Informe de Práctica #2

ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA AGROPECUARIA DE MANABÍ
MANUEL FÉLIX LÓPEZ
CARRERA DE AGROINDUSTRIA
II NIVEL “A” PERIODO ACADÉMICO ABRIL-AGOSTO 2023

MICROBIOLOGÍA
INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO N°2
TEMA:
RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESÓFILOS
EN ALIMENTOS
AUTORES:
AGUILAR CANDO CRISTHIAN ANTHONNY
CALDERÓN CEDEÑO ERICK PAUL
BAQUE OLIVES JOSEPH LUIS
PÁRRAGA VERA JOSSELIN NAHOMY
TUAREZ ARTEAGA ANTONY ALEXANDER
DOCENTE:
ING. DIANA CAROLINA CEDEÑO ALCÍVAR, Mgtr.
CALCETA, JUNIO 2023

INTRODUCCIÓN
Carrera et al. (1995), menciona que el recuento de microorganismos mesófilos aeróbicos,
conocido también como recuento de placas aeróbicas (APC), es el método más usual para
la estimación del número de microorganismos viables en alimentos. Sin embargo, el APC
no mide el total de la población de bacterias en una muestra de comida, sino la fracción
de la flora microbiana que es capaz de producir colonias en el medio de cultivo bajo las
condiciones predominantes en la incubación de la placa.
Ramírez et al. (2017), manifiesta que el recuento en placa por siembra en superficie se
basa en la siembra de un volumen conocido de la dilución de la muestra sobre la superficie
de un medio de cultivo en placa Petri.
De esta forma, se considera a los microorganismos como partículas discretas y el
crecimiento es entendido como un aumento en el número total de partículas bacterianas.
Es decir, el crecimiento implica el aumento de los microorganismos capaces de formar
colonias debido a que sólo se tiene en cuenta el número de microorganismos viables, estos
son capaces de crecer indefinidamente (Ramírez, 2017).
Ahora bien, Amazará & Quintero et al. (2022), mencionan que los aerobios mesófilos son
un grupo de microorganismos capaces de desarrollarse en presencia de oxígeno a una
temperatura comprendida entre 20°C y 45°C con una óptima entre 30°C y 40°C. Es decir,
que el recuento de estos microorganismos, en condiciones establecidas, estima la
microflora total sin especificar los tipos que se encuentran.
De otro modo, son todas aquellas bacterias aerobias, afines a temperaturas medias, entre
30ºC y 37ºC que se desarrollan en cualquier medio de agar nutritivo (González, 2018).
Por otro lado, Innotec et al. (2020), resalta que la importancia de un análisis
microbiológico de alimentos nos permite conocer las condiciones higiénicas generales
del alimento para prevenir enfermedades comunes como la salmonelosis, la intoxicación
estafilocócica, la enteritis necrótica o la gastroenteritis.
Así mismo lo indican Andino & Castillo et al. (2010), que se debe considerar el aspecto
microbiológico, que resulta elemental ya que afecta a la conservación y la vida útil del
producto, además los microorganismos pueden ser causantes de enfermedades conocidas
como enfermedades transmitidas por los alimentos FBI (Foodborne illness).
OBJETIVO
Cuantificar los microorganismos aerobios mesófilos presente en alimentos crudos.
METODOLOGÍA
UBICACIÓN
La presente práctica se desarrolló en el laboratorio de microbiología ambiental ubicado
en la carrera de Agroindustria de la Escuela Superior Politécnica Agropecuaria de Manabí
Manuel Félix López (ESPAM MFL), ubicado en el sitio El Limón, parroquia Calceta,
cantón Bolívar, provincia de Manabí.
MATERIALES Y EQUIPOS
MATERIALES DE REACTIVOS EQUIPOS
LABORATORIO
Micropipeta Agua destilada Autoclave
Matraz Erlenmeyer Alcohol Balanza de Gramos
Mechero de alcohol Agar Nutriente Cámara de Flujo Laminar
Tubos de ensayo Queso fresco (10g) Contador de Colonias
Papel aluminio Peptona Incubadora
Placas Petri 90mm x 15mm Micropipeta
Pinzas Asa bacteriología
Bisturí
Vaso de precipitación
Papel film
PROCEDIMIENTOS
1. Se inició vertiendo 20 ml de agar nutriente fundido y enfriado a 45°C.
2. Se dejó reposar las placas de Petri para que solidifique el agar.
3. Se pesó 10 gramos de muestra de queso de Flavio.
4. Seguidamente se mezcló la muestra con 90ml de agua de peptona (dilución 1/10).
5. Se homogenizó la muestra masajeando manualmente.
6. Se preparó diluciones decimales seriadas (10-1 a 10-5 alimentos crudos y alimentos
cocidos 10-1 a 10-4).
7. Luego, se procedió a sembrar 1ml de las últimas dos diluciones en placas Petri
vacías.
8. Se homogenizó con movimientos circulares con ayuda de un asa de digralsky.
9. Se procedió a sellar las cajas Petri con papel film.
10. Se invirtió las cajas Petri y se llevó a incubar a 37°C durante 24 horas.
11. Se contó el número de colonias utilizando el contador de colonias a las 24 horas.
12. Se seleccionó las placas de dos diluciones consecutivas que presentara entre 10 a
150 colonias utilizando el contador de colonias.
13. Se anotó el número de colonias y la respectiva dilución.
14. Finalmente, se expresó los resultados en unidades formadoras de colonias
(UFC)/g de alimento.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Para el cálculo de colonias sea correcto se tomaron en cuenta aquellas placas Petri que
cumplieron con el requisito de entre 10 a 150 colonias, aquellas que no cumplieron con
este principio fueron denominadas incontables. A continuación, en la Tabla 1.1 se muestra
la fórmula para calcular las unidades formadoras de colonias (ufc):
𝑁𝐶 100 𝑚𝑙 𝑎𝑔𝑢𝑎 𝑝𝑒𝑝𝑡𝑜𝑛𝑎𝑑𝑎

𝑈𝐹𝐶 = × × 𝑓𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛
𝑚𝑙 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑠𝑒𝑚𝑏𝑟𝑎𝑑𝑎 𝑔𝑟𝑎𝑚𝑜𝑠 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
Tabla 1.1 – Fórmula para calcular UFC
Posteriormente, en la tabla 1.2 se muestran los resultados obtenidos a partir de la fórmula

para calcular las unidades formadoras de colonias (UFC).
DILUCIONES RESULTADOS
TRATAMIENTOS ufc/g
10-3 10-4 10-5
Flavio X X 53 + 48 5.1 x 10-7
Tabla 1.2. Bacterias totales de la muestra de queso.
En ambas diluciones 10-3 y 10-4 correspondientes a la muestra del queso (Flavio),

demostraron no cumplir con el rango de cuantificación de colonias (10-150) requerido,
por el contrario, las diluciones 10-5 demostraron haber cumplido con el rango, por lo tanto,
sus números de colonias respectivos fueron 53 y 48, ambos sumados y llevados al
desarrollo de cálculo donde se obtuvo 5.1×107 ufc/g.
González et al. (2018), expresa en un trabajo de grado, en el que relaciona múltiples

análisis en muestras de comida tomadas de restaurantes y sitios de comida rápida. A
continuación, los resultados obtenidos en una muestra de Sushi fueron los siguientes: En
la dilución 1/100, fue posible el contaje de enterobacterias, dando como efecto 43 ufc.
Para el recuento de los microorganismos mesófilos aerobios totales fue necesario
continuar en la dilución 1/1000, mostrando 50 ufc obteniendo así 5×105ufc/g.
Así mismo, González et al. (2018), expresa que los resultados que obtuvo en una muestra
de una ensalada preparada fueron los siguientes: Para tener un recuento aceptable de
enterobacterias debió dirigirse a la dilución 1/100 donde se encontraron 162 ufc o
1.6×105ufc/g, en cambio, para los mesófilos aerobios totales, es la dilución 1/10000 la
que dio un resultado contable, produciendo 248 ufc o 2.4×107 ufc/g.
González & Fernández et al. (2015), comparten el recuento de presuntos

microorganismos patógenos presentes en el queso de Aro. A continuación, los resultados
obtenidos: El promedio de coliformes totales fue de 6,94 ± 0,71 Log10 UFC/g. No se
menciona el número máximo permisible de coliformes en quesos frescos, sin embargo,
estos evidencian recuentos muy elevados, y el consumo de este queso podría poner en
riesgo la salud del consumidor.
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
CONCLUSIONES
• Se logró conseguir dos resultados en la dilución 10-5, en la primera caja Petri se
contabilizó 53 colonias y en la segunda obtuvo 48 colonias en total.
• Se obtuvo un resultado de 5.1*107 UFC/g como bacterias totales en la muestra del
queso de Flavio Alfaro.
RECOMENDACIONES
• Acatar todas las indicaciones referentes al uso de la cámara de flujo laminar dadas
por el técnico.
• Desinfectar las manos, materiales y la muestra de queso antes del ingreso a la
cámara de flujo laminar.
• Esterilizar los materiales antes y después de iniciar un nuevo proceso dentro de la
cámara de flujo laminar.
• Cambiar la boquilla de la micropipeta cuando se vaya a tomar una nueva muestra.
BIBLIOGRAFÍA
Andino, F., & Castillo, Y. (2010). Un enfoque práctico para la inocuidad alimentaria
Curso Microbiología de los alimentos.
https://avdiaz.files.wordpress.com/2010/02/documento-microbiologia.pdf
Amazará, E., & Quintero, Y. (2022). Microbiología de los alimentos recuento de los
microorganismos aerobios mesófilos.
https://www.researchgate.net/publication/361449495_MICROBIOLOGIA
_DE_ALIMENTOS_RECUENTO_DE_LOS_MICROORGANISMOS_A
EROBIOS_MESOFILOS
Carrera, M. (1995, September 1). Recuento de bacterias mesófilas aerobias.
Www.imbiomed.com.mx.
https://www.imbiomed.com.mx/articulo.php?id=23723#:~:text=El%20rec
uento%20de%20microorganismos%20mes%C3%B3filos
González, C. (2018). Grado en Biología Análisis de la calidad microbiológica de los
alimentos procedentes de cadenas de comida rápida.
https://ruc.udc.es/dspace/bitstream/handle/2183/21542/GonzalezRodriguez
_Cristina_TFG_2018.pdf?sequence=2&isAllowed=y#:~:text=1.
González, M., & Fernández, F. (2015). Perfil microbiológico del queso de aro consumido
en la Cañada Oaxaqueña.
https://www.scielo.br/j/bjft/a/jLGgkMhFgD3MxS8BVRybM5K/?lang=es
&format=pdf#:~:text=El%20recuento%20m%C3%A1ximo%20de%20mes
%C3%B3filos,de%20este%20tipo%20de%20queso.
Innotec, L. (2020, March 16). Análisis Microbiológico de Alimentos √【Innotec-

Laboratorios】. Análisis Microbiológico. https://www.innotec-
laboratorios.es/analisis-de-alimentos/analisis-
microbiologico/#:~:text=Esto%20quiere%20decir%20que%20un
Ramírez, J. (2017). Análisis de técnicas de recuento de Microorganismos.

file:///C:/Users/Joseph%20Baque/Downloads/portalderevistas,+1.An%C3
%A1lisis+de+recuentro%20(1).pdf
ANEXOS
ANEXO 1. APLICACONES EN LA CÁMARA DE FLUJO
LAMINAR
Foto 1 – Presentación de la cámara de flujo laminar Foto 4 - Extracción del queso
Foto 3 - Pesado del queso Foto 2 - Expansión de la dilución en la caja Petri

con el asa bacteriológica.

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INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO N°2

CALCETA, JUNIO 2023

𝑁𝐶 100 𝑚𝑙 𝑎𝑔𝑢𝑎 𝑝𝑒𝑝𝑡𝑜𝑛𝑎𝑑𝑎

Tabla 1.1 – Fórmula para calcular UFC

Posteriormente, en la tabla 1.2 se muestran los resultados obtenidos a partir de la fórmula

Tabla 1.2. Bacterias totales de la muestra de queso.

En ambas diluciones 10-3 y 10-4 correspondientes a la muestra del queso (Flavio),

González et al. (2018), expresa en un trabajo de grado, en el que relaciona múltiples

González & Fernández et al. (2015), comparten el recuento de presuntos

Innotec, L. (2020, March 16). Análisis Microbiológico de Alimentos √【Innotec-

Ramírez, J. (2017). Análisis de técnicas de recuento de Microorganismos.

Foto 1 – Presentación de la cámara de flujo laminar Foto 4 - Extracción del queso

Foto 3 - Pesado del queso Foto 2 - Expansión de la dilución en la caja Petri

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