Laboratorio - "Técnica de ELISA"

LABORATORIO : “Técnica de ELISA”
OSCAR EDUARDO SABOGAL
UNIVERSIDAD MANUELA BELTRAN
TECNOLOGIA EN DESARROLLO DE LA INGENIERÍA AMBIENTAL
(VIRTUAL)
28/AGOSTO/ 2024
CALI VALLE
1
Práctica de Laboratorio Virtual: Técnica de ELISA para el Reconocimiento de

Anticuerpos
Objetivo: Comprender el funcionamiento de la técnica de ELISA para la detección de

anticuerpos, y evaluar sus aplicaciones en la vida cotidiana, especialmente en la
caracterización de personas para COVID-19 y otras enfermedades virales como VIH.
b) Explicación de los Pasos y Procedimientos en la Técnica de ELISA
La técnica de ELISA se utiliza para detectar anticuerpos o antígenos en una muestra mediante
una serie de pasos que involucran la unión específica de estos componentes a anticuerpos o
antígenos marcados con enzimas que generan un cambio de color. Este cambio de color es lo
que finalmente se mide y cuantifica.
1. Recubrimiento de los Pocillos: Los micropocillos del ensayo se recubren con

antígenos o anticuerpos específicos, dependiendo del objetivo de la prueba. Para
asegurar que las proteínas diana se adhieran correctamente al pocillo.
2. Añadido de la Muestra: Se agrega la muestra biológica al pocillo. Si la muestra

contiene proteína diana (anticuerpo o antígeno), ésta se unirá a la sustancia
previamente recubierta en el pocillo.
3. Adición de Anticuerpos Especiales: Después de la incubación, se retira la muestra no

unida y se añaden anticuerpos secundarios marcados con enzimas. Estos anticuerpos
especiales se adhieren a la proteína diana (anticuerpo o antígeno) que ya se encuentra
en el pocillo.
4. Lavado: El siguiente paso es crucial: se lavan los pocillos para eliminar cualquier
anticuerpo no unido. Este proceso asegura que solo los anticuerpos marcados con
enzimas que se han unido correctamente queden en el pocillo.
5. Reacción enzimática: Se añade un sustrato enzimático que reacciona con la enzima

adherida al anticuerpo secundario, lo que genera un cambio de color en la muestra.
6. Lectura de la Muestra: Finalmente, se mide la absorbancia del color generado usando

un lector de ELISA. Cuanto mayor sea la absorbancia, mayor será la concentración de
la proteína objetivo en la muestra.
2
c) Usos de la Técnica de ELISA en la Vida Cotidiana
La técnica de ELISA es ampliamente utilizada en diversas áreas de la salud pública y la

investigación biomédica. Un ejemplo claro es su uso en la detección de COVID-19. Durante la
pandemia, las pruebas de ELISA se utilizaron para identificar la presencia de anticuerpos
contra el virus SARS-CoV-2 en individuos, permitiendo determinar quiénes habían estado
expuestos al virus y en qué medida.
Otro uso común de ELISA es en la detección de VIH, donde se utiliza para identificar la
presencia de anticuerpos contra el virus en la sangre
d) Alcances de la Técnica de ELISA en el Reconocimiento de Enfermedades Virales
La técnica de ELISA tiene un gran alcance en la identificación de enfermedades virales.

Además de COVID-19 y VIH, se utiliza para detectar hepatitis, dengue, zika y muchas otras
infecciones virales. La sensibilidad y especificidad de ELISA permiten la identificación temprana
de estas enfermedades, lo cual es crucial para su control y manejo.
¿Para qué se utiliza la técnica de ELISA?
La técnica de ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) se utiliza principalmente

para detectar la presencia de anticuerpos o antígenos específicos en muestras
biológicas. Es una herramienta fundamental en el diagnóstico de enfermedades
infecciosas, detección de enfermedades autoinmunes, pruebas de alergias, y en
estudios de investigación para cuantificar proteínas específicas.
¿Qué tan exacta es la prueba con antígenos de VIH, COVID-19 y Hepatitis C?
VIH: La prueba ELISA para VIH tiene una alta sensibilidad y especificidad,
generalmente superiores al 99%. Esto la convierte en una de las pruebas
estándar para la detección de anticuerpos contra el VIH en etapas tempranas de
la infección.
COVID-19: Durante la pandemia de COVID-19, las pruebas de ELISA se

utilizaron para detectar anticuerpos contra el SARS-CoV-2. La exactitud varía
según el momento de la infección y el tipo de ensayo, pero en general, las
pruebas ELISA han mostrado una alta sensibilidad (alrededor del 85-95%) y
especificidad (alrededor del 90-99%).
Hepatitis C: La técnica de ELISA es una de las herramientas clave para la

detección de anticuerpos contra el virus de la Hepatitis C (HCV). Su sensibilidad
y especificidad suelen ser superiores al 99%, lo que la convierte en un método
confiable para el diagnóstico inicial de esta infección.
¿Esta técnica puede ser usada para detectar enfermedades autoinmunes? Sí, la
técnica de ELISA también se utiliza para detectar enfermedades autoinmunes mediante
la identificación de autoanticuerpos en la sangre.
3
○ Tiroiditis de Hashimoto: La tiroiditis de Hashimoto es una enfermedad

autoinmune donde el sistema inmune ataca la glándula tiroides. Uno de los
marcadores principales en esta enfermedad son los anticuerpos contra la
peroxidasa tiroidea (anti-TPO) y la tiroglobulina (anti-TG).
Detección con ELISA: La técnica de ELISA puede detectar estos anticuerpos
en la sangre. Al cubrir los pocillos con antígenos específicos (TPO o TG), la
prueba puede identificar y cuantificar los anticuerpos presentes en la muestra del
paciente, lo que permite diagnosticar la enfermedad de manera precisa.
Infografía:
4
5
6

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1. Recubrimiento de los Pocillos: Los micropocillos del ensayo se recubren con

2. Añadido de la Muestra: Se agrega la muestra biológica al pocillo. Si la muestra

3. Adición de Anticuerpos Especiales: Después de la incubación, se retira la muestra no

5. Reacción enzimática: Se añade un sustrato enzimático que reacciona con la enzima

6. Lectura de la Muestra: Finalmente, se mide la absorbancia del color generado usando

c) Usos de la Técnica de ELISA en la Vida Cotidiana

La técnica de ELISA es ampliamente utilizada en diversas áreas de la salud pública y la

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La técnica de ELISA tiene un gran alcance en la identificación de enfermedades virales.

¿Para qué se utiliza la técnica de ELISA?

La técnica de ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) se utiliza principalmente

¿Qué tan exacta es la prueba con antígenos de VIH, COVID-19 y Hepatitis C?

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Hepatitis C: La técnica de ELISA es una de las herramientas clave para la

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