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    Informe PCR Caso Clinico

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    ESCUELA DE QUIMICA Y FARMACIA

    INFORME FINAL DEL PRÁCTICO DE ANALISIS DE CASOS CLINICOS


    DEL LABORATORIO INTEGRADOR
    Nombre de los alumnos: Sebastián Chávez, Leonardo Gallardo, Patricio
    Tapia Grupo: 4

    Práctico No.: 8 Nombre del práctico: Biología Molecular. Identificar


    Patógenos de Interés Mediante Reacción en Cadena de
    Fecha: 8/05/2023 la Polimerasa (PCR)

    Identificación de la Muestra: Salmonella Typhi

    Datos suministrados del Caso Clínico:


    Paciente de sexo masculino 37 años, sin enfermedades previas conocidas, consulta por
    cuadro de 10 meses de evolución de alteraciones gastro intestinal. Refiere episodios
    periódicos mensuales de unos 10-15 días de duración de deposiciones líquidas,
    marronáceas, abundantes, sin productos patológicos, precedidas de dolor abdominal tipo
    cólico, con urgencia, y una pérdida ponderal cuantificada de 12 kg de peso en este
    periodo.

    Exploración física: Normal


    Estudio analítico: Hemograma completo, bioquímica renal y hepática, función tiroidea,
    serología de enfermedad celíaca y proteinograma que resultaron dentro de la normalidad.
    Coprocultivo: Crecimiento de patógenos. Sin embargo, no había evidencia
    de otros gérmenes enteropatógenos, ni tampoco parásitos ni toxina de C. difficile.
    Tratamiento: Levofloxacino durante 7 días con remisión de la sintomatología y
    recuperación ponderal progresiva en las revisiones posteriores.
    Objetivos: Aprender la metodología y fundamento del PCR para
    identificación bacteriana

    Formulas y/o Reacción o reacciones:


    Materiales, reactivos y equipos:

    Equipos - Termociclador
    requeridos - Estufa de cultivo
    - Cámara de electroforesis
    - Fuente de poder
    - Transiluminador
    - Microondas
    - Centrifuga

    Materiales - Placas de Petri con cultivos bacterianos


    - Tubos eppendor 1,5 mL y 0,1 mL (estériles)
    - Micropipetas 1000, 200, 20 y 2µL (p1000, p200, p20 y
    p2)
    - Puntas para micropipetas (estériles)
    - Máster mix
    - Partidores
    - Agus bidestilada (estéril)
    - Agarosa
    - Buffer TAE
    - GelRed (colorante para DNA en geles de agarosa)
    - Estándar de Masa Molecular
    Resultados:

    En la siguiente foto, se puede apreciar la corrida de PCR. Cada bolsillo


    (Banda) se puede apreciar una línea amarilla. Esta línea amarilla se puede
    apreciar las bandas amplificadas. Las dos primeras bandas corresponden al
    control negativo.

    Cabe mencionar que la corrida se dejó por aproximadamente 15 minutos, es


    por esto que no se aprecia del todo una distancia de corrida tan alta.

    Cálculos: No hay cálculos asociados

    Discusión de Resultados:
    La técnica PCR es una técnica la cual permite obtener un gran numero de
    copias de fragmento de DNA a partir de un molde de este mismo. Para
    efectos de este análisis, se utilizo diferentes reactivos como Master Mix,
    Primer (1 y 2), templado y H2O destilado, se programó corrida de PCR la cual
    duro aproximada mente 40`.

    La técnica PCR realizada logra amplificar el segmento de ADN, la cual


    identifica para la bacteria Salmonella Typhimurium la cual puede ser
    causante de la infección estomacal propuesta en el caso clínico.
    Conclusiones:

    En relación con el caso clínico expuesto, se puede concluir que la técnica de


    PCR realizada, si logra amplificar segmento de ADN la cual identifica para
    Salmonella Typhimurium, la cual puede ser causante del cuadro clínico.

    Bibliografía:
    1. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) | NHGRI. (n.d.). Genome.gov.

    https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Reaccion-en-cadena-de-la-

    polimerasa#:~:text=PCR%2C%20o%20la%20reacci%C3%B3n%20en,miles%20de

    %20millones%20de%20copias.

    2. Fundamentos de Biología Molecular y Biotecnología, Guía de trabajos prácticos UNAB,


    2019.

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