EXPERIENCIA #3 - DETERMINACIÓN DE MARIHUANA EN ORINA Ok

UNIVERSIDAD DEL ATLÁNTICO - FACULTAD DE QUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA. SEXTO SEMESTRE

PERIODO ACADÉMICO 2024-1
EXPERIENCIA Nº
EXTRACCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE LOS PRINCIPIOS ACTIVOS DE

LA MARIHUANA EN ORINA
GENERALIDADES
La marihuana (cannabis sativa) como problema de identificación con fines forenses

representa sin duda gran interés por ser la más común de las drogas de abuso en
nuestro medio.
La mayoría de las muestras que llegan a un laboratorio de medicina legal están
constituidas por material vegetal de tamaño variable, más o menos seco en las cuales
es posible reconocer los elementos botánicos de la planta, residuos de combustión,
residuos que pueden quedar en los dispositivos utilizados para fumarla (pipa,
boquilla, etc.), parte de la resina se adhiere a los dedos.
Los principios activos de la marihuana están constituidos por una esencia a base de
p-cimeno y de diversos productos orgánicos y minerales. La resina es poco soluble en
agua, soluble en alcohol, éter, cloroformo, éter de petróleo, aceites y esencias. Las
propiedades narcóticas parecen relacionarse con los componentes fenólicos o con
alguno de ellos. Dichos componentes son: ácido cannabidiólico (A.C.B.), cannabidiol
(C.B.D), tetrahidrocannabinol (T.H.C), y el cannabinol (C.B.N). El tenor de cada uno de
estos componentes responde al grado de madurez de la droga, así, una cannabis
verde contiene una importante proporción de C.B.D y una muy madura presenta una
tasa aumentada de C.B.N.
Existen diversos métodos para la caracterización de la planta o sus resinas, estos

métodos incluyen técnicas microscópicas, ensayos químicos, y cromatografía en capa
fina.
Materiales y reactivos.
 Éter de petróleo
 Carbón activado.
 Reactivo de Bouquet
 Reactivo de Duquenois
 Solución azul sólido B
 HCL(C)
 Cloroformo
 Amoniaco
 Tubos de ensayo
 Erlenmayer
IDENTIFICACIÓN MICROSCOPICA
El examen microscópico es el método más rápido y práctico para la identificación de

los productos de tráfico ilícito de la marihuana. Se basa en el hallazgo de los
caracteres microscópicos de la planta que son constantes y específicos de la misma.
Consiste en examinar las muestras pulverizadas de la planta mezcladas con agua o
glicerina para determinar la presencia o ausencia de aquellos elementos botánicos
(glándula secretora de resina, pelo unicelular cistolítico, pelo simple) que son
característicos de la marihuana. Aunque el método se presenta sencillo al experto,
existen casos en los cuales surgen dudas o se pueden presentar equivocaciones.
ENSAYOS QUIMICOS
A pesar de que la identificación microscópica es suficiente para determinar que se

trata de marihuana, debe realizarse por rutina pruebas químicas sobre el material
existente para complementar y confirmar lo observado al microscopio.
EXTRACCION DE LOS PRINCIPIOS ACTIVOS
PROCEDIMIENTO
Tomar una cantidad de la hierba y reducirla en un mortero hasta partícula fina,

efectuar tres extracciones con 10-15ml de éter de petróleo, reunir los extractos
etéreos, si la solución presenta una coloración castaño-verdosa, agregue una
pequeña cantidad de carbón activado y filtre.
Divida el filtrado en cuatro porciones en pequeños vasos de precipitado y realice los

siguientes ensayos:
ENSAYO DE BOUQUET: Evapore sobre baño María el contenido de uno de los vasos,
disuelva el residuo en 1ml de acetona, añada 0.5ml del reactivo de Bouquet
recientemente preparado, dejar reposar. Un color marrón-rojizo se desarrolla
lentamente si el material es cannabis. Si se añade unas gotas de agua destilada a la
solución se observara una opalescencia blancuzca.
ENSAYO DE DUQUENOIS Y NEGM: Evapore a sequedad sobre baño María el

contenido de uno de los vasos, agregue 2ml del reactivo de Duquenois, agite bien y
trasvase a un tubo de ensayo, agregue con cuidado y lentamente por las paredes
del tubo 2ml de HCL(C), en la zona de separación aparece un anillo que presenta
diversos colores como verde pizarra, azul índigo, y violeta. Agitar con cuidado y dejar
reposar por unos minutos; el color violeta aumenta de intensidad progresivamente.
Si se agregan 2-3ml de cloroformo y se agita, el color se transfiere a la capa orgánica.
ENSAYO CON AZUL SÓLIDO B: sobre una hoja de papel filtro, colocar una gota del
filtrado etéreo, dejar evaporar el solvente, añadir una gota de solución azul sólido B,
exponer a vapores de amoniaco. La tonalidad de color rojo se intensifica.
CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA

Algunos autores expresan que los ensayos químicos son inespecíficos y proponen la
resolución cromatografía en capa fina que permite una buena separación de los
principales componentes de la resina C.B.D, T.H.C.
La aplicación del método permite tener una idea bastante clara de la composición de
las muestras en estudio; y la separación e identificación de los componentes de la
resina constituyen un importante juicio para sentar criterio presuntivo sobre la
actividad farmacológica de las resinas.
Fase estacionaria: sílica-gel HF 254
Fase móvil: Benceno-Hexano-Di etilamina (25-10-2)

Benceno.
N-Hexano - Dioxano(9-1)
Reveladores:
Azul sólido B: se obtiene colores púrpura para el C.B.N, rosa para el T.H.C. y rojo-
violáceo con el C.B.D.
Bencidina Diazotada: se obtienen colores amarillo-naranja para el C.B.N, rojo-naranja
para el T.H.C, y rojo castaño para el C.B.D.
Tenga cuidado con:
 Ácido Clorhídrico (HCl): esta sustancia provoca quemaduras e irrita las vías
respiratorias. En caso de contacto con los ojos, lave inmediatamente y con
abundante agua. En caso de accidente o malestar, acuda inmediatamente al médico.
 Cloroformo: esta sustancia es nociva por ingestión. Irrita la piel. Posibles

efectos cancerígenos. Nocivo: riesgo de efectos graves para la salud en caso de
exposición prolongada por inhalación e ingestión. Úsense indumentaria y guantes de
protección adecuados.
 Amoníaco (NH3): esta sustancia provoca quemaduras. En caso de contacto

con los ojos, lave inmediatamente y con abundante con agua. En caso de accidente
o malestar, acuda inmediatamente al médico. Deben evitarse las temperaturas
mayores a 25 ºC. Los recipientes abiertos liberan gases de amoníaco.
Elementos de protección personal.
 Bata de laboratorio.
 Gafas de seguridad con protección lateral.
 Guantes de caucho
CUESTIONARIO PARA RESOLVER EN GRUPO
1. ¿DURANTE CUANTO TIEMPO PUEDE DETECTARSE EN LA ORINA LA

MARIHUANA EN LOS CONSUMIDORES CRÓNICOS Y ESPORÁDICOS?
2. ¿LA INHALACIÓN PASIVA DE LA MARIHUANA (por ejemplo, al acudir a un

concierto de rock) ARROJA UN RESULTADO POSITIVO EN UNA PRUEBA DE
ORINA?
3. ¿EXISTE ALGO QUE ACELERE LA DEPURACIÓN DE LA MARIHUANA DEL

SISTEMA?
4. ¿QUÉ SUSTANCIAS PRODUCEN UN RESULTADO FALSOPOSITIVO EN LA

PRUEBA DE ORINA?
5. ¿QUÉ OCASIONA UN RESULTADO FALSONEGATIVO EN LA PRUEBA DE LA

ORINA?

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EXTRACCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE LOS PRINCIPIOS ACTIVOS DE

La marihuana (cannabis sativa) como problema de identificación con fines forenses

Existen diversos métodos para la caracterización de la planta o sus resinas, estos

El examen microscópico es el método más rápido y práctico para la identificación de

A pesar de que la identificación microscópica es suficiente para determinar que se

EXTRACCION DE LOS PRINCIPIOS ACTIVOS

Tomar una cantidad de la hierba y reducirla en un mortero hasta partícula fina,

Divida el filtrado en cuatro porciones en pequeños vasos de precipitado y realice los

ENSAYO DE DUQUENOIS Y NEGM: Evapore a sequedad sobre baño María el

CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA

Fase estacionaria: sílica-gel HF 254

Fase móvil: Benceno-Hexano-Di etilamina (25-10-2)

Tenga cuidado con:

 Cloroformo: esta sustancia es nociva por ingestión. Irrita la piel. Posibles

 Amoníaco (NH3): esta sustancia provoca quemaduras. En caso de contacto

CUESTIONARIO PARA RESOLVER EN GRUPO

1. ¿DURANTE CUANTO TIEMPO PUEDE DETECTARSE EN LA ORINA LA

2. ¿LA INHALACIÓN PASIVA DE LA MARIHUANA (por ejemplo, al acudir a un

3. ¿EXISTE ALGO QUE ACELERE LA DEPURACIÓN DE LA MARIHUANA DEL

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