Practica Biomoleculas y Celulas - Biologia

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Colegio de Bachilleres. Plantel 14.

“Fidencio Villanueva Rojas”

Nombre de la práctica: “identificación de biomoléculas y observación de células”


Objetivos:
• Identificación de carbohidratos
• Identificación de proteinas
• Identificación de Lípidos
• Identificación de células eucariontes
Investiga esto antes del día de la practica lo debes llevar resuelto y presentarlo antes
de entrar al laboratorio por equipo.
1. ¿Cómo reacciona el Lugol para la identificación de los carbohidratos?
2. ¿Cómo reacciona el reactivo de benedict para la identificación de los carbohidratos?
3. ¿Cómo reacciona el reactivo de Sudan III para la identificación de los lípidos?
4. ¿Qué efecto tiene el ácido nítrico en las proteinas?
5. ¿Qué es una reacción xantoproteica?
6. Haz tu paso a paso de como se monta una muestra de sangre, de cebolla, de agua y
de tallo para microscopio óptico.
No olvides agregar a cada pregunta las fuentes de información
Colegio de Bachilleres. Plantel 14. “Fidencio Villanueva Rojas”

Fundamento
El uso del microscopio nos permite estudiar células de tamaño medio. Para ello es necesario
realizar preparaciones microscópicas que consisten en preparar el material biológico que
queremos observar, disponiéndolo en una capa o corte muy fino que posteriormente se tiñe
para observarlo mejor. Los organismos pluricelulares están formados por muchas células que
se organizan en tejidos, en los que resulta patente la especialización.
Materiales por equipo que nos da la • Agua de un canal o poza.
escuela • Masking tape y plumón indeleble
• Muestra de epitelio de cebolla.
• 8 porta objetos.
• Muestra de epitelio bucal
• 8 cubre objetos.
• 2 palillos
• 1 pinzas de disección
• 1 lanceta
• 1 microscopio óptico
• 1 flor con tallo y hoja
• 1 pinzas para tubo de ensayo
• 2 torundas de Algodón
• 1 gradilla
• Alcohol 5 ml
• 5 tubos de ensayo
• 2 pares de guantes
• 1 mechero de alcohol
• Cubrebocas
• 2 goteros
• 2 g de almidón
• Trapo
• Rayadura de ¼ de papa
Reactivos: • 2 cucharadas soperas de azúcar
• Colorante de azul de metileno • 2 jeringas de 5 ml
• Reactivo de Sudán III • 1 vaso de plástico
• Lugol o Xilol • 1 cuchara sopera
• Reactivo de Benedict • 2 cucharadas pasteleras
• 3 ml de ácido nítrico • 4 ml de leche entera
• 1 clara de huevo
Materiales que deben traer los • Sanitas, servilletas o Servitoallas
ESTUDIANTES • Cerillos

• Bata

Aclaraciones importantes con respecto al manejo de los microscopios

Para manejar el microscopio de una manera correcta debe seguir ciertas


recomendaciones:
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1. Antes de empezar su trabajo verifique que el objetivo de menor aumento este en posición
de empleo y la platina completamente abajo.
2. Conecte el microscopio y enciéndalo.
3. Coloque la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas y ubique la
muestra en el haz de luz que sale a través de la platina.
4. Subir la platina, con la ayuda del tornillo macrométrico, hasta que la muestra este lo más
cerca del lente objetivo. Esto debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular.
5. Regule la apertura de los lentes oculares según la apertura de sus ojos, para su mayor
comodidad.
6. Revisar que los portaobjetos y cubreobjetos estén limpios.
7. Colocar sobre un portaobjetos limpio una gota de agua de la muestra y tapar la preparación
con un cubreobjetos de manera que no queden burbujas en el aire.

Procedimientos para muestras

BIOMOLÉCULAS
Identificación de carbohidratos
1. Rotula 1 tubo de ensayo con el nombre de papa y otro con el nombre de almidón
2.En el tubo de ensayo de almidón agregue los 2 g de almidón y 3 ml de agua, mover con el
agitador de vidrio.
3. tome foto a la muestra con agua y poner en la gradilla
4. agregar 10 gotas de Lugol y tome foto de la muestra
3. En el otro tubo de ensayo que denominamos papa agrega la rayadura de papa, agrega 3 ml
de agua y tomar fotografía
4. Agrega 10 gotas de Lugol y toma foto
5. Prepara en tu vaso una solución de 1 cucharada de azúcar y 10 ml de agua
6. Vierte en un tubo de ensayo 5ml con jeringa de reactivo de benedict, agrega 5 ml de agua
con azúcar. Ponerlo en la gradilla
7. Prender el mechero, tomar con las pinzas el tubo de ensayo y acercarlo al mechero, con
una altura que caliente la mezcla pero que no la queme. tomar fotografía del antes y
después.
Identificación de lípidos
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1. Coloque 4 ml de leche entera en un tubo de ensayo, agrega 10 gotas de reactivo de sudan


y agite bien el tubo y poner en la gradilla.
2. Tomar fotografía del color que tomaron las gotitas de grasa en la leche.
Identificación de proteinas.
1. En el recipiente donde tiene su clara de huevo agregue 5 ml de agua.
2. Coloque 3 ml de clara de huevo diluida (albumina) en un tubo de ensayo
3. Caliente el tubo en el mechero hasta el punto de ebullición, tomar fotografía.
4. Coloque en otro tubo otros 3 ml de albumina y agregue 7 gotas de ácido nítrico y observa
lo que pasa revolver bien y tomar foto.

Microscopio óptico para observación de células

A. Observación de células epiteliales bucales


Entre los tejidos animales que componen al ser humano, el tejido epitelial esta recubierto
por unas células de nombre epitelios que son revestimiento que encontramos en las
mucosas formados por células planas, tapizan aberturas naturales como la boca.
Pasos para la toma de muestra
1. Tomar una muestra de la mucosa bucal de la boca con ayuda de un palillo de dientes.
Para ello basta con frotar con suavidad el palillo por el interior de la mejilla de la
boca.
2. Extender la muestra sobre el portaobjetos con el palillo. Realizar un frotis.
3. Fijar la muestra pasándola sobre la llama del mechero, con cuidado de que no se
queme. Es una fijación con calor.
4. Cubrir la muestra con una gota de azul de metileno. Dejar actuar durante dos minutos.
5. Lavar la muestra con agua dejándola caer con cuidado a cuentagotas hasta eliminar
los restos de colorante.
6. Cubrir con un cubreobjetos y presionar con cuidado procurando que no queden
burbujas de aire.
7. Observa la preparación al microscopio moviéndola para visualizarla correctamente,
primero con 10 x y luego con 40 x.
8. Toma fotografía al 10x y 40x para que en los resultados de la practica pongas la
foto y expliques lo que se ve.
B) Observación de células sanguíneas.
1. Limpiar el dedo del que se hará la punción con algodón y alcohol
2. Con la lanceta estéril realizar una punción en un pulgar.
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3. Depositar una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos.


4. Colocar un portaobjetos como indica el dibujo y deslizarlo sobre toda la superficie de
la porta de manera que se pueda obtener una fina película de sangre. El porta absorbe
la gota y la arrastra, pero sin pasar nunca por encima de ella para no dañar los
hematíes.
5. Colocar el frotis de sangre sobre
la cubeta de tinción y añadir
unas gotas de alcohol absoluto y
dejar que el alcohol se evapore
para fijar la preparación.
6. Dejar secar aireando la porta o
bien al calor muy lento de la
llama del mechero.
7. Observar al microscopio óptico a 10x y 40x y tomar fotografías
C) observación de células vegetales
a) Sobre un portaobjeto pon una gota de agua y agrega un trozo de la hoja estirada y
posteriormente cubre con un portaobjeto.
b) Toma fotografía en 40 x
c) Repite el paso a con una parte delgada del tallo de la planta, observar tambien a 40 x
y tomar fotografía.
D) observación de células vegetales de la cebolla
a) Sobre un portaobjeto pon una fina capa de cebolla y agrega una gota de azul de
metileno o violeta cristal a la muestra deja reposar por 2 min enjuaga con poca agua
a cuentagotas y posteriormente cubre con un portaobjeto.
b) Lleva al microscopio óptico para verlas
Toma fotografía de la muestra en el foco de 40 x

D) observación de agua de canal


a) Sobre un portaobjeto pon una gota de agua y posteriormente cubre con un portaobjeto.
b) Lleva al microscopio óptico para verla. Toma fotografía de la muestra en el foco
de 40 x

ANÁLISIS DE LA PRACTICA
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Investiga y contesta.
PSD: No olvides poner fuentes de información
A) ¿Por qué se utilizó Lugol para identificar carbohidratos?
B) ¿Qué significa la coloración que tuvo el tubo donde agregamos reactivo de benedict
y azúcar?
C) ¿Qué hace el reactivo de Sudan en las proteinas? ¿Qué explica su coloración?
D) ¿Qué efecto tiene el ácido nítrico en las proteinas?
E) ¿Qué clase de tejidos forman la mucosa bucal y que tipo de células son?
F) ¿Qué tipo de células hay en la sangre y que función realiza cada una?
G) ¿Qué importancia tiene conocer los diferentes tipos de células?
H) ¿Qué tipo de célula tienen la planta elodea y la cebolla?
I) ¿Qué organelos vegetales se observaron en la hoja, tallo y la cebolla y que función
tienen en la célula?
J) ¿Para qué te sirvió conocer los diferentes tipos de células?
K) Esta experiencia practica ¿a que temas de la asignatura corresponden y por que?
L) Da 5 conclusiones que aprendiste de esta práctica.

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