHT sobre producto final antes de liberarse.
Si la prueba de alcohol da positiva se debe confirmar con la prueba de acidez (cuantitativa).
Obs: Prueba
Dudosa - nueva
adición de 1 ml
de Alcohol.
Mezcla de Leche + Etanol (1 :1). Agitación (inversión) / ± 1 min. Estable (No coagula) Inestable (Coagula)
Prueba de Ebullición y Test olfativo [Godet y Mur (1966)] – Cap. VIII - CAA
Adicionar 10 ml muestra en tubo de ensayo. Resultados: Negativo (s/coágulo) / Positivo (coágulo)
El resultado es orientativo – Casos Positivos
Calentar sobre mechero hasta ebullición (10 a 15 seg).
confirmar con det. de Acidez y pH.
Volcar parte de muestra/observar formación de coágulo. Dato Industria: en recepción de leche a planta, se realiza
control olfativo direct. sobre tanques cisternas a fin de
Control olfativo sobre muestra.
detectar olores muy marcados (combustible, amoniacal, etc.).
Determinación de la Densidad - Lactodensímetro [AOAC 18 th Ed. 925.22] - CAA
Técnica simple. Utilizada c/frecuencia p/evaluar leche en condición de fresca; en procesamiento; reconstituida o recombinada.
Nos permite conocer en primera instancia, algún posible fraude/adulteración de la misma.
Valores por debajo indican aguado probable o indiscutible (según el valor) y/o aumento del %MG (que tiene menor
densidad que el resto), y caso contrario indican un descremado de la leche. [CAA: 1,028 a 1,034 g/ml].
Procedimiento e interpretación resultados
Calentar la muestra
Lectura directa
37 - 40 ºC (ρ y Tº)
c/agitación suave. Enfriar
15 - 20ºC Corrección por temperatura
(fórmula ó tabla).
Verter c/cuidado la leche Introducir lactodensímetro/evitar contacto c/paredes .
en probeta 250 ml . Dejar reposar completamente . Milkoscan (FTIR) - Lactoscan
-Equipos Sencillos.
Punto de congelación - Crioscopía [ISO 5764-IDF 108:2009]
Sistema de rápido enfriamiento.
Importante para determinar el grado de aguado en leche (hasta un 2%). Visor Rta: Tº muestra y %H2O
Se basa en el estudio de la temperatura de congelamiento de la leche. agregada
Valores normales: - 0,54 ºC a – 0,55 ºC
( > a - 0,53 aguado probable) ( > a - 0,50 aguado indiscutible) Obs: el Descenso Crioscópico (DC) se da ppalm. por lactosa y sales
disueltas. En leche muy ácidas (> 20ºD) aumenta el DC por formación
% H2O agreg. = (PC leche pura – PC muestra)*(100-ST)/PC leche pura de mayor Nº moléc. de soluto debido a la fermentación de Lactosa.
PC leche pura/referencia: máx. - 0,512 ºC – Cap VIII - CAA Aplicar en leches frescas.
Detección de Antibióticos – Auroflow BTS combo
Técnica cualitativa (Test rápido) aplicada a la detección de residuos de antibióticos en leche cruda (β-lactámicos; Tetraciclinas
y Sulfonamidas).
Test versátil: diseñado para uso en campo o laboratorio.
Fundamento: Los Antibióticos presentes en leche se ponen en contacto con Receptores específicos, presentes en la cubeta.
La unión de los antibióticos impide que los receptores se unan a las líneas de captura de la tira de reacción, evitando
formación de la línea de color (Positivo). Caso contrario (presencia de linea de color), es indicación Negativa.
Origen: vía administración de medicamentos (tetraciclinas, sulfamidas, etc.) p/tratamiento de mastitis u otras infecciones en el
ganado.
Presencia de residuos: riesgo sanitario para el consumidor (efectos: reacciones alérgicas; alteración en la flora intestinal,
etc.) y problemas tecnológicos (interferencia en el crecimiento de cultivos iniciadores (quesos, yogurt)).
Fundamento: se coloca una muestra de leche en una pipetas con esporos de Bacillus stearothermophilus, en medio
agarizado. Se incuba en un baño de agua a 60ºC/3 hr.
Interpretación de resultado
Negativo Positivo
Video: https://www.youtube.com/watch?v=s0ETBnHgWnQ
Técnicas de Análisis Microbiológicos
Prueba de la Reductasa microbiana
Técnica cualitativa,no adecuada para estimación directa/precisa del Nº de Bacterias por ml.
Criterio de evaluación Higiénico – Sanitario de la leche (cuidado en el ordeño,trasporte y conservación).
Fundamento: Se basa en añadir una sol. de Azul de Metileno que se decolora al pasar de la forma oxidada a la reducida. La rapidez de la
decoloración esta en función de la población bacteriana presente. Permitiendo determinar indirectamente la calidad higiénica de la leche.
Coliformes
Fundamento: se realizan diluciones de la muestra en agua de peptona 0,1%. Recuento en placas en medio cultivo
agarizado (Agar Bilis Rojo Violeta – ABRV), incubando a 32ºC / 24 hr.
Géneros más representativos: Escherichia, Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter.
Fundamento: se entiende por contenido de extracto seco (ES), el residuo expresado en porcentaje de peso, obtenido luego de
efectuada la desecación de la muestra hasta peso constante en estufa a temperatura constante.
Secado por Estufa: método gravimétrico simple, preciso,no requiere de equipamiento sofisticado.
Importancia: determinar el cumplimiento de requisitos legales (CAA); det. de adulteración por agua; influencia en rendimientos de
prod. (yogur, quesos).
Procedimiento y Formulación.
• Muestra: Homogenizar en baño termostático a 20±2ºC.
• Material: se coloca en cápsula de porcelana aprox. 25 gr de arena tratada (lavada con HCL, secada y tamizada) y varilla de
vidrio. Luego llevar el conjunto a estufa 102±2ºC durante al menos 1 hr.
• Enfriar en desecador. Anotar rápidamente el valor como masa cápsula vacía (mcap).
• Agregar 3 gr de muestra. Anotar como masa muestra (mm).
• Introducir en estufa a 102±2ºC hasta lograr pesada constante (podría llevar hasta 4 hr aprox.)
• Enfriar (Tºambiente) en deseador y pesar. Anotar como masa final luego de estufa (mf).
• Obs: repetir desecación hasta lograr una dif. no mayor de 0,05 mg entre dos pesadas consecutivas.
Extracto seco magro (ESM): se obtiene por diferencia Fig. imagen de extracto seco en leche fluida
entre el valor de extracto seco total y el valor de materia
grasa.
%𝐸𝑆𝑀 = %𝑆𝑇 − %𝑀𝐺 (ESM mín 8,2% p/p – CAA)
Determinación de Cenizas totales – Método por vía seca [AOAC 1984 – Nº 16035]
Fundamento: se basa en cuantificar la totalidad de minerales presentes en la muestra, previa calcinación completa de la
materia orgánica.
Niveles anormales: Inferiores (aguado, alimentación). Superiores (mastitis, adulteración con suero en polvo).
Ventaja: simple, no requiere reactivos. Desventajas: Posibles pérdidas por volatilización (Tº en mufla), largos tiempos de
análisis.
Procedimiento y Formulación
• Material:colocar crisoles previamente en mufla (2-3 hr/500 - 550ºC),a fin de eliminar posibles restos y obtener pesada constate del material.
• Enfriar (Tº amb.) en desecador. Pesar.Anotar como masa crisol vacío (mcrisol).
• Agregar 3 gr de muestra.Anotar como masa muestra (mm).
• Evaporar primero hasta sequedad. Luego pre-calcinar bajo campana en platina hasta residuo carbonoso.
• Calcinar en mufla 500±10ºC, hasta cenizas blancas y pesada constante (demanda aprox. 2 hr).
• Enfriar en desecador y pesar.Anotar como masa final luego de mufla (mf).
• Obs: si se observan partículas carbonosas, enfriar y luego humedecer c/ poca agua dest. Romper las partículas de carbón
con varilla y evaporar cuidadosamente a sequedad en platina. Luego volver a calcinar. Repetir tantas veces sea necesario.
%𝐶𝐸 = ( ) * 100
Fundamento: se basa en la separación de la materia grasa luego de un proceso de digestión en la muestra con ácido sulfúrico
y posterior centrifugación. La lectura del contenido de grasa se realiza directamente en la escala graduada del butirómetro.
Obs: se adiciona alcohol amílico para mejorar la separación de la materia grasa del resto de la muestra.
Técnica alternativa, simple, rápida para control de rutina y bajo costo.
Importancia: Propósitos regulatorios y nutricionales. Estudio de adulteraciones (con grasa origen animal y/o vegetal).
Requisito CAA (art. 555)– determinación de grasa origen vegetal: Negativo.
Procedimiento y resultado
Lectura del
%MG (espiga
graduada)
20 ml leche muestra
60 - 80 ml H2O dest. Mezclar bien y Solución de
1 ml Ferrocianuro K reposar 10 a 15 min Completar vol.
lactosa
(15%) (pptación proteínas) Matraz y filtrar
desproteinizada
1 ml Sulfato Zn (30%) (Filtrado)
100 ml sol. Leche
Valoración del reactivo FCB (1) y valoración de muestra leche (2)
(1)Titular c/sol.
Patrón lactosa Titular 1 gota/seg. Añadir 0,5 ml Continuar
10 ml FCB (1%) Hasta viraje azul a azul de metileno titulando hasta
Calentar a
30 ml H2O dest. celeste/verdoso (sol. azul) obs. 1º coloración
ebullición (2)Titular c/sol.
Trozos de amarillo
porcelana Leche (filtrado)
ANEXO
Las leches que respondan a lo establecido en los art.554 y 555,se considerarán
NO APTAS para ser consumidas como tal o para ser destinadas a la elaboración de
leche y productos lácteos,debiendo ser decomisadas cuando se verifique una o más
de las siguientes condiciones:
Water Feed
Coliforms Clostridium
Pseudomonas Listeria
Coryneforms Bacillus
Alcaligenes Outside udder and
Lactic acid bacteria
teast
Micrococcus Milking
Soil Bedding Staphylococcus machine Human
Clostridium Clostridium Enterococcus Micrococcus Coliforms
Bacillus Bacillus Bacillus Streptococcus Salmonella
Pseudomonas Klebsiella Bacillus Enterococcus
Mycobacterium
Coliforms Staphylococcus
Yeasts and moulds
Técnica encaminada a detectar posibles alteraciones
patológicas de la leche por mastitis.
Prueba en Campo Test rápidos de diagnósticos que determinan Calidad
Higiénica y el Nº de células somáticas.
Permite descartar la Leche antes de su recolección y
MASTITIS evitar mezclarlas con otras partidas en tanques de
refrigeración.
Enfermedad – Inflamación/Infección de Glándulas
Mamarias (GM). Causada por penetración/multiplicación
Mastitis Bovina
de Bacterias dentro de las GM (gralm).
Reacciones alérgicas
Desórdenes intestinales
Consecuencias
Disminución de act. de
fermentos
Inducción de resistencia
bacteriana
Gracias por
su atención!
Lic. Calderón M. Leonardo
[email protected]