Tinción Pas

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Tinción PAS

Fundamento:

Estudiaremos los polisacáridos que hay en las células sanguíneas

Material:

• Cementerio aguan
• Tubo de sangre
• Agua destilada
• Micropipeta
• Puntas de micropipeta
• Ácido peryódico
• Etanol
• Hematoxilina de Harris
• Formol
• Reactivo de schiff

Procedimiento:

1. Fijamos el frotis con disolución formol-etanol


2. Lavamos las extensiones en agua corriente 1 minuto.
3. Sumergir las extensiones en ácido peryódico 20 minutos
4. Lavar con agua corriente 1 minuto.
5. Sumergir las extensiones en reactivo de schiff 20 minutos
6. Lavar las extensiones 1 minuto
7. Contrateñir las extensiones durante 10 minutos con hematoxilina
8. Lavar extensiones durante 15-30 minutos.

Resultado esperado:
Una correcta tinción

Resultado obtenido:

Realizamos una correcta tinción.

Notas personales:

Usar campana extractora para formol.


Cuidado con la cubeta de tinción
Normas de seguridad e higiene:

1. Estudiar y mirar cada práctica antes de realizarla.


2. Trabajar con orden y pulcritud
3. Tratar la muestra como altamente infeccioso y tener más cuidado de lo habitual.
4. Identificar de forma correcta los tubos.
5. No comer, beber o fumar, no morder los bolígrafos ni uñas en el laboratorio.
6. Hacer uso de guantes y batas correctamente.
7. Apagar el equipo cuando terminemos de usarlo.

Gestión de residuos generados:

Ya que este es un laboratorio didáctico, en este se reutiliza todo lo posible ya que disponemos de
poco material por el que hay que cuidarlo lo máximo posible para darle una vida útil mucho más
larga que en un laboratorio no didáctico.

Portaobjetos y cubreobjetos.
Son de un solo uso. No obstante, dado el importante volumen del material utilizado en un
laboratorio didáctico, se procederá a su limpieza siguiendo las siguientes pautas:

1. Si el porta tiene restos biológicos, se sumergirá en un cementerio (reciente con una dilución
de agua y lejía al 5%) para su descontaminación previa.

2. Limpiar con una esponja que no raye el vidrio, enjabonando con una solución detergente,
aclarado y posterior secado.

3. Una vez aclarados con agua se pueden introducir en una solución de alcohol etílico o
alcohol etílico-éter etílico (1:1) para desengrasarlos en caso de que presentaran restos de
grasa.

4. Enjuagar y secar muy bien (paño suave de algodón) para evitar que queden manchas. Se
procurará no dejarlos secar al aire ya que pueden quedar marcas de gotas, que van a
dificultar la observación al microscopio.

5. Los cubreobjetos normalmente se desechan, pero en caso necesario se limpian de la misma


forma.

Material en contacto con sangre


1. Todo material de laboratorio que haya estado en contacto con sangre se considera
potencialmente contaminado o infeccioso, por lo que, inmediatamente después de su uso
procederemos a su esterilización (autoclave, por ejemplo) o a su desinfección por inmersión
en lejía diluida al 5-10% durante 20-30’.

2. Limpieza con agua y solución detergente.

3. Aclarado.

4. Secado.
Material eléctrico
1. Comprobar que están desenchufados.

2. Limpiarlos con un paño húmedo. En caso de manchas resistentes utilizar un paño empapado
en una solución con agua jabonosa o ligeramente humedecido en alcohol.

3. Secado escrupuloso.

Material en contacto con colorantes


1. Limpieza con agua y solución detergente

2. Aclarado

3. Secado

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