PRÁCTICA N˚ 7

CREATININA
INTRODUCCIÓN

La creatinina es un compuesto nitrogenado que se encuentra contenida en gran

proporción en el músculo donde desempeña un papel importante en el fenómeno de la
contracción muscular.

Este compuesto nitrogenado se obtiene a partir de la degradación de las proteínas

interviniendo en su formación 3 aminoácidos GLICINA, ARGININA y METIONINA.
El paso inicial consiste en que al reaccionar la glicina con la arginina origina el
compuesto conocido con el nombre de GLICOCIAMINA, la que al unirse a la
metionina forma la CREATINA. La CREATINA no se elimina del organismo en su
estado sino como su anhídrido conocido con el nombre de CREATININA.
Solo en el hombre adulto la orina contiene CREATININA. En la mujer adulta en la
época del embarazo y de la lactancia y en el niño en ambos sexos, la orina contiene
creatina y CREATININA.

La cantidad de creatinina que se encuentra circulando en la sangre es independiente del

peso del individuo y de la masa muscular.
En la actualidad juntamente con la UREA, la CREATININA constituye uno de los
principales productos del catabolismo proteico; su determinación reviste gran
importancia para determinar la gravedad de la lesión renal.

LA creatinina se elimina muy fácilmente del organismo y su determinación tanto como

para el diagnóstico y el pronóstico de ciertas enfermedades tiene gran importancia,
encontrándose principalmente relacionada con el aumento de la urea el ácido úrico. Las
alteraciones más importantes de la creatinina se presentan en los siguientes casos:
1. Nefropatías cuando se alcanzan valores superiores a 5 mg% en pronóstico es
fatal a corto plazo esto solo se presenta cuando las enfermedades renales se
encuentran sumamente avanzadas.
2. En una nefritis aguda existe un aumento de la creatinina pero es fácilmente
reversible.
 3. En las enfermedades cardiacas avanzadas
4. En obstrucciones renales, alteraciones de la próstata o por presencia de cálculos
renales
5. En el Gigantismo y la acromegalia

Objetivos
- Aprender a realizar el dosaje de creatinina en suero y orina.
- Conocer el fundamento del método de dosaje de creatinina.
- Aprender a realizar los cálculos correspondientes para determinar la
concentración de creatinina, y la depuración de creatinina endógena.

Experimento

DETERMINACIÓN DE CREATININA

Fundamento del Método Colorimétrico: este método es empleado para la

determinación cuantitativa de creatinina verdadera en suero y orina
Este método se fundamenta en la reacción de Jaffé y consiste en que la creatinina
reacciona con el picrato alcalino en medio tamponado, previa desproteinización con
ácido pícrico, obteniéndose un complejo de color anaranjado – amarillo, el cual se
mide a 492nm.

En la modificación cinética, la formación del complejo picrato-creatinina es

monitoreada luego de 10 a 60 segundos de retardo tras la mezcla de los reactantes;
esto permite que los interferentes de reacción rápida como el acetato sean
eliminados en gran medida antes de efectuar la lectura inicial de absorbancia. Se
realizan mediciones adicionales durante o al final de un período de 16 a 120
segundos, antes de que se han completado la reacción de la creatinina que los
interferentes de reacción más lenta puedan reaccionar significativamente. No es
necesaria la desproteinización, dado que la reacción este el picrato alcalino y la
proteína es lenta y no se produce significativamente durante el intervalo habitual de
la reacción cinética.
 Se ha descrito que el uso de un blanco de suero a pH 9,25 elimina interferencias
causadas por proteínas y otros interferentes distintos de la creatinina. Se emplean
buffers de fosfato (136 a 173 mmol/l) para producir pH de reacción de 9,65 a 11,50;
por otra parte, las condiciones de reacción son comparables a la reacción manual de
Jaffé. El intervalo de reacción es de 45 minutos a una temperatura de 3ºC. En estas
condiciones de reacción los cromógenos seudocreatinínicos comúnmente hallados
se describen como no reactivos y la interferencia causada por la reacción de
proteínas a pH 9,65.

Procedimiento
Se trabaja con una muestra estándar (cuya concentración es de 1 mg/dl), con
una muestra de suero y otra de orina, de la siguiente manera:
Estándar Suero Orina
Acido Pícrico 250 µL 250 µL 250 µL
NaOH 250 µL 250 µL 250 µL
Estándar (1 mg/dL) 50 µL -- --
Suero - 50 µL --
Orina (1:50) -- -- 100 µL
Agitar y leer rápidamente a 500nm
Recomendación: se debe trabajar cada muestra una por una (es decir
terminar con una y empezar con la otra), en el momento de la mezcla de los
reactivos y de la lectura en el espectrofotómetro hacerlo rápidamente, pues de
no ser así podría haber variaciones en los resultados.

Expresión de resultados y cálculos:

Complete lo siguiente:

Muestra Absorbancia Absorbancia Concentración

bruta neta (mg/dL)
Blanco de reactivo 0.0083 ---- ---
Estándar 0,0647 0,0564 ---
Suero 0,0361 0,0278 0,98
 Orina 0,1398 0,1315 233,1
DATOS OBTENIDOS:
ABS BLANCO ESTANDAR SUERO ORINA
Abs a 30seg 0,3737 0,3850 0,4638 0,4919
Abs a 90 seg 0,3826 0,4497 0,4999 0,6317
Abs2 – Abs1 0,0083 0,0647 0,0361 0,1398

a) Calcular el factor de calibración:

[STD ] 2 mg/dl
FC = = =35,460
∆|neta| std 0,0564

b) Determinar la concentración de creatinina:

b.1) Creatinina en suero se expresa en mg/dl o mg/l:

[Creatinina] = Ab neta muestra x factor
[ creatinina ] =0,0278 x 35,460=0 , 98 mg/dl

b.2. Creatinina en orina se expresa en g / 24 horas:

[Creatinina orina g/24 horas] = Ab muestra x V x [St] x dilución
Ab St
= Ab muestra x V x Factor x dilución
= Cc. Creatinina x V x dilución

[ creatinina ] =0,1315 x 35,460=4,662 x 50 ( dilucion )= 233.1 mg

dl
233 ,1 mg 10 dl 1g
M 1: x x x 1 L=2,331 g /24 horas
dl 1 L 1000 mg
262 ,11mg 10 dl 1g
M 2: x x x 1 L=2 , 62 g /24 horas
dl 1 L 1000 mg

b.3.- Calculos para la determinación de la depuración de creatinina en

la practica.
 233 , 1 x 1000 ml
Clearance= =165,178 ml /min
0 , 98 x 1440

c) Cálculos para determinar la depuración de creatinina endógena: se

expresa en ml/min.
Ejemplo
DCE = Creatinina (orina) g/24 horas x (694)
Creatinina (suero) mg/l
DCE = 0.54 g/24 hrs x 694
10 mg/lt
DCE = 37.47 ml / min

c.1) Para hallar el factor 694:

Ejemplo
1000 mg
694 ml/min = (60 x 24) min
1 mg
1000 ml

Interpretación de los resultados:

Teniendo en cuenta los valores referenciales haga la interpretación de los
resultados obtenidos en la determinación de la creatinina
INTERPRETACION
 La concentración de creatinina en suero fue 0,98 ; se encontraría dentro
de los rangos normales para un varon y en el limite superior para mujer.
 En la muestra de orina , la creatinina se encunetra en proporciones
elevadas con 2,3 y 2,6; cuando el valor normal seria 0,9 – 1,5g/24hrs.
Valores Normales
a)En Suero: Hombres  0.7 – 1.1 mg / dl
Mujeres  0.6 – 0.9 mg / dl
b)En Orina: 0.9 – 1.5 g/24 hrs
c) Valores Normales de Creatinina Endógena en adultos hasta 60 años 
80 a 140 ml/min.
 El fotócolorimetrometro realiza dos lecturas: una a los 30 segundos y la otra a los
180 segundos, con estas lecturas realiza una curva característica:

[mg/dl]

Creatinina

30” 5’ Tiempo

Concentracion de creatinina en función del

tiempo
1200.00
concentracion de creatinina mg/dl

1000.00

800.00

600.00

400.00

200.00

0.00
20.00 40.00 60.00 80.00 100.00 120.00 140.00
tiempo (segundos)

Concentracion de orina a los 30 segundos: 1046mg/dl

Concentracion de orina 90 segundos después: 371 mg/dl

CUESTIONARIO

1.- ¿Cómo se interpreta los resultados de creatinina con respecto a la función

renal?

En general, los siguientes niveles de creatinina se consideran normales:

  Hombres: 0,6 a 1,2 mg/dL

 Mujeres: 0,5 a 1,1 mg/dL

Un nivel de creatinina superior a 1,3 mg/dL en hombres o 1,2 mg/dL en mujeres puede
indicar un problema renal.

Los niveles de creatinina también se pueden usar para calcular la tasa de filtración
glomerular (TFG), que es una medida de la función renal. Una TFG baja puede indicar
que los riñones no están funcionando correctamente.
En general, los siguientes niveles de TFG se consideran normales:

 Adultos mayores de 18 años: 90 a 120 ml/min/1,73 m²

 Adultos mayores de 70 años: 60 a 89 ml/min/1,73 m²

 Pacientes con enfermedad renal crónica: 15 a 59 ml/min/1,73 m²

Los resultados de creatinina deben interpretarse en conjunto con otros factores, como la
edad, el sexo y la historia médica del paciente.

2.- ¿Que métodos conoce para dosar creatinina e indique su fundamento?

Creatinina cinética AA : Método cinético para la determinación de creatinina en suero,

plasma u orina :

La creatinina reacciona con el picrato alcalino (reacción de Jaffe) produciendo un

cromógeno rojo. La velocidad de esta reacción, bajo condiciones controladas, es una
medida de la concentración de creatinina de la muestra puesto que se comporta como
una reacción cinética de primer orden para la creatinina. Por otra parte, se ha
demostrado que los cromógenos no-creatinina que interfieren en la mayor parte de las
técnicas convencionales, reaccionan dentro de los 30 segundos de iniciada la reacción.
De manera que entre los 30 segundos y los 5 minutos posteriores al inicio de la
reacción, el incremento de color se debe exclusivamente a la creatinina.

Métodos enzimáticos:

Son de mayor especificidad, exactitud y precisión.

Los métodos enzimáticos creatinina, permiten trabajar con muestras con.
concentraciones de bilirrubinas de hasta 25 mg/dL, resultando ser los métodos de
elección para medir creatinina en neonatología. Además, no poseen otras interferencias
tales como la hemoglobina fetal, proteínas, glucosa, acetoacetato y cefalosporinas. Son
un posible método de referencia aplicable a los laboratorios de rutina.

Existen diferentes métodos enzimáticos adaptables a auto analizadores:

Uno de los métodos más usados es la determinación de sarcosina mediante la hidrolisis

de la creatinina debido a la acción de la creatinasa, posteriormente por acción de la
sarcosina-oxidasa y en presencia de oxígeno, la sarcosina se oxida, generando glicina,
formaldehido y peróxido de hidrogeno

La reacción es catalizada por peroxidasa, la intensidad cromática es directamente

proporcional a la concentración de creatinina, el peróxido de hidrogeno liberado se mide
por una reacción de Trinder modificada, el peróxido de hidrogeno reacciona con la 4-
amino fenazona y el ácido 2,4,6-triiodo-3-hidroxi-benzoico (se agrega este aceptor más
eficiente del H2O2, para que no compita la bilirrubina), formando un cromógeno de
quinona resultando una cuantificación precisa y específica de la concentración de
creatinina.

3.- ¿Que método es el más apropiado para dosar creatinina en el trabajo rutinario
del laboratorio y por qué lo utilizaría?

El método enzimático el más apropiado, porque ofrece una mayor precisión y exactitud
para dosar creatinina presentando una menor interferencia en comparación de otros
métodos.

4.- ¿Qué es y para qué sirve la depuración de creatinina?

Una prueba de depuración de la creatinina mide lo bien que los riñones eliminan la
creatinina de la sangre. Y sirve para descartar algún síntoma que puede deberse a
enfermedades renales.

5.- ¿Cuáles son la condiciones y requisitos para tomar la muestra de sangre y orina
para determinar creatinina?

Para la muestra de sangre:

Preparación previa: En la mayoría de los casos, no es necesario estar en ayunas para una
prueba de creatinina en sangre. Sin embargo, debes seguir las instrucciones de tu
médico o del laboratorio en cuanto a la preparación específica para la prueba. Puede
haber ciertas restricciones en la dieta o en el consumo de agua, dependiendo de las
circunstancias individuales.
Información médica: Informa a tu médico o al personal del laboratorio sobre cualquier
medicamento que estés tomando, ya que algunos medicamentos pueden afectar los
niveles de creatinina en sangre.

Toma de muestra: La muestra de sangre se obtiene generalmente mediante una punción

en una vena del brazo. El proceso debe ser realizado por un profesional de la salud,
como un enfermero o un técnico de laboratorio. Se extrae una pequeña cantidad de
sangre en un tubo de ensayo.

Para la muestra de orina:

Preparación previa: En la mayoría de los casos, no se requiere ninguna preparación

especial antes de una prueba de creatinina en orina. Sin embargo, sigue las indicaciones
específicas de tu médico o del laboratorio.

Muestra de orina: La muestra de orina se recoge en un recipiente de recolección de

orina estéril. Debes asegurarte de que la muestra sea representativa y esté libre de
contaminación externa. Limpia bien la zona genital antes de recoger la muestra.

Horario: En algunos casos, se pueden requerir muestras de orina de 24 horas, lo que

significa que debes recolectar toda la orina durante un período de 24 horas. Esto se hace
para obtener una medición más precisa de la excreción de creatinina en el cuerpo.