Micologia S1-S2

Primera unidad
Guía de Laboratorio: Micología
Semana 1: Sesión 1
Observación de colonias fúngicas y preparaciones
microscópicas
___________________________________________________
Sección: ………….....… Apellidos y nombres:
...................................................…...............…………… Docente:
.......................................................................................... Fecha: ....... / ....... / 2022
Duración: 60 min. Tipo de práctica: Individual ( ) Equipo (×)
_________________________________________________________________
INTEGRANTES:
● ALVARADO HUAMAN, NAYELI S.

● QUISPE PAREDES CECILIA NIKOL
● .TUMBA SALAZAR STEFANIA
● ROJAS FIGUEROA, KELLY IVONNE
● MEDRANO CASTRO JHERALDINNE
● INGA CASTRO FANNY
Instrucciones: Tener a la mano los materiales solicitados en forma

individual y tener mucho cuidado con la manipulación de los
simuladores. Usar en todo momento del guardapolvo, mascarilla,
guantes y cofia.
I. Propósito
Inspeccionar la morfología y estructura de los hongos sobre láminas
patrón y medios de cultivo.
II. Fundamento teórico

En el área de Microbiología los hongos son observados de dos
maneras, bajo el microscopio (microscopía) y como una colonia sobre
una placa de agar (macroscopía). Indicado en la PPT de la semana.
Universidad Continental
Figura 1. Características macroscópicas de las colonias

extendida
Forma
Circular
Elevada y limitada Desflecado Violeta
Superficie
Plegada
Convexa
umbilicada Amarillo
Irregular
Margen o borde
Liso o entero
Sectorizada
Filamentosa Marrón
Cerebriformes
Rizoidal
Ondulado
Con surcos Pigmento Anverso

radiales Rojo
Elevación Plana y Lobado
Fuente: Extraído de https://m.exam-10.com/biolog/23362/index.html?page=7
III. Equipos, materiales y reactivos
3.1. Prendas y accesorios
Ítem Prendas Característica Cantidad
1 Guardapolvo Mandil de drill 1
2 Guantes Quirúrgicos 1
3 Mascarillas N.95 1
4 Lentes protectores Visores 1
3.2. Materiales
Cultivos en placas de
Placas descartables Varios
2 Láminas montadas con
Láminas de vidrio Varios

IV. Indicaciones/instrucciones
• Mantener las normas básicas de bioseguridad.
V. Procedimientos
• Realizar el estudio macroscópico y microscópico con objetivos de 10x,

20x y 40x de aumento, localizando y diferenciando las principales
estructuras fúngicas.
VI. Resultados
• Lamentablemente esta semana no pudimos observar hongos

microscópicos.
VII. Conclusiones
● Los hongos son células eucariotas debido a que presentan carioteca y
núcleo definido. Estos pueden ser unicelulares y pluricelulares, son
heterótrofos y aeróbicos.
● Los hongos tienen dos tipos de reproducción puede ser: sexual y

asexual. La reproducción sexual se da mediante la esporulación,
gemación o fragmentación de hifas. Mientras que la reproducción
sexual inicia de una célula haploide convirtiéndose en célula diploide.
VIII. Sugerencias y /o recomendaciones

Semana 2: Sesión 1
Preparación de reactivos, colorantes y
medios de cultivo
_________________________________________________________________
Instrucciones: Tener a la mano los materiales solicitados en forma

individual y tener mucho cuidado con la manipulación de los
simuladores. Usar en todo momento del guardapolvo, mascarilla,
guantes y cofia.
I. Propósito
• Adiestrar en la preparación de los diferentes medios de cultivo
utilizados en micología.
• Aprender los procedimientos de preparación de colorantes y reactivos

usados en micología.
II. Fundamento Teórico

• El estudiante debe de revisar el siguiente enlace: https://www.
ugr.es/~cjl/medios%20de%20cultivo.pdf
III. Equipos, materiales y reactivos
3.1. Prendas y Accesorios
Ítem Prendas Característica Cantidad 1 Guardapolvo Mandil de drill

1
2 Guantes Quirúrgicos 1
3 Mascarillas N.95 1
4 Lentes protectores Visores 1
Universidad Continental
3.2. Materiales
Ítem Material Característica Cantidad 1 Tubos con tapa rosca

Vidrio 1 2 Probeta Vidrio 1 3 Matraz Vidrio 1 4 Beaker Vidrio 1 5
Papel filtro Circular 1 6 Rejilla de asbesto Metal 1 7 Trípode Metal
1
3.3. Equipos
Ítem Equipos Característica Cantidad 1 Mechero de bunsen Metal

1 2 Autoclave Metal 1
3.4. Insumos
Ítem Insumos Característica Cantidad 1 Peptona Proteína 10g 2

Glucosa Carbohidrato 400 ml 3 Agar micosel o agar
micobiotic Medio Selectivo 36 g
4 Avena Proteína 40 g 5 Papa Carbohidrato 20 g 6 Granos de
arroz blanco
no enriquecido Carbohidrato 8 g
7 Harina de maíz Carbohidrato 40 g 8 Arroz no fortificado
Carbohidrato 200g 9 Agua destilada Diluyente 1000 ml
10 Glicerina 400 ml 11 Fenol Antiséptico 20 g 12 Azul de
metileno Colorante 2 g 13 Azul de algodón o sol.
Acuosa 1 % Colorante 2 g
14 Hidróxido de potasio Aclarante 20 g 15 Tween 80° Inhibidor
50 ml.
IV. Indicaciones/instrucciones
• Mantener las normas básicas de bioseguridad.
V. Procedimientos
Medios de cultivo
1. Recuperar hongos que se encuentren en muestras contaminadas con

bacterias u hongos ambientales.
2. Con una probeta llenar 200 ml de agua destilada en un matraz,

agregarle 36 gramos del agar y completar con 800 ml de agua
destilada; hervir hasta disolver el medio completamente. Ajustar el
pH a 6.5 ± 0.2 y dispensar porciones en placas Petri de 20 ml o en
tubos tapa rosca, esterilizar en una autoclave durante 15 minutos a
121 ºC. o 1.5 atmósferas, después inclinar los tubos hasta que el
agar se solidifique.
Agar papa dextrosa
3. Medio que estimula la formación de conidios como T. rubrum, M.

audouinii, M. canis. También utilizado en la realización de micro
cultivos o cepario.
4. Lavar, pelar y cortar la papa en trozos pequeños, agregar agua y
autoclavar. Colar con gasa estéril, agregar el agar y la glucosa,
hervir hasta disolver. Llevar el volumen a 1000 ml con agua des tilada
si fuera necesario. Dispensar en tubos tapa rosca limpios. Esterilizar
en autoclave e inclinar los tubos hasta que el agar se solidifique.
Agar harina de maíz - Tween 80 (agar morfología)
5. Para la identificación de la morfológica de levaduras.
6. Mezclar la harina de maíz con el agua y calentar por 1 h a 65 ºC,

filtrar a través de gasa estéril y luego con papel de filtro Whatman n.º 2.
Adicionar el agar, hervir. Enrazar a 1000 ml con agua destilada,
adicionar el tween 80 y homogenizar. Esterilizar en autoclave.
Dispensar en placas petri estériles.
7. Deshacer el fenol previamente a 60 ºC en baño maría y mezclar con

el ácido láctico, glicerina y el agua, luego agregar el azul de algodón
(azul de Poirrier y azul de anilina son análogos al azul de algodón).
Hidróxido de potasio 20 %
8. Aclarante utilizado en la detección de estructuras fúngicas en

muestras por examen microscópico. Su concentración varía entre el
10 y 40 %.
9. Los cristales de KOH se añaden lentamente en agitación hasta su

completa disolución.
PROCEDIMIENTO REALIZADO EN CLASES
AGAR SABOURAUD
.
KOH
● El hidróxido de potasio es el medio de montaje más usado

universalmente.
● El KOH disuelve rápidamente los elementos celulares. Para
observar los hongos protegidos por su pared celular .
● El efecto clarificador del KOH puede demorar desde 10 min hasta
10 horas. En el caso de las muestras de uñas se puede reducir
calentando ligeramente la preparación.
● Se suelen utilizar dos concentraciones una de 10% y otra de 20%.
● La concentración de 10% se utiliza más para zonas que no
contengan tanta quiteña como la piel.
● La concentración de 20% se utiliza frecuentemente para las uñas
por contener quitina intensa.
CHROM CANDIDA
● El CHROM CANDIDA es para el rápido aislamiento e identificación
de especies de candida
● La mezcla cromogénica, ayudará en la coloración de los diferentes
compuestos producidos por la degradación con las enzimas
específicas.
● El CHROM CANDIDA no requiere esterilización por autoclave.
● Las placas deben de ser almacenadas en 4°C hasta su uso.
VI. Resultados
● En el resultado del KOH, aún no pudimos observar
hongos.
● En CHROM CANDIDA, no se pudo observar el
crecimiento.
VII. Conclusiones
● En conclusión, La fórmula del KOH en una concentración
de 10%, nos sirve para zonas que no llevan tanta quitina
como por ejemplo, la piel, podemos observar al
microscopio estructuras fúngicas y determinar qué tipo de
hifas son.
● La fórmula del KOH en una concentración de 20%, nos
sirve para zonas con quitina abundante, como por ejemplo,
las uñas y podamos observar estructuras micóticas y
determinar qué tipo de hifas son.
VIII. Sugerencias y /o recomendaciones

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Guía de Laboratorio: Micología

● ALVARADO HUAMAN, NAYELI S.

Instrucciones: Tener a la mano los materiales solicitados en forma

II. Fundamento teórico

Figura 1. Características macroscópicas de las colonias

Con surcos Pigmento Anverso

Fuente: Extraído de https://m.exam-10.com/biolog/23362/index.html?page=7

III. Equipos, materiales y reactivos

3.1. Prendas y accesorios

Ítem Prendas Característica Cantidad

1 Guardapolvo Mandil de drill 1

4 Lentes protectores Visores 1

Placas descartables Varios

2 Láminas montadas con

Láminas de vidrio Varios

• Mantener las normas básicas de bioseguridad.

• Realizar el estudio macroscópico y microscópico con objetivos de 10x,

• Lamentablemente esta semana no pudimos observar hongos

● Los hongos tienen dos tipos de reproducción puede ser: sexual y

VIII. Sugerencias y /o recomendaciones

Instrucciones: Tener a la mano los materiales solicitados en forma

• Aprender los procedimientos de preparación de colorantes y reactivos

II. Fundamento Teórico

III. Equipos, materiales y reactivos

3.1. Prendas y Accesorios

Ítem Prendas Característica Cantidad 1 Guardapolvo Mandil de drill

Ítem Material Característica Cantidad 1 Tubos con tapa rosca

Ítem Equipos Característica Cantidad 1 Mechero de bunsen Metal

Ítem Insumos Característica Cantidad 1 Peptona Proteína 10g 2

1. Recuperar hongos que se encuentren en muestras contaminadas con

2. Con una probeta llenar 200 ml de agua destilada en un matraz,

Agar papa dextrosa

3. Medio que estimula la formación de conidios como T. rubrum, M.

Agar harina de maíz - Tween 80 (agar morfología)

5. Para la identificación de la morfológica de levaduras.

6. Mezclar la harina de maíz con el agua y calentar por 1 h a 65 ºC,

7. Deshacer el fenol previamente a 60 ºC en baño maría y mezclar con

8. Aclarante utilizado en la detección de estructuras fúngicas en

9. Los cristales de KOH se añaden lentamente en agitación hasta su

PROCEDIMIENTO REALIZADO EN CLASES

● El hidróxido de potasio es el medio de montaje más usado

VIII. Sugerencias y /o recomendaciones

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