Universidad San Francisco de Quito

Laboratorio de Biología General

Reporte No. 4

Aplicación de la microscopía

Nombres y Apellidos: Lorien Beltrán Mejía Profesora: Ma. Isabela Ojeda García

Código: 00335068 Sección: jueves 1 pm

Fecha: 7 de marzo del 2024

Objetivo

Objetivo General: Aprender a usar el microscopio correctamente en cuanto a iluminación,

enfoque, montaje en portaobjetos y tinción para resaltar las estructuras celulares y de esta

manera reconocer las diferencias y similitudes entre células de organismos vegetales y

animales.

Objetivo 1: Reconocer las estructuras de 3 células vegetales de diferentes especies, mediante

las diferentes tinciones de azul de metileno, Lugol y agua destilada.

Objetivo 2: Identificar las estructuras de las células animales mediante suero fisiológico en

la sangre y safranina en el epitelio bucal.

Pregunta 1: Dibuje las células vegetales (cebolla), estomas (suculenta), cloroplastos

(elodea), en 40x y rotule 4 estructuras observadas.

40x

Pared celular

Membrana

Citoplasma
Nucléolo

400x

Dibujo 1. Observación montaje húmedo de cebolla con con Lugol en 40x.

40x

Cloroplastos

Citoplasma

Membrana celular

Vacuola

400x

Dibujo 2. Observación montaje húmedo de Elodea densa en 40x.

 40x

Núcleo
Citoplasma

Ostiolo
Células oclusivas

400x

Dibujo 3. Observación de montaje húmedo de planta suculenta en 40x.

Pregunta 2: En base a las células animales:

 Dibuje las células epiteliales en 40x.

40x

Citoplasma

Membrana
celular

Núcleo

400x

Dibujo 4. Observación de células epiteliales humanas preparadas en 40x

  Dibuje 5 células sanguíneas en 100x en un solo campo óptico.

100x

Linfocito
Neutrófilos

Eritrocitos

Plaquetas Eosinófilo

1000x

Dibujo 6. Observación de placa preparada de sangre con tinción de Wright en 100x

Pregunta 3. Investigue y explique por qué se usan diferentes tinciones celulares (azul de

metileno, Lugol, safranina, Wright, suero fisiológico)

Existen distintos tipos de tinciones, como lo son las simples, diferenciales o específicas. Al

hablar de la tinción de Gram se puede clasificar a esta como básica en la valoración inicial de

muestras para análisis bacteriológico. En primer lugar, la tinción Wright es una técnica

utilizada para la diferenciación de elementos celulares de la sangre, se clasifica como una

tinción policromática, ya que puede teñir compuestos ácidos o básicos presentes en una

célula. Este reactivo está compuesto por eosina y azul de metileno. La eosina es un colorante

ácido y es la más utilizada en componentes rutinarios, su tonalidad varía dependiendo de en

qué se tiñe, por ejemplo, en el caso de los núcleos celulares, es mayoritariamente morado, por

la interacción molecular entre eosina y un complejo de azul de metileno-DNA. Las distintas

coloraciones observadas en la célula provocan el efecto Romanowsky; el cual se encarga de

teñir de púrpura a los núcleos. (Jácome et al., 2014))

Por otro lado, el azul de metileno es el cloruro de tetrametiltionina, un colorante básico

derivado de la fenocitina que forma parte en la tinción de Wright, un tipo de tinción

Romanowsky. Se encarga de teñir los filamentos para una mejor observación de estos. El

Lugol es una disolución compuesta por yodo molecular I y yoduro potásico KI en agua

destilada y es de coloración rojiza; su obtención sirve como ejemplo de solubilidad de una

sustancia en agua según su enlace químico. Entre sus funciones está reconocer la presencia de

granos de almidón en los tejidos vegetales debido a que absorbe el yodo produciendo una

coloración azul intensa, la cual desaparece al calentarse y reaparece al enfriarse; sirve para

reconocer alimentos antioxidantes, por ejemplo, en el caso del ajo decolora el reactivo de

Lugol. (Pinto, et al., 2012)

Al hablar de safranina, se puede explicar a la safranina O como un colorante de tejidos

biológico y sirve como herramienta para detectar las estructuras en células eucariontes y

procariontes. Este colorante O es conocido como de contraste ya que se usa en la

diferenciación de una estructura celular previamente teñida con otro colorante; por ejemplo,

es usada en el método de tinción de Gram para la bacteriología. Mediante la tinción de Gram

se permite la rápida diferenciación de bacterias positivas y negativas; con la estructura de la

mureína, las paredes de las bacterias serán la base de la afinidad de color, y por eso las

bacterias se teñirán como una solución de cristal violeta de Gram. En el caso de las bacterias

Gram positivas aparecerá azul violeta; en las negativas hay decoloración, por lo que se

teñirán con safranina, ya que es una molécula cargada positivamente de cationes, y se

obtendrá un color de rosa a rojo. (Sánchez, 2012)

Por último, el suero fisiológico o solución salina es una solución acuosa de sales de cloruro

de sodio; tiene un amplio uso en la medicina, desde aplicaciones clínicas hasta laboratorios

médicos. Es fundamental al emplear una muestra de sangre, ya que, al usarse como diluyente,

ajusta la concentración de una muestra a un nivel apropiado para de esta manera obtener

resultados precisos. (Meléndez et al., 2020)

En base a la información brindada, se puede concluir que cada tinción cumple una función

específica, por eso al realizar los experimentos en laboratorio, tanto las células vegetales

como animales participaron con diferentes tinciones.

Pregunta 4. Explique cuál es la función de los estomas.

Los estomas sirven como un poro para intercambio gaseoso; estos poros se encuentran en la

superficie de las plantas, principalmente en las hojas y en menor medida en tallos y otros

órganos. Tienen dos funciones principales: permitir el intercambio gaseoso al dar la entrada

al CO2, el cual se utiliza como combustible para llevar a cabo el proceso de fotosíntesis; las

células guardia se encargan de este proceso al expandir o contraer los estomas donde se

genera O2 y posteriormente liberarlo a la atmósfera. La segunda función es regular el

movimiento del agua a través de la transpiración, promoviendo la absorción del agua por las

raíces para el proceso de fotosíntesis, ya que la planta necesita seis moléculas de agua y seis

moléculas de CO2 para generar glucosa y O2. Por esta razón los estomas son vitales en el

proceso fotosintético de las plantas. (Martínez et al., 2004)

Conclusión 1: En conclusión, se reconoció las estructuras de las 3 células vegetales mediante

las diferentes tinciones de azul de metileno, Lugol y agua destilada.

Conclusión 2: En conclusión, se identificó las estructuras de las células animales mediante el

uso de suero fisiológico en las células sanguíneas y safranina en la mucosa oral.

 Referencias

Jácome, L. E. L, Durán, H. M, Castro, C. A. C., Peña, S. O, González, C. G y Cendejas, F. R.

(2014). Las tinciones básicas en el laboratorio de microbiología. Artículo de revisión, 3
(1), 10-18. https://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf

Martinez, P. J, Arizaleta, M, Sanabria, E. M., y Brito, L. (2004). Características de los

estomas, densidad e índice estomático y su variación en función a la injertación.
Bioagro,16 (3), 213-218. https://www.redalyc.org/pdf/857/85716309.pdf

Meléndez, G., Cuevas, E. B, Cruz, C. E. M., Sánchez, O. M. (2020). Las tinciones básicas en
el Laboratorio de Microbiología: Un enfoque gráfico. Universidad Nacional Autónoma de
México, 66 (2), 1-4.
https://www.zaragoza.unam.mx/wp-content/Portal2015/publicaciones/libros/cbiologicas/
libros/Tinciones.pdf

Pinto, G., Sánchez, M. T. M., Sánchez, M. M. (2013). Reactivo de Lugol: Historia de su

descubrimiento y aplicaciones didáctica. Universidad Nacional Autónoma de México, 24
(1), 31-36. https://www.scielo.org.mx/pdf/eq/v24n1/v24n1a6.pdf

Sánchez, A. H. I. (2012). Colorante safranina O. Revista Mediagraphic, 1 (2), 83-85.

https://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2012/ir122f.pdf