Fagocitosis

miércoles, 9 de agosto de 2023 2:26 p. m.

Es llevada a cabo por células especializadas como macrófagos, neutrófilos y células dendrí<cas (DC).

El conjunto de pasos que implica este proceso inicia con:

1. El reconocimiento
2. La unión de los patógenos a los receptores genéricos
a. Lo que favorece la internalización y el procesamiento de la fuente an<génica.

Mediante este mecanismo se generan fragmentos pepIdicos que, presentados en el contexto molecular del
MHC 11, ac<van a los linfocitos T CD4+anIgeno específicos.
- Además, la fagocitosis es necesaria para la eliminación de cuerpos apoptó<cos, un aspecto esencial
de la homeostasis y la remodelación de los tejidos.

Debido a que parIculas de muy diferente naturaleza pueden ser fagocitadas, no es sorprendente que
numerosos <pos de receptores medien este proceso.

La fagocitosis forma parte de la primera línea de defensa contra una infección y juega un papel clave en la
iniciación de la respuesta inmunológica adapta<va, al promover la liberación de citocinas proinflamatorias
que favorecen la ac<vación linfocitaria.

FAGOCITOSIS MEDIADA POR RECEPTORES Y NO MEDIADA POR RECEPTORES

El reconocimiento y la eliminación de agentes infecciosos son las primeras funciones reconocidas de la

fagocitosis.

TIPOS DE RECEPTORES DE FAGOCITOSIS

Receptores de reconocimiento de patrones (PRR)

Las parIculas extrañas (tales como bacterias, hongos y parásitos) muestran muchas moléculas que no se
encuentran en organismos complejos, denominadas PAMP, los cuales son detectados por PRR y que
comprenden varios <pos de receptores, entre éstos los TLR y los SR ( receptor scavenger).

Receptores asociados a la internalizacion

Los an<cuerpos reconocen a los microorganismos iniciando la vía clásica de ac<vación del complemento, lo
que favorece la deposición de C3b y C4b sobre su superficie.

Los receptores de complemento principalmente implicados en el proceso de fagocitosis son:

- el CRl (por sus siglas en inglés Complement Receptor 1, o re- ceptor de complemento 1) o CD35
- el CR3 (integrina aM~2 o Mac-1)
- el CR4

La fracción Fc de los an<cuerpos que se unen a su anIgeno específico sobre la superficie del microorganismo
es reconocida por receptores en la membrana de los fagocitos como el FcyR (por sus siglas en inglés
FcyReceptor, o recep- tor Fe de los an<cuerpos IgG) con lo que se facilita el proceso de internalización.

Todas las moléculas que favorecen este proceso se denominan opsoninas.

Los receptores descritos con anterioridad pueden agruparse en tres categorías de acuerdo con su papel
durante la fagocitosis:
1. Median la fagocitosis.
○ los receptores scavenger y el receptor de manosa median la fagocitosis no opsónica.
FcyReceptor, o recep- tor Fe de los an<cuerpos IgG) con lo que se facilita el proceso de internalización.

Todas las moléculas que favorecen este proceso se denominan opsoninas.

Los receptores descritos con anterioridad pueden agruparse en tres categorías de acuerdo con su papel
durante la fagocitosis:
1. Median la fagocitosis.
○ los receptores scavenger y el receptor de manosa median la fagocitosis no opsónica.
§ Reconoce residuos de manosa en la superficie de los microorganismos e induce la
fagocitosis sin iniciar la ac<vación de las células fagocí<cas.
2. Inician la transducción de las señales inflamatorias.
○ se especializan en internalizar las señales de ac<vación inducidas por el reconocimiento
an<génico
§ Receptores de este tipo son los TLR
□ los cuales se expresan de manera estratégica en la membrana plasmá<ca
□ A lo largo de las fases de la fagocitosis monitorean la presencia de
microorganismos y sus componentes.
□ Estos receptores inician la respuesta inmunológica mediante la señalización
por medio de dos adaptadores:
® TRIF (del inglés TIR-domain -containing adapter- inducing IFN-{3, o
proteína adaptadora que con<ene un dominio TIR inductora de
IFN-~)
® la molécula adaptadora MyD88 (del inglés Myeloid DifferenCa- Con
Primary Response Gene 88),
® MAPK (del inglés Mitogen AcCvated Protein Kinase, o proteína cina-
sa acCvada por mitógenos), el IRF (del inglés Interferon Regulatory
Factor, o factor regulador de interferones)
® el NF-KB (del inglés Nuclear Factor KB, o factor nuclear KB).
□ Estos receptores son esenciales para la maduración del fagosoma y en la
ac<vación de las células fagocí<cas.
□ Aumentan la capacidad de procesamiento y de presentación de anIgenos
3. Realizan ambas funciones.
a. desencadena tanto la fagocitosis como la transducción de la señales de ac<vación.

Receptores de cuerpos apoptoticos

En los individuos sanos, gran can<dad de células muere cada día y sus cuerpos apoptó<cos deben ser
depurados por los fagocitos.

Las células apoptó<cas muestran en su superficie varias moléculas que las dis<nguen de las células sanas,
como:
- la fosfatidilserina (PS).
○ Este lípido está restringido a la capa interna de la membrana plasmá<ca en las células sanas
○ Pero durante la apoptosis aparece en la capa exterior y aumenta la cantidad de PS expuesta
a la superficie alrededor de 300 veces.

Este proceso implica un mecanismo complejo con varias interacciones ligando-receptor y señales.

1. En primer lugar, las células some<das a la apoptosis liberan diversas moléculas, tales como:
a. la ATP, la lisofosfatidilcolina, la fractalquina y la esfingosina 1-fosfato.
2. Estas moléculas solubles actúan como factores quimiotác<cos que reclutan fagocitos en el si<o de
muerte celular.
3. Múl<ples receptores fagocí<cos se unen a la PS.
a. La unión directa a la PS está mediada por receptores como TIM, BAI1y Estabilina-2

En otros casos, las moléculas solubles pueden unirse a la PS y a receptores de superficie sirviendo como
puente.
- MFG-E8 que conecta la PS a integrinas aVb3,
- Las moléculas como el Gas6 y la proteína S pueden ser puentes entre la PS y receptores fagocí<cos,
entre éstos los TAM (Tyro3, Axl, Mer).

Los derivados del metabolismo de la PS también pueden contribuir al reconocimiento de cuerpos apoptó<cos

MOLÉCULAS IMPLICADAS EN LA FAGOCITOSIS MEDlADA POR RECEPTORES

puente.
- MFG-E8 que conecta la PS a integrinas aVb3,
- Las moléculas como el Gas6 y la proteína S pueden ser puentes entre la PS y receptores fagocí<cos,
entre éstos los TAM (Tyro3, Axl, Mer).

Los derivados del metabolismo de la PS también pueden contribuir al reconocimiento de cuerpos apoptó<cos

MOLÉCULAS IMPLICADAS EN LA FAGOCITOSIS MEDlADA POR RECEPTORES

Los receptores fagocí<cos difieren no sólo en la naturaleza de los ligandos que reconocen sino también en las
señales que generan.
- En condiciones fisiológicas, varios <pos de receptores y múl<ples cascadas de señalización se ac<van
en forma concomitante.

Por lo tanto, el proceso de internalización del microorganismo puede dividirse conceptualmente en tres
pasos:
1. la unión del complejo microorganismoligando a los receptores
2. el agrupamiento de los receptores, que inducen una cascada de señalización
3. la internalización del microorganismo

Fagosoma: maduración y acidificación

1. Unión a los receptores y su posterior internalización

2. el microorganismo fagocitado es confinado en una gran vacuola intracelular
a. Delimitada por una sola bicapa de membrana
b. Denominada fagosoma naciente
c. su membrana deriva en gran parte de la membrana plasmá<ca y el ambiente luminal es
similar al del medio extracelular.
3. Después, por medio de una serie de interacciones de unión y par<ción secuencial de membranas con
otros compar<mientos intracelulares (que incluyen endosomas tempranos, endosomas tardíos y
lisosomas)
4. Se produce la maduración del fagosoma.
a. En esta instancia el fagosoma se denomina fagolisosoma
i. Adquiere su capacidad de procesar a los microorganismos.
ii. La maduración del fagosoma es mediada en parte por la familia de Rab GTPasas.
1) La ac<vidad de Rab5 es necesaria para la transición de un fagosoma
temprano a tardío.
2) Rab5 facilita la fusión del fagosoma naciente con los endosomas
tempranos mediante el reclutamiento de EEAl (del
inglés Early Endosome AnCgen 1, o anIgeno 1 del endosoma temprano
a) También recluta a la Pl3K, lo que, a su vez, genera fosfa<dilinositol
3-fosfato (Pl3P) en la parte citosólica de la membrana del fagosoma
temprano.
3) El Pl3P colabora con Rab5 en la retención de EEAl y promueve el
reclutamiento y la ac<vación subsiguiente de una serie de proteínas
implicadas en la maduración del fagosoma.
iii. A medida que el fagosoma madura
1) La expresión de Rab5 disminuye
2) Rab7 interviene en la fusión del fagosoma con endosomas tardíos y, en
úl<ma instancia, con los lisosomas.
3) La maduración también implica la acidificación del lumen del fagosoma a
pH 4.5-5.5.

MECANISMO DE DAÑO INDEPENDIENTE DE OXIGENO (ENZIMAS) Y DEPENDIENTE DE

OXIGENO (ESTALLIDO RESPIRATORIO) E INTERMEDIARIOS REACTIVOS DEL NITROGENO

Los microorganismos internalizados por las células fagocí<cas son confinados en una estructura denominada:
- fagolisosoma,
○ es un organelo microbicida que cuenta con varios mecanismos para eliminar y degradar los
microorganismos fagocitado

En los neutrofilos:

El fagolisosoma se conforma por la fusión de:

- El fagosoma que confina al microorganismo con los gránulos y los lisosomas.
○ Los gránulos primarios o azurófilos de los neutrófilos
 - fagolisosoma,
○ es un organelo microbicida que cuenta con varios mecanismos para eliminar y degradar los
microorganismos fagocitado

En los neutrofilos:

El fagolisosoma se conforma por la fusión de:

- El fagosoma que confina al microorganismo con los gránulos y los lisosomas.
○ Los gránulos primarios o azurófilos de los neutrófilos
§ Son un <po especializado de vesículas parecidas a los lisosomas.
§ Con<enen diversos componentes microbicidas, por ejemplo, pép<dos
an<microbianos y proteasas.
○ Los gránulos específicos o secundarios son
§ Otro <po de vesículas internas del neutrófilo
§ Contienen componentes de la enzima NADPH oxidasa.
○ Además, lo mismo que en otras células, los lisosomas del neutrófilo <enen diversas enzimas
diges<vas.
- Por lo tanto, la acción combinada de los componentes de los gránulos y los lisosomas es muy efec<va
para destruir los microorganismos internalizados.

En los macrofagos:

No <enen componentes microbicidas preformados en gránulos

Sin embargo, cuando son estimulados por la presencia de IFN-y y el reconocimiento de componentes
microbianos pueden:
- producir mediadores tóxicos
- capaces de eliminar los microbios internalizados presentes en el fagosoma

Acidificación del fagosoma

El fagosoma sufre una acidificación progresiva durante su maduración.

Este proceso lo efectúan:

1. Una ATPasa compuesta por un dominio que hidroliza ATP
2. Mas dominio responsable del transporte de protones hacia el interior del fagosoma.

La acidificación del fagosoma crea:

- un ambiente adverso para la supervivencia del microorganismo
○ ya que no sólo perjudica de manera directa el meabolismo de algunas bacterias
○ sino que también favorece la ac<vidad de muchas enzimas hidrolí<cas del fagocito que
<enen pH óp<mos ácidos.

Generación de especies reactivas de oxigeno y especies reactivas de nitrógeno

Los fagocitos profesionales son capaces de generar compuestos altamente oxidantes denominados:
- ROS (del inglés ReacCve Oxygen Species, o especies reac<vas de oxígeno)
- RNS (del inglés Reac<ve Nitrogen Species, o espe- cies reac<vas de nitrógeno)

Los primeros son producidos :

- EN el fagolisosoma
- POR la enzima NADPH oxidasa

Pueden entonces matar a los microorganismos internalizados.

Los intermediarios reac<vos derivados del nitrógeno son producidos:

- EN el citoplasma
- POR la enzima iNOS (del inglés inducible Nitric Oxide Synthase, u óxido nítrico sintasa inducible)
- Se difunden en el interior del fagosoma para reaccionar con el microorganismo.

La NADPH oxidasa se expresa en :

- fagocitos polimorfonucleares
- fagocitos mononucleares

Aunque la can<dad de ROS que se produce es mayor en neutrófilos que en macrófagos, y por lo general los
macrófagos producen considerablemente más RNS que los neutrófilos.
 - Se difunden en el interior del fagosoma para reaccionar con el microorganismo.

La NADPH oxidasa se expresa en :

- fagocitos polimorfonucleares
- fagocitos mononucleares

Aunque la can<dad de ROS que se produce es mayor en neutrófilos que en macrófagos, y por lo general los
macrófagos producen considerablemente más RNS que los neutrófilos.
Estructura de la NADPH

- La oxidasa fagocí<ca es un complejo proteínico formado por múl<ples subunidades.

○ Las subunidades p22phox y gp91phox (esta úl<ma conocida como NOX2) forman una
proteína heterodimérica de membrana denominada citocromo b558.
- Preexiste en el neutróllo
- Es ac<vada mediante las señales de los receptores fagocí<cos
- Está cons<tuida por componentes presentes tanto :
○ En la membrana de gránulos secundario
○ En el citoplasma.

En ausencia de la ac,vación celular

- los componentes citosólicos de la NADPH oxidasa (p40phox, p47phox y p67phox) no están asociados
con el citocromo b
- la oxidasa permanece inactiva.

Tras la ac,vación celular

1. Los componentes citosólicos se traslocan a la membrana
2. se asocian con el citocromo b para formar la NADPH oxidasa funcional.

Este es un proceso muy regulado que implica uno o más cofactores; en los fagocitos humanos el cofactor
predominante es Rac2.

Una vez que la enzima se ensambla:

- los gránulos secundarios se fusionan con el fagosoma para generar allí la producción de ROS
necesaria para la eliminación del microorganismo (véa- se Figura 7-2A).

Formación de ROS

1. La NADPH oxidasa ac<va transfiere electrones desde el NADPH citoplasmá<co a través de la

membrana al oxígeno molecular.
2. El oxígeno se somete entonces a una reducción de un electrón
a. Que conduce a la formación de anión superóxido (02 -) que dismuta de modo espontáneo a
peróxido de hidrógeno (H2 O2) o por acción de la superóxido dismutasa (SOD).
b. Además, 02- y H2O2 pueden dar lugar a la formación de metabolitos más reac<vos, como el
radical hidroxilo (OH·) o el ácido hipocloroso (HOCl).
c. Los radicales OH· son generados a par<r de la reacción de O 2- y H2 O2
d. Mientras que para la formación de HOCl y otros halogenuros se requiere la mieloperoxidasa
(MPO), una enzima localizada en gránulos azuróllos de los neutróllos.
e. En forma colec<va, estos metabolitos son muy tóxicos y capaces de destruir con eficacia los
microorganismos dentro del fagosoma (véase Figura 7-2B).

La importancia de las ROS en la eliminación de microorganismos se pone de manifiesto en la enfermedad

granulomatosa crónica, que se caracteriza por infecciones recurrentes que llegan a causar la muerte. Estos
pacientes presentan mutaciones en alguna de las subunidades de la NADPH oxidasa.

Proteina y peptidos antimicrobianos

Los fagocitos presentan una amplia gama de proteínas y pép<dos que:

- antagonizan a los microorganismos dentro del fagosoma
- complementan las herramientas antimicrobianas del fagosoma descritas con anterioridad.

Hay tres tipos principales de antimicrobianos:

Proteina y peptidos antimicrobianos

Los fagocitos presentan una amplia gama de proteínas y pép<dos que:

- antagonizan a los microorganismos dentro del fagosoma
- complementan las herramientas antimicrobianas del fagosoma descritas con anterioridad.

Hay tres tipos principales de antimicrobianos:

1. Pép<dos ca<ónicos
a. se unen a la membrana microbiana y comprometen la integridad del microorganismo
2. enzimas proteolí<cas
a. que causan la destrucción del microorganismo,
3. proteínas que privan a los microorganismos de nutrientes esenciales
a. con lo que impiden el crecimiento del microorganismo.

Los neutrófilos están par<cularmente bien equipados, ya que en sus gránulos poseen diversas proteínas y
pép<dos que pueden tener funciones bactericidas y de degradación; algunas de estas funciones también las
<enen los macrófagos.

PRESENTACIÓN ANTIGÉNICA EN EL CONTEXTO MOLECULAR DE MHC TIPO II