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    Reporte 1 Análisis Intrumental

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    Katya Buenrostro
    La práctica consistió en una introducción al funcionamiento y uso de diversos equipos de análisis instrumental en el laboratorio, como espectrómetros UV-Vis, FTIR y espectrofotómetros. Se definieron conceptos como absorbancia y transmitancia. Se observaron equipos como polarímetros, espectrómetros y espectrofotómetros de diferentes marcas. También se revisaron instrumentos como cromatógrafos de gas, cámaras cromatográficas y de electroforesis. Los estudiantes aprendieron acerca de las funciones y caracter

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    Reporte 1 Análisis Intrumental

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    La práctica consistió en una introducción al funcionamiento y uso de diversos equipos de análisis instrumental en el laboratorio, como espectrómetros UV-Vis, FTIR y espectrofotómetros. Se definieron conceptos como absorbancia y transmitancia. Se observaron equipos como polarímetros, espectrómetros y espectrofotómetros de diferentes marcas. También se revisaron instrumentos como cromatógrafos de gas, cámaras cromatográficas y de electroforesis. Los estudiantes aprendieron acerca de las funciones y caracter

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    REPORTE 1 ANÁLISIS INTRUMENTAL

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    La práctica consistió en una introducción al funcionamiento y uso de diversos equipos de análisis instrumental en el laboratorio, como espectrómetros UV-Vis, FTIR y espectrofotómetros. Se definieron conceptos como absorbancia y transmitancia. Se observaron equipos como polarímetros, espectrómetros y espectrofotómetros de diferentes marcas. También se revisaron instrumentos como cromatógrafos de gas, cámaras cromatográficas y de electroforesis. Los estudiantes aprendieron acerca de las funciones y caracter

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    Reporte 1 Análisis Intrumental

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    La práctica consistió en una introducción al funcionamiento y uso de diversos equipos de análisis instrumental en el laboratorio, como espectrómetros UV-Vis, FTIR y espectrofotómetros. Se definieron conceptos como absorbancia y transmitancia. Se observaron equipos como polarímetros, espectrómetros y espectrofotómetros de diferentes marcas. También se revisaron instrumentos como cromatógrafos de gas, cámaras cromatográficas y de electroforesis. Los estudiantes aprendieron acerca de las funciones y caracter

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    TECNOLÓGICO NACIONAL DE MÉXICO CAMPUS MORELIA

    DIVISIÓN DE ESTUDIOS PROFESIONALES


    INGENIERÍA BIOQUÍMICA
    4TO SEMESTRE

    REPORTE LABORATORIO
    ANÁLISIS INSTRUMENTAL

    PRÁCTICA 1
    “Espectroscopia óptica molecular: Introducción a la
    Instrumentación UV-Vis y FTIR”

    Fecha de realización: 3 de marzo del 2023

    PRESENTA:

    TELLO BUENROSTRO KATYA


    VARGAS GUZMÁN ANA PAOLA
    GARCÍA MALDONADO EDUARDO DANIEL

    PROFESOR:

    BEDOLLA CAZARES FERNANDO

    MORELIA, MICHOACÁN 10 de marzo del 2023


    RESUMEN
    Una de las tareas más importantes de la Química orgánica es la identificación y
    caracterización de los compuestos químicos, para esto se han desarrollado métodos
    y tecnologías instrumentales que permiten tanto determinar de manera cuantitativa
    como estructural a las moléculas orgánicas y su función química. En la presente
    práctica, tuvimos una plática introductoria impartida por el docente acerca del
    funcionamiento y uso de los diversos equipos del laboratorio de análisis instrumental.

    Comenzamos la práctica retomando algunas definiciones generales, importantes para


    comprender el funcionamiento de los instrumentos del laboratorio. El primer término
    fue el de absorbancia que básicamente es la cantidad de luz que absorbe la muestra
    y el de transmitancia que es la cantidad de energía que atraviesa un cuerpo en la
    unidad de tiempo. Existe una correlación importante entre estos dos conceptos que
    es que entre mayor absorbancia concentración alta y una transmitancia baja. A partir
    de ahí comenzamos a conocer cada uno de los equipos del laboratorio.

    El primer equipo en ser observado fue un Polarímetro Polax este se usa para medir
    la concentración de sustancias ópticamente activas, un ejemplo podría ser el azúcar
    en soluciones.

    Después observamos tres espectrómetros, el primero fue el espectrómetro Bausch


    and Lomb Spectronic 20 5309SH, un equipo algo “viejito” en comparación con el
    segundo, este espectrómetro tenía la particularidad de que las longitudes de onda no
    podian ser tan especificas ya que las perillas no permite poner decimales exactos. El
    segundo fue el espectrómetro UV VIS, Perkin Elmer Lambda 2S y el tercero el
    espectrómetro, Perkin Elmer Spectrum 100 FT-IR el cual tiene la característica de que
    debe estar aislado en un cuarto especial a una temperatura específica, así como
    estrictas condiciones de humedad. Estos equipos poseen diferencias entre sí, sin
    embargo, cumplen la función de producir líneas espectrales y medir sus longitudes de
    onda e intensidades.

    2
    Posteriormente observamos tres espectrofotómetros, el primero fue el
    espectrofotómetro UV-Vis,VELAB,VE-5100UV, el segundo el espectrofotómetro
    Beckman DU 7400 y el tercero fue el espectrofotómetro FTIR-UATR, este último
    también tiene como característica especial estar aislado a una temperatura y
    humedad controlada para su correcto funcionamiento. Todos estos, pese a ser
    distintos, tienen la función de medir la cantidad de intensidad de luz absorbida
    después de pasar a través de una solución muestra.

    En la siguiente instancia observamos la cámara cromatográfica que es un dispositivo


    que permite que zonas del papel o capa fina ya desarrolladas, sean barridas con luz
    de una longitud de onda determinada, para medir su absorción de luz UV, visible, o
    su fluorescencia, lo que proporciona unos valores que sirven para cuantificar los
    compuestos separados.

    Por último observamos una cámara de electroforesis horizontal que es un dispositivo


    que permite la generación de un campo eléctrico alrededor de un gel donde se
    depositan las muestras.

    Fueron diversos instrumentos que observamos en el laboratorio cada uno con


    diferentes funciones y características que serán de utilidad para el desarrollo de las
    prácticas de esta materia.

    3
    CUESTIONARIO
    1. ¿A qué se denomina transmitancia (T) de una solución?

    La transmitancia (T) de una sustancia en solución es la relación entre la cantidad de


    luz transmitida que llega al detector una vez que ha atravesado la muestra, It, y la
    cantidad de luz que incidió sobre ella, Io, y se representa normalmente en tanto por
    ciento: % T = It/Io x 100. La transmitancia nos da una medida física de la relación de
    intensidad incidente y transmitida al pasar por la muestra. La relación entre T y la
    concentración no es lineal, pero asume una relación logarítmica inversa.

    2. ¿A qué se denomina absorbancia de una solución?

    La absorbancia (A) indica la cantidad de luz absorbida, y se define como el logaritmo


    de 1/T, en consecuencia: A = log 1/T = -log T = -log It/ Io.

    Cuando la intensidad incidente y transmitida son iguales (Io = It), la transmitancia es


    del 100% e indica que la muestra no absorbe a una determinada longitud de onda, y
    entonces A vale log 1 = 0. La cantidad de luz absorbida dependerá de la distancia que
    atraviesa la luz a través de la solución del cromóforo y de la concentración de éste.

    3. ¿Qué expresión matemática relaciona la transmitancia y la absorbancia?

    Para convertir un valor de absorbancia en porcentaje de transmitancia, se utiliza la


    siguiente ecuación: %T = antilog (2 - absorbancia). Por ejemplo, para convertir una
    absorbancia de 0,505 a %T, se calcula antilog (2 - 0,505) = 31,3 %T.

    4. ¿Qué es un espectro de absorción y para qué se utiliza?

    Es un patrón de la absorción de radiación electromagnética por una muestra de


    materiales en función de la longitud de onda o la frecuencia de la radiación. Cuando
    la radiación electromagnética, como la luz visible o la radiación ultravioleta, interactúa
    con una muestra de materiales, se puede absorber parte de la energía de la radiación.
    La cantidad de energía absorbida dependerá de la longitud de onda de la radiación y
    de las propiedades de la muestra. En general, el espectro de absorción contiene una
    serie de picos y valles que corresponden a las longitudes de onda en las que la
    muestra absorbe más o menos energía, respectivamente. Estos picos y valles se

    4
    deben a las propiedades de la muestra, como su composición química y su estructura
    molecular, y pueden utilizarse para identificar la muestra y para determinar las
    propiedades de sus componentes.

    5. ¿Qué criterio se emplea para seleccionar la longitud de onda óptima para


    efectuar una determinación espectrofotométrica?

    Para elegir la longitud de onda óptima de trabajo se tendrán en cuenta los siguientes
    criterios:

    ● Se prefiere un máximo de absorbancia, dado que así se obtiene mayor


    sensibilidad en las lecturas.
    ● Hay que evitar en lo posible, trabajar en regiones del espectro donde hay
    cambios bruscos de absorbancia, ya que un pequeño desplazamiento en la
    longitud de onda puede causar un error grande en la correspondiente lectura.

    6. ¿Cómo se puede determinar experimentalmente la concentración de una


    solución por espectrofotometría?

    1. Preparación de la muestra: se toma una muestra de la sustancia y se


    prepara adecuadamente para la medición.
    2. Selección de la longitud de onda: se selecciona una longitud de onda
    específica que corresponde a la máxima absorción de la sustancia.
    3. Calibración del espectrofotómetro: se calibra el espectrofotómetro
    utilizando una solución patrón de la sustancia o una sustancia de
    referencia que se sabe que tiene una concentración conocida.
    4. Medición de la absorbancia: se mide la absorbancia de la muestra a la
    longitud de onda seleccionada utilizando el espectrofotómetro.
    5. Utilizar la ley de Beer-Lambert para calcular la concentración de la
    sustancia en la muestra desconocida. A = εcl, donde A es la absorbancia
    medida de la muestra desconocida, l= longitud de onda y ε es el
    coeficiente de extinción molar de la sustancia.

    5
    7. Anote el nombre, marca y modelo de cada uno de los equipos utilizados en la
    sesión.

    ● Espectrofotómetro UV-
    Vis,VELAB,VE-5100UV.
    ● Cromatógrafo de gas, CG HP
    5890, serie 2.

    ● Polarímetro, Atago ™ , polax


    tube RE6706.

    ● Espectrofotómetro FTIR-UATR.

    ● Espectrofotómetro Beckman DU
    7400.
    ● Cámara de electroforesis
    horizontal.

    ● Espectrómetro Bausch and


    Lomb Spectronic 20 5309SH-.

    ● Cámara cromatográfica.

    6
    ● Espectrómetro UV VIS, Perkin
    Elmer Lambda 2S.
    ● Espectrómetro, Perkin Elmer
    Spectrum 100 FT-IR.

    8. Investigar los componentes principales, la función de cada uno de estos y


    generar un breve análisis de las diferencias y limitaciones entre los diferentes
    espectrofotómetros UV-Vis revisados durante la sesión.

    7
    9. Realice un diseño y esquema de un equipo (espectrofotómetro o
    cromatógrafo) prototipo que contenga sus componentes principales y asigne
    funciones para las cuales sería útil ese equipo.

    Es útil para:

    ● Industria de la alimentación: control de la calidad de los alimentos, a


    través del contenido en los mismos de hidroxiprolina, almidón o nitritos
    en carne y productos cárnicos; lactosa en alimentos y bebidas
    alcohólicas; o furosina en leche.
    ● Control y tratamiento de aguas: detección de detergentes aniónicos,
    cianuros, amonio, nitritos, cromo o cloro residual en aguas de consumo
    y aguas envasadas.
    ● Control de la calidad del ambiente: demanda bioquímica de oxígeno
    (DQO), la cantidad de formaldehído, tensioactivos aniónicos, fósforo,
    fosfatos, nitritos, nitratos, nitrógeno, amonio, cromo, fenoles o sulfuros,
    en aguas continentales. Su uso es común también para medir la
    cantidad de algunos de estos compuestos y elementos químicos en
    aguas residuales y en aguas marinas; o bien para determinar la cantidad
    de nitrógeno en suelos, sedimentos y lodos.

    8
    10. Realice un cuadro comparativo de cada equipo visto en la práctica e
    identifique el tipo de análisis para los cuales resulta más conveniente su uso;
    puede ayudarse de ejemplos de sustancias o productos a analizar.

    9
    CONCLUSIONES
    Esta práctica nos permite conocer y observar de primera mano los distintos equipos
    del laboratorio, los cuales serán necesarios práctica a práctica para cumplir los
    objetivos de cada una de ellas. Es muy importante tener este tipo de prácticas
    introductorias en los laboratorios ya que nos dan un parteaguas sobre el
    funcionamiento y uso de estos equipos de laboratorio, así como familiarizarnos con
    ellos antes de realizar alguna práctica, y no sobre la marcha de las mismas.

    Esta cátedra permitió conocer y relacionar estos equipos con los fundamentos
    teóricos de la asignatura, así como conocer cortas características del control y
    funcionamiento de los mismos, así como de los cuidades de ellos.

    Es por ello que consideramos la realización de esta práctica todo un éxito y se


    cumplieron los objetivos previamente establecidos.

    REFERENCIAS
    Skoog D.A. Holler, F.J., Crouch, S.R (2008) Principios de análisis instrumental.
    México. Ed. CENGAGE Learning

    Eyco, L. (2022, 13 julio). ¿Para qué se utiliza la espectrofotometría UV-VIS y cómo


    funcionan los equipos de medición? Laboratorios EYCO.
    https://www.laboratorioseyco.com/para-que-se-utiliza-la-espectrofotometria-uv-vis-y-
    como-funcionan-los-equipos-de-medicion/

    Jarnutowski, R.; Ferraro, JR; Lankin, DC (1992). "Cincuenta años de instrumentación


    comercial en espectroscopia de absorción, parte II. Instrumentos de referencia en UV
    / vis". Espectroscopía

    García Martínez, E. M. (2012). Aplicación de la ley de Lambert-Beer en


    espectroscopía UV-visible.

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