Metodología NIOSH 7400 FIBRAS - ASBESTO (CIPA 7)

Metodología NIOSH 7400, asbesto y otras fibras por Microscopía
de contraste de fase
Niveles de exposición laboral al asbesto y su relación con la problemática de daño

en la salud
La manipulación de materiales que contengan asbesto tiende a liberar fibras que pueden
ser inhaladas, acumulándose en los pulmones por un largo periodo, provocando
inflamación y cicatrización del tejido donde se han hospedado, dado que el asbesto
en todas sus formas es considerado como cancerígeno para los humanos.
A pesar de las estrategias desarrolladas a nivel mundial, los trabajadores sufren serios
problemas por la exposición laboral, doméstica o ambiental al asbesto. Algunos
organismos internacionales han definido límites de exposición laboral, los que sirven
como referencia para la evaluación, control y diseño de medidas de prevención,
definiendo un límite umbral de 0.1 f/cm3 para una jornada laboral de 8 horas
La toxicidad de la fibra de asbesto está asociada a tres factores fundamentales, la
dosis, tamaño y el tiempo de exposición. El nivel de exposición determina donde se
acumulará la fibra en el sistema respiratorio, influenciado por la relación longitud/diámetro,
y está determina el tipo de daño que pueda causar
Niveles de exposición laboral al asbesto
Algunos organismos internacionales han definido límites de exposición laboral al asbesto.
En la Tabla 2-2 se presentan los valores de referencia para la evaluación y control de los
riesgos inherentes a la exposición por inhalación, sin embargo, estos valores no
constituyen una barrera definida de separación entre situaciones seguras y peligrosas.
Tabla 2-2. Límites de exposición al asbesto definidos por organismos internacionales
TIPOS DE MUESTREOS APLICADOS PARA EL ÁNALISIS DE FIBRAS (ASBESTO).
- Microscopía de contraste de fase. (este es el método que vamos hacer énfasis).

- Microscopía electrónica de barrido.
- Técnica de espectroscopía por energía dispersa (EDS).
- Difracción de rayos X.
MUESTREO
Metodología NIOSH 7400, Asbesto y otras fibras por Microscopía
de contraste de fase
Esta Metodología describe los aspectos que deben tenerse en cuenta para el muestreo,
así como los reactivos y equipos necesarios para la medición, cálculo y reporte de
resultados.
El muestreo se realiza ubicando un tren de muestreo (ya sea de tipo personal o en
ambientes generales).
 Cuando se monitorean ambientes laborales, se sujeta el equipo al trabajador, con
una manguera que llega a la zona respiratoria.
 Cuando se realiza en áreas o zonas abiertas, el equipo se ubica en un trípode o
cualquier otro objeto que lo mantenga fijo.
En la Figura se presenta el tren de muestreo y su ubicación en el trabajador:
Este Método nos permite identificar más fácilmente para establecer:
- la comparación con los límites de exposición laboral.

- Seguimientos de casos Epidemiológicos.
- Evaluación de la eficacia de las medidas de control en los sitios de trabajo.
Microscopía de contraste de fase

Es la técnica más utilizada para determinar la concentración en el aire de asbesto
respirable o fibras minerales sintéticas, por su bajo costo en relación con otras técnicas.
Tiene el inconveniente que es un método visual, manual y estadístico para el que se
requiere una gran habilidad y un buen adiestramiento del operador.
Es una técnica óptica que se puede utilizar para producir imágenes de alto contraste de
muestras transparentes como:
- Células vivas (generalmente en cultivo).

- Microorganismos.
- Cortes de tejido fino.
- Patrones litográficos.
- Fibras.
- Dispersiones de látex.
- Fragmentos de vidrio y partículas subcelulares (incluidos núcleos y otros orgánulos).
En efecto, la técnica de contraste de fase emplea un mecanismo óptico para traducir

pequeñas variaciones de fase en los correspondientes cambios de amplitud, que pueden
visualizarse como diferencias en el contraste de la imagen.
El análisis de fibras de asbesto, con microscopía de contraste de fase, es una técnica
cuantitativa, dado que permite solo el conteo de fibras con una longitud >5 µm, un ancho
3:1, pero no permite diferenciar los tipos de fibras, por lo que, si se requiere esta
identificación, es necesario utilizar otros procedimientos y técnicas analíticas como son la
microscopía de luz polarizada y dispersión, la microscopía electrónica de transmisión y de
barrido, la difracción de rayos X, el análisis químico, la espectrofotometría infrarroja, etc
Materiales y métodos
Tipo de estudio
El estudio es de tipo exploratorio, que cuantifica y caracteriza fibras de asbesto mediante
el uso de técnicas de análisis por microscopía y análisis microelemental en muestras de
ambientes laborales.
Población y muestra de estudio

Población
- Trabajadores en ambientes laborales que realizaban actividades asociadas con
asbesto del sector construcción.
Muestra
- Ambientes laborales.
Área geográfica
- Empresa de la construcción que realizaban actividades de excavación.
Materiales, reactivos y equipos

Materiales
- Pala de jardín para recolección de muestra del subsuelo
- Bolsas ziploc
- Marcadores
- Cubre objeto de 25 x 25mm
- Filtro de esteres de celulosa de 0.8 µm tamaño de poro y 25 mm de diámetro
- Porta objeto de 25 x 75 mm
- Levantador de filtro.
- Papel limpia lentes o papel de arroz
- Esmalte de uñas transparente corriente
- Pinza no dentada
- Gotero
- Guantes de seguridad antiestáticos
- Jeringa que pueda entregar 200 µL
Reactivos
- Acetona grado p.a. 99% de pureza
- Acetona para cromatografía líquida de alta eficacia (High-performance liquid
chromatography (HPLC), por sus siglas en inglés)
- Triacetina (glicerol triacetato) reactivo 99% de pureza
Equipos
- Manguera, por donde circula el volumen de aire para capturar las fibras presentes en
el ambiente laboral, con una longitud aproximada de 80 cm, desde la cintura en donde
se adapta la bomba al cinturón del trabajador, hasta la altura de la zona respiratoria,
sujeta a la camisa del individuo.
- Microscopio invertido de fase Eclipse TE300, marca Nikon.
población a estudiar
- fueron seleccionados para monitoreo un ambiente laborale, con la participación de 10
trabajadores. Se planteó monitorearse el 70% de la jornada laboral. Adicionalmente,
se planteó la toma de muestras en dos sitios donde se realizaban excavaciones para
obras civiles.
Desarrollo de pruebas preliminares experimentales

- El objetivo de las pruebas de laboratorio fue obtener muestras para el análisis por
microscopía de contraste de fase y microscopia electrónica de barrido, que
permitieran al tesista adquirir destreza para la identificación de todo tipo de fibras y en
especial aquellas que pudieran ser de asbesto, además, llevar a cabo el conteo de las
fibras presentes, aplicando cada uno de los parámetros definidos en la metodología
NIOSH 7400 “Análisis de fibras de asbesto y otro tipo de fibras”.
Criterios de recuento de fibras y método estadístico para estudio

de los resultados de microscopía por contraste de fase
La metodología NIOSH 7400 y la técnica de análisis definida por la OMS, establece
algunos parámetros que se deben tener en cuenta al momento del conteo de las fibras.
Criterios de recuento:
 Se considera una fibra aquella estructura que presenta una longitud ˃5 µm, un diámetro
menor de 3 µm y una relación longitud/diámetro 3:1
 La uniformidad de la fibra, definida por su longitud y grosor.
 Las protuberancias de las fibras, relacionadas con abultamientos que puedan presentar.
 Los extremos de las fibras (que estén dentro o fuera del campo de lectura),
 Fibras divididas o unidas, siempre y cuando estén dentro del campo de conteo.
 Agrupación de las fibras, las cuales pueden generar ramificaciones y deben ser
contadas por separado.

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Niveles de exposición laboral al asbesto y su relación con la problemática de daño

TIPOS DE MUESTREOS APLICADOS PARA EL ÁNALISIS DE FIBRAS (ASBESTO).

- Microscopía de contraste de fase. (este es el método que vamos hacer énfasis).

Este Método nos permite identificar más fácilmente para establecer:

- la comparación con los límites de exposición laboral.

Microscopía de contraste de fase

- Células vivas (generalmente en cultivo).

En efecto, la técnica de contraste de fase emplea un mecanismo óptico para traducir

Población y muestra de estudio

Materiales, reactivos y equipos

Desarrollo de pruebas preliminares experimentales

Criterios de recuento de fibras y método estadístico para estudio

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