Universidad de Los Andes Departamento de Química

Facultad de Ciencias
Mérida-Venezuela

Preparación de la muestra
para la determinación de
analito inorgánicos

Química Analítica I
Prof. Maribel Valero

Integrantes:
 Karen Malpica C.I. 31130641
 Jaasiel Torres C.I. 28730805

15/03/2023
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Índice
1. Introducción...................................................................................................................................................................... 3
2.Objetivos............................................................................................................................................................................5
3.Tipos de muestra y transformaciones de los analitos..........................................................................................................5
3. 1.1 Entre los métodos tradicionales están compuestos por........................................................................................5
3.1.2 Los métodos modernos están compuestos por......................................................................................................6
3.1.3 técnicas de disolución de unas muestras...............................................................................................................7
3.1.3 tratamiento de una muestra liquida.......................................................................................................................7
3.1.4 determinación de analitos orgánicos.....................................................................................................................7
3.1.5 preparación de una muestra..................................................................................................................................7
3.2 Filtración y centrifugado.............................................................................................................................................7
3.2.1 tipos de filtros.......................................................................................................................................................8
3.2.2 desventajas de los filtros.......................................................................................................................................8
3.2.3 aspectos a considerar al recoger los filtros............................................................................................................9
3.2.4 Centrifugado.........................................................................................................................................................9
3.2.5 muestras gaseosas.................................................................................................................................................9
3.3 Disolución por vía húmeda..........................................................................................................................................9
3.3.1 En la disolución sin reacción química................................................................................................................10
3.3.2 En la disolución con reacción química...............................................................................................................10
3.3.3 Empleo de ácidos solos.......................................................................................................................................10
3.4 Descomposición por fusión.......................................................................................................................................11
3.5 Preparación de la muestra para el análisis por fluorescencia de estos X....................................................................12
3.6 Mineralización por vía seca.......................................................................................................................................13
3.6.1 En horno a elevadas temperaturas......................................................................................................................13
3.6.2 Mineralización en plasma de oxígeno a baja temperatura...................................................................................14
3.7 Extracción secuencial: lixiviación.............................................................................................................................14
3.8 Preparación de suspensiones o “slurries”..................................................................................................................15
4. Técnicas de separación extractivas..................................................................................................................................15
4.1 Extracción liquido-liquido.........................................................................................................................................15
4.2 Extracción con fluidos supercríticos..........................................................................................................................16
5. Procedimiento de preconcentración.................................................................................................................................16
5.1 Transferencia de la matriz a otra fase........................................................................................................................16

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5.2 Transferencia de los analitos a otra fase....................................................................................................................16

6. Tratamiento de la muestra para la determinación de especies.........................................................................................17
6.4 Hidrolisis enzimática.................................................................................................................................................17
7. Conclusión...................................................................................................................................................................... 18
8. Referencias Bibliográficas..............................................................................................................................................18

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1. Introducción
La mayoría de las técnicas de análisis, tanto clásicas como instrumentales, requieren que la muestra se
encuentre en disolución. Son muy pocas las que permiten realizar el análisis directamente en muestras sólidas.
Sin embargo, incluso estas técnicas requieren en muchos casos un tratamiento adecuado de la muestra para su
correcto empleo. Podemos observar que, en la gran mayoría de los casos, será necesario realizar un
pretratamiento de las muestras para poder llevar a cabo su análisis. Incluso cuando se trata de muestras líquidas,
es necesario realizar procesos de filtración para disolver las partículas sólidas o eliminar la materia orgánica de
la suspensión/disolución. Esto es esencial para evitar la producción de interferentes en la técnica analítica que se
utilizará.
Antes de iniciar el proceso analítico, es fundamental tener una clara definición de los objetivos y una selección
adecuada de la metodología a emplear para alcanzarlos. Esto implica conocer previamente el analito a
determinar, su concentración y el método de análisis a seguir, antes incluso de realizar la toma de muestra. Este
trabajo engloba los siguientes puntos como: tipos de muestras y transformaciones de analitos, filtración y
centrifugación, disolución por vía húmeda, descomposición por fusión, preparación de la muestra entre otros.
Además, podemos decir que todo análisis analítico incluye etapa previa que consta varias operaciones, tales
como la muestra bruta, el muestreo, la medida de masa o volumen, el secado, la trituración, la homogenización,
la muestra de laboratorio, la conservación, la destrucción de materia orgánica, la disolución, la lixiviación, la
disgregación, las técnicas de separación y/o preconcentración, las reacciones analíticas, la introducción del
instrumento analítico y la medida analítica. No siempre es necesario realizar todas las etapas, ya que dependen
del problema que se está resolviendo y pueden ser alteradas, obviadas o agrupadas.
Sin embargo, es importante tener en cuenta que estas operaciones previas tienen ciertas características que
deben ser consideradas. En numerándolas como
1) presentan una gran variabilidad debido a que cada proceso analítico tiene características únicas que
requieren un tratamiento previo específico, según el tipo de análisis, el tipo de analito, la concentración
y las técnicas determinadas.
2) estas operaciones requieren una elevada participación humana, lo que las hace lentas y difíciles de
automatizar, por lo que se necesita personal especializado y con conocimientos adecuados para llevarlas
a cabo.
3) el proceso de tratamiento de muestra es la fuente más común de errores que pueden afectar la
recuperación de los analitos y, por lo tanto, la precisión de los resultados obtenidos. Por esta razón, es
crucial que los objetivos del tratamiento de muestra estén siempre orientados a lograr una recuperación
máxima del analito. Para ello, se deben evitar posibles pérdidas del mismo o introducir un factor
correctivo cuando se produzcan pérdidas controladas y constantes.
En la química analítica, la determinación de analitos inorgánicos en muestras sólidas es una tarea compleja que
requiere el uso de diversos métodos tradicionales y modernos. El tratamiento de las muestras depende de la
información que se desea obtener y del analito a determinar y de la naturaleza de la muestra en sí misma. Los
métodos de tratamiento de muestras incluyen filtración, centrifugación, extracción sólido-líquido, disolución
por vía húmeda y seca, fusión, combustión en frascos de oxígeno, entre otros. Es importante tener en cuenta los
factores que pueden influir en la eficiencia del proceso, como la naturaleza de la matriz, los ácidos o mezclas
utilizados y la temperatura, entre otros. Por otro lado, las técnicas extractivas son una vía común para separar
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los analitos del resto de la matriz y lograr una mayor sensibilidad y selectividad en la determinación. En
particular, la técnica de extracción líquido-líquido se basa en la diferencia de solubilidad de un soluto en dos
fases líquidas inmiscibles y se utiliza para extraer especies de interés de un medio acuoso a un disolvente
orgánico no miscible.
Existen algunos riesgos que afectan en las medidas analíticas que se dividen en la pérdida del analito estudiado
y la contaminación estos casos pueden suceder por: interacción de los analitos con la superficie del contenedor,
descomposición por efecto de luz, oxidación, bacterias. En el tratamiento de muestra ocurre la mineralización,
extracción, preconcentración.
Podemos calcular la cuantificación de la perdida y se suele dar como recuperación (siendo tanto mayor cuanto
menor es esta) y se expresa en la siguiente ecuación es
concetracion encotrada
%Recuperación = × 100
concentracion real
Podemos resumirlo de este modo si los métodos que proporcionan recuperaciones son menos precisos. Es decir,
si es el caso de una recuperación de 99% significa una pérdida de 1%, si la recuperación es de 60% la precisión
de los resultados podría ser mucho menor, Una baja recuperación es una baja precisión. Para algunos casos la
base para estipular si el tratamiento analítico es de baja recuperación puede ser o no aceptable se obtiene
estableciendo el máximo nivel de error, es decir la máxima desviación relativa determinada por la siguiente
ecuación

RSD=
σ √σ +σ +σ
= muestreo recuperacion metodo
cantidad del analito contenido del analito
La ecuación permite:
 Determinar la mínima reproducibilidad requerida en el tratamiento.
 La automatización del proceso de tratamiento de muestra proporciona una desviación relativa global
mucho menor aumentando la precisión del proceso.
 El tiempo que se emplea en la preparación de la muestra es de gran importancia.

2.Objetivos
- Conocer los métodos más comúnmente utilizados para la puesta en disolución de la muestra y su grado
de aplicación.
- Ser consciente de los riesgos de error que se puede implicar cada uno de los métodos y las precauciones
a tomar.
- Saber cómo evaluar la recuperación del analito y como esta afecta a los resultados.
- Conocer las características más relevantes de los reactivos para tener un criterio de selección.
- Conocer las posibilidades de automatización de los distintos métodos y su implementación para análisis
de rutina.
- Ser consiente de los riesgos de explosión y peligro que entrañan algunos métodos de tratamiento de
muestra.

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3.Tipos de muestra y transformaciones de los analitos

El tratamiento de muestras depende de la información que se desea obtener y del analito a determinar, más que
de la naturaleza de la muestra en sí misma. Es un tipo de tratamiento que consiste más de la información a
obtener que la naturaleza de la muestra. Ahora bien, debemos tener presente que en muchos casos que al tratar
las muestras biológicas se deben mantener su integridad y actividad para esto debemos clasificarlos de la
siguiente manera analitos orgánicos e inorgánicos
 Los orgánicos pueden clasificarse según su volatilidad cómo: volátiles, semi volátiles y no volátiles.
 Se pueden encontrar en forma sólida, semisólidas (geles, suspensiones, coloide) y en líquidos y gaseosos
 Cada determinación requiere un pretratamiento de aislamiento del analito antes de proceder a su análisis
Los métodos de tratamiento de muestras para la determinación de analitos inorgánicos en muestras sólidas
pueden ser clasificados en métodos tradicionales y modernos.
3. 1.1 Entre los métodos tradicionales están compuestos por
A. la filtración y la centrifugación:
- son métodos de separación física de partículas sólidas de la matriz.
- La eficiencia depende del tamaño de la partícula
- Tamaño del aparato de filtrado
- Velocidad de centrifugación

B. la extracción sólido-líquido lixiviación:

- implica agregar uno o varios disolventes que extraen el o los analitos de interés
- El proceso de lixiviación requiere agitación, control de temperatura y filtración y se realiza en
caliente.
- La muestra debe estar compuesta por partículas finas para lograr una buena eficiencia del proceso.

C. disolución por vía húmeda

- implica tratar la muestra con agua, ácidos o mezclas que permiten la disolución del analito. La
eficiencia de este proceso depende de la naturaleza de la matriz, los ácidos o mezclas utilizados, la
temperatura, entre otros factores.

D. La disolución por vía seca

- consiste en la destrucción de la materia orgánica mediante un proceso de oxidación a alta
temperatura.
- El residuo se disuelve en acido
- La eficiencia depende de: matriz, temperatura, perdida del componente por volatilidad

E. La fusión
- implica someter la muestra a tratamientos con fundentes que aumentan su solubilidad y permiten
alcanzar temperaturas muy altas.
- Las temperaturas pueden tener un rango desde 3000C hasta 12000C

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F. La combustión en frascos de oxígeno

- coloca la muestra sólida en un soporte de platino y se somete a un proceso de combustión en una
atmósfera enriquecida con oxígeno. Los gases liberados se absorben y se transforman en los disolventes
adecuados mediante una disolución absorbente en un Erlenmeyer.

G. Sonicación
- se coloca la muestra en un baño de ultrasonido
- la eficiencia depende de: temperatura, tiempo, matriz y extráctate utilizado.
3.1.2 Los métodos modernos están compuestos por
1) La extracción acelerada ASE o ESE
- implica calentar la muestra en un recipiente hermético por encima de su punto de ebullición, lo que
aumenta la presión y acelera el proceso de extracción.
2) La extracción con fluidos supercríticos
- consiste en hacer pasar un fluido supercrítico, como CO 2, a través de la muestra. La eficiencia de este
proceso depende de la naturaleza de la matriz.

3) El plasma de oxígeno a baja temperatura

- Consta de la activación del oxígeno con la ayuda de una radio frecuencia
- reduce el riesgo de pérdida de analitos volátiles, pero suele requerir mucho tiempo y no es
automatizable.

4) La extracción o mineralización asistida por microondas

- acelera significativamente el proceso de extracción y mineralización.
Todos estos métodos se profundizarán a lo largo de este trabajo.
De este modo el tratamiento de muestras para la determinación de analitos inorgánicos en muestras sólidas es
una tarea compleja que implica una variedad de métodos tradicionales y modernos. La elección del método
adecuado depende de la naturaleza de la muestra y del analito a determinar. Es importante tener en cuenta los
factores que pueden influir en la eficiencia del proceso, como la temperatura, la naturaleza de la matriz, los
ácidos o mezclas utilizados, entre otros. Los métodos modernos ofrecen una mayor eficiencia y rapidez, aunque
también implican mayores riesgos y medidas de seguridad.
3.1.3 técnicas de disolución de unas muestras
podemos clasificarlas en extracción o lixiviación y disolución total, en necesario disponer del menor tamaño de
la muestra para favorecer el contacto en la disolución, en algunos casos es aconsejable someterlo a procesos
previos de liofilización
Podemos definir que una disolución total es la destrucción de la materia orgánica o de otros, constituyentes de
la matriz que interfieren en la reaparición del analito, podemos decir que la vía seca es uno de los métodos más
poderosos para disolver la muestra, además de que esta una técnica llamada Carius esta consiste en que la
muestra se cierra herméticamente en una ampolla y la combinación de temperatura y presión en el sistema
disolverán la muestra muy rápido

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3.1.3 tratamiento de una muestra liquida

este tipo de muestra es más sencillo que el de una muestra sólida, posee partículas que en algunos casos se
encuentran en suspensión por lo que se le debe de aplicar filtrados y centrifugación, en algunos casos se
recomienda disolver la mezcla para obtener una única solución
3.1.4 determinación de analitos orgánicos
en estos tipos de analitos se aplican métodos de limpieza, para la eliminación de materia orgánica residual
totalmente imprescindible, en casos de alguna interferencia se adicionan agentes enmascaraste reductores; se
pueden separar las interferencias físicas o de analitos mediante: extracción liquido-sólido y liquido-liquido.
Cuando la concentración del analito sea inferior al límite de cuantificación de técnica, el problema se puede
subsanar aplicando distintos métodos de preconcentración.
3.1.5 preparación de una muestra
se debe llevar a cabo de forma individual y abarca problemas como el tiempo, recuperación, contaminación,
irreproducibilidad, costo e interpretación de resultados.
3.2 Filtración y centrifugado
Antes de analizar muestras líquidas o gaseosas, es necesario separar las partículas sólidas para evitar
interferencias en los métodos analíticos. Las técnicas más comunes son la filtración y la centrifugación, y la
elección del filtro y su tamaño de poro dependen del material a separar y de los objetivos del análisis. Los filtros
de celulosa de 0,45 μm son los más usados, aunque los de policarbonato son más efectivos para estudiar la
distribución de tamaños de partículas. La centrifugación se utiliza según el tamaño de las partículas, y en
algunos casos se requiere coagulantes o ultra centrifugación para separar coloides. El tiempo de centrifugación
dependerá de las partículas suspendidas en el líquido.

Tratamiento conjunto Disolución

Disolución filtrable
Filtración Tratamiento
Liquido con
partículas solidas Partículas solidas
Disolución no
Centrifugación
filtrable de partículas

Flotación + separado

Figura 3.2.1 posibilidades de análisis de líquidos contenido partículas en suspensiones

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Otros aspectos que justifican la necesidad de separar las partículas sólidas del resto de los líquidos se deben a
que pueden producir interferencias en el método analítico seleccionado; así, por ejemplo, si se utiliza el método
espectrofotometría, la presencia de partículas pequeñas pueden originar dispersión de la radiación con las
consecuentes interferencias. En caso de utilizar técnicas donde se empleen nebulizadores (absorción atómica o
fotométrica de llama, ICP, ICP-MS etc.). las partículas pueden bloquear el sistema dando lugar a una variación
de interferencias de introducción a la muestra con las siguientes perdidas de señal de analitos.
3.2.1 tipos de filtros
se clasifican en policarbonatos y celulosa
 los filtros policarbonatos: constituida por una serie de canales sin ramificación y de diámetros uniformes
a. contaminan poco
b. útiles para estudiar el tamaño de las partículas
c. se saturan muy rápido
 filtros celulosos: constituido por una serie de canales retorcidos y de tamaños variables.
a. bloqueo parcial de los mismos
b. no sirven para estudiar la distribución del tamaño de las partículas
3.2.2 desventajas de los filtros
 No sé filtran de inmediato, al recoger se pueden producir cambios en la concentración filtrable y no
filtrable.
 En muestras con algas pueden romperse y producir errores en la concentración de materia filtrable.
 También pueden generar problemas de contaminación, de ahí siempre es necesario comprobar su posible
efecto.
 También pueden causar perdidas por el proceso de absorción, los riesgos de perdida dependen
claramente de la naturaleza de la matriz.
3.2.3 aspectos a considerar al recoger los filtros
Evaluar la cantidad del material particulado por pesada del filtro antes y después de su uso (previo al secado del
mismo), se debe seleccionar el método más adecuado para su puesta en disolución, que suele implicar el
tratamiento con ácido para la recuperación de metales y con disolventes para la extracción de componentes
orgánicos
3.2.4 Centrifugado
Contribuye a otra forma de llevar a cabo la separación de fases en muestras líquidas, se selecciona en función
del tamaño de las partículas en suspensión. También nos podemos encontrar con la existencia de coloide que
son de difícil de separar, por lo que es conveniente adicionar coagulante o realizar el proceso de centrifugación
en elevado número de revoluciones.
El tiempo de centrifugación dependerá de las partículas sólidas suspendidas en el seno del líquido.
Otro método menos conocido, para la separación de material particulado de un líquido se basa en el burbujeo de
un gas, a través del mismo las partículas sólidas tienden a desplazarse junto con las burbujas de gas, este
proceso recibe el nombre de flotación.

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3.2.5 muestras gaseosas

El material particulado en el aire. Conocido como aerosol, produce importantes problemas relacionado con la
salud y con el clima (por dispersión de la radiación solar, formación de nubes, lluvias ácidas, etc.). Por el
tamaño de las partículas de aerosol; el método más frecuente utilizado es burbujear a través de filtros, siendo los
problemas más significativos a encontrar es la adsorción y la interacción de partículas después del recogido, así
como la ventaja de utilizar el filtro más adecuado.
3.3 Disolución por vía húmeda
La disolución de muestras sólidas en fase líquida es un proceso fundamental en el análisis químico, ya que
permite la separación y cuantificación de los componentes de una muestra. En la disolución por vía húmeda, el
proceso se lleva a cabo utilizando un disolvente líquido para disolver la muestra sólida. Este proceso puede
llevarse a cabo sin cambios químicos, y es ideal para muestras que no pueden ser analizadas directamente en
estado sólido.
Existen varios objetivos que se deben cumplir para una disolución por vía húmeda exitosa. En primer lugar, los
reactivos utilizados deben ser capaces de disolver la muestra cualitativamente sin dejar restos insolubles.
Además, el proceso de disolución debe ser rápido y no interferir con el análisis. Los reactivos no deben
contaminar la muestra y no se deben producir pérdidas de analitos durante el proceso. También es importante
que ni los reactivos ni la muestra alteren las características de los recipientes utilizados en el proceso de
disolución. Por último, el proceso debe llevarse a cabo en condiciones de seguridad.
Antes de planificar el proceso de disolución, es importante evaluar el estado físico de la muestra. Si la muestra
no está en un estado adecuado para la disolución, se deben realizar procesos previos para lograrlo, como el
secado o la trituración. También es importante llevar a cabo un proceso de limpieza adecuado para evitar la
contaminación de la muestra.
Existen dos tipos de disolución por vía húmeda: la disolución sin reacción química y la disolución con reacción
química.
3.3.1 En la disolución sin reacción química
Se utilizan disolventes como el agua o disoluciones reguladoras para disolver los compuestos orgánicos. Estos
disolventes son muy puros y seguros, y no atacan las paredes del recipiente. Sin embargo, muy pocas muestras
se disuelven en agua, y se necesitan disolventes orgánicos para disolver sustancias orgánicas específicas.
3.3.2 En la disolución con reacción química
Se utilizan ácidos diluidos o mezclas de ácidos para disolver sustancias. Los ácidos pueden actuar a través de
mecanismos como la acido-base, la oxidación-reducción o la Complejación. En la acido-base, los ácidos
disuelven sales cuyo anión tenga carácter básico. En la oxidación-reducción, los ácidos oxidantes disuelven
metales más electronegativos que el hidrógeno, así como compuestos susceptibles de ser oxidados. En la
Complejación, los ácidos disuelven óxidos o sales de metales que forman complejos con los reactivos.
3.3.3 Empleo de ácidos solos
La reactividad de los ácidos se puede aumentar utilizando concentrados y en caliente en lugar de diluidos, de
forma que puedan disolver metales con potencial de reducción menor que el hidrógeno, aleaciones, muchos
minerales, lodos etc. por otra parte su efectividad puede aumentar, si se utiliza en un baño de ultrasonidos en
reactores de presión (calentando en estufa o sometido a la acción de la radiación de microondas).
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Algunos de los ácidos más usados son:

 ácidos clorhídricos
Es un ácido fuerte que reacciona con la mayoría de los metales de transición formando complejos clorados
solubles en agua (excepto con Ag y TI) posen propiedades reductoras débiles. El ácido clorhídrico es adecuado
para disolver muestras fundidas con hidróxidos alcalino, carbonato y peróxido. algunos metales como: Zn, Cd,
Te y Sn, se puede disolver en HCI diluido pero el proceso se puede acelerar por la adición de otro ácido o de un
agente oxidante. Además, su uso en disolución de acero es relevante ero no puede disolver grafito, algunos
carburos. Tiene la capacidad de disolver sulfuro y posee un gran poder de lixiviación.
 Ácido nítrico
Es un ácido oxidante, inestable, fotosensible, altamente reactivo, (se debe manipular con guantes y gafas) es
muy poco complejante. Además, es un buen disolvente de metales; no es útil para disolver metales nobles ya
que solo es capaz de disolver Pd y Ag. Tiene la propiedad de pasivar metales tales como AI, Cr, Ti, Nb y Ta.
El HNO3 el tres ban pequeño corregir ver página 19 Puede originar productos de descomposición que interfieran
en muchos métodos analíticos, lo que hace que se requiera su eliminación por evaporación con ácidos sulfúricos
o con ácidos perclórico
 Ácidos perclóricos
Es un ácido fuerte con elevado poder oxidante muy poco complejante, en caliente es capaz de disolver un
elevado número de metales por su capacidad oxidante, por el elevado punto de ebullición y por la solubilidad en
agua y poder deshidratante de algunos percloratos. Además, nunca debe utilizarse solo y se aconseja la adición
de otro ácido, igualmente es capaz de atacar el grafito y de disolver sustancias altamente insolubles
Operar un ácido perclórico implica utilizar siempre unas vitrinas de extracción adecuada. Cómo normas
especial se recomienda:
 Nunca usarlo en concentración superior a 72%
 No ponerlo solo en contacto con material altamente oxidable
 La vitrina extractora de humus no debe estar hecha de material orgánico (madera)
 Cuidar siempre las medidas de seguridad (gafas, guantes, etc.)

 Ácido sulfúrico
Cuando está diluido no tiene propiedades oxidantes, mientras que concentrado oxida un elevado número de
sustancias, es el ácido menos volátil, en ebullición de 338 C puede dañar material como el teflón, por lo que se
recomienda utilizar material de cuarzo. Es un ácido deshidratante con gran capacidad de destruir la materia
orgánica, la mayoría del sulfato son soluble y tiene como ventaja que al tratar muestra se puede llevar a
sequedad sin riesgo de pérdidas de elementos volátil. Así mismo disuelve casi todos los metales, acero. Óxidos,
hidróxidos, carbonato y sulfato.
 Ácido fosfórico

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Es el ácido menos importante para disolución de matrices de la naturaleza inorgánica. Es de naturaleza débil, no
es oxidable y muchos fosfatos son insolubles. Presentan el inconveniente de que la presencia de fosfatos
interfiere en muchas determinaciones analíticas. Se emplea para la disolución de sulfuros, ferrita y cromitas. Su
empleo se puede realizar en recipientes de vidrio o sílice fundida. Además, su aplicabilidad para el análisis es
muy limitado
Empleo de ácidos y mezclas
En la mayoría de los casos de disolución de muestras orgánica como inorgánica resulta mucho más útil el
empleo de dos o más ácidos debido a que el efecto conjunto de las distintas propiedades de cada uno de ellos
puede aumentar la eficacia del proceso de disolución de muestra. Los aspectos más positivos son los siguientes:
 Se puede conseguir un doble efecto conjunto.
 La mezcla de ácido puede originar un incremento importante de la realidad del proceso: efecto sinérgico
 Un ácido puede moderar efecto no deseado del otro.
 Eliminar ácidos útiles en el proceso de disolución pero que pueden interferir en el proceso de análisis.
Es importante evaluar la reactividad de los ácidos para determinar la concentración y temperatura adecuadas
para la disolución. Además, se deben considerar aspectos de seguridad y pureza antes de utilizar ácidos
concentrados o en caliente. En algunos casos, se pueden utilizar baños de ultrasonido o reactores a presión para
aumentar la efectividad de los ácidos.
3.4 Descomposición por fusión
El proceso de descomposición por fusión implica el uso de altas temperaturas para disolver la muestra a través
de mecanismos de reacción similares a la disolución por vía húmeda. La velocidad de la descomposición
depende de la naturaleza del fundente y la muestra a disolver, así como de la superficie de la muestra. La fusión
es efectiva debido a la elevada temperatura alcanzada, la capacidad de disolución de los electrolitos fundidos, su
comportamiento como ácidos o bases de Lewis o como reactivos Redox. Los fundentes más utilizados incluyen
carbonatos, hidróxidos alcalinos y boratos, y tienen diferentes propiedades y usos. También existen fundentes
ácidos y fundentes con características Redox, que se utilizan para disolver diferentes tipos de muestras.

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Carbonatos

Fusiones alcalinas Hidróxidos

Boratos
Según el caracter ácido-
base del fundente
Disulfatos

Fusiones Acidas Fluoruros

Óxidos de boro

Agentes alcalinos +
oxidantes
Fusiones oxidantes

Peróxidos
Según el carácter rédox
del fundente
Fundentes
alcalinos+reductores
Fusiones reductoras

Sulfuros y alcalinos

Figura 3.4.1 Tipos de fusiones

3.5 Preparación de la muestra para el análisis por fluorescencia de estos X
La técnica de fluorescencia de rayos X (FRX) es muy adecuada para el análisis de muestras sólidas. Sin
embargo, para obtener resultados precisos y fiables, es necesario realizar una serie de operaciones básicas de
preparación de muestras para análisis por fluorescencia de rayos X. Estas operaciones incluyen los procesos de
trituración, molienda, pulverización, secado, mezcla y fusión. El objetivo principal de este tipo de tratamiento es
reducir o eliminar los efectos mineralógicos y los debidos al tamaño de partículas, por producción de perlas
adecuadas con la fusión o sometiendo la muestra a una molienda exhaustiva. Es importante destacar que el
proceso de preparación de la muestra debe ser altamente reproducible.
Además, la fluorescencia de rayos X requiere que la composición de la muestra y de los patrones sea lo más
similar posible. Los tipos de errores más frecuentes en la presentación de muestra para análisis por FRX son la
contaminación, pérdida de muestra, alteración de la composición, superficie de la muestra y deterioro. La
mayoría de estos errores pueden evitarse operando con elevado rigor. Los tipos de muestras a los que se aplica
la técnica son muestras no metálicas polvorientas, muestras metálicas tanto en polvo como en láminas o barras y
muestras líquidas.
En cuanto a la preparación de muestras sólidas, el proceso de comparación mediante la aplicación de una
presión determinada durante cierto tiempo debe proporcionar una pastilla de densidad constante y de difícil
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manipulación, y se suele utilizar soporte de aros de acero o cápsulas de aluminio de plástico. Por lo general, las
muestras requieren una etapa previa de molienda. Se han propuesto variaciones al empleo único de presión, que
consiste en la adicción de aglomerantes como ceras, butilmetacrilato en acetona, resina, entre otros, y otros
agentes que a su vez ayuden en el proceso de molienda. Es importante tener en cuenta que estos aditivos pueden
proporcionar disoluciones a la muestra o un aumento del ruido de fondo en la medida y por lo tanto del límite
de detección. Una tercera alternativa será el empleo de isopropanol o acetona en lo que se denomina molienda
húmeda. Esta técnica proporciona un tamaño de granos pequeños y constante y no alcanza una temperatura tan
alta como la de la molienda al seco.
En casos en que se empleen tenías de disolución en lugar de comparación, hay que tener en cuenta sus ventajas
y desventajas. Por un lado, se reducen los errores por variaciones del tamaño del grano, se obtienen muestras
más homogéneas, se puede obtener muestra patrón y blancos de forma más simple y se puede hacer
correcciones vía estándar interno. Por otro lado, la preparación de muestras con tenías de disolución conlleva un
mayor tiempo y complejidad, dilución y la posibilidad de fondos espectrales volátiles y destrucción de muestra
original, entre otros.
En el caso de muestras líquidas, puede llevarse a cabo midiendo directamente el líquido o transformándolo a
una fase sólida. La medición directa requiere un sistema de flujo de helio y células especiales, pero las muestras
líquidas no deben ser soluciones ácidas y se deben usar espectrómetros en aire o medio de He. Es importante
trabajar siempre con el mismo volumen de muestra para evitar evaporaciones y precipitaciones. La
transformación a una fase sólida permite realizar mediciones en vacío, lo que disminuye los límites de
detección. Las técnicas más comunes incluyen adsorción en papel de filtro, preconcentración con intercambio
iónico, uso de gel de alúmina, evaporación y fusión con tetraboratos. La elección del método dependerá del
estado físico de la muestra, el tipo de análisis y la concentración de los analitos.
3.6 Mineralización por vía seca
La vía seca constituye uno de los métodos más importantes para la eliminación de la materia orgánica y
posterior puesta en disolución del residuo por tratamiento con ácidos diluidos inorgánicos u orgánicos. Dos son
los procesos más comunes que se encuadran en este apartado: aplicación de temperaturas elevadas y
mineralización con plasma a bajas temperaturas por la aplicación de oxígeno activado. El tiempo en el que el
operador dedica, por lo general, a la vía seca suele ser mínimo y las cantidades de muestra suelen ser
relativamente elevadas (solo en los plasmas a bajas temperaturas son pequeñas). debido a que la mineralización
por vía seca a elevada temperatura debe realizarse en recipientes abiertos adecuado, la presencia de partículas
suspendidas en el aire originadas por los componentes del horno puede ser problemáticos por cuanto puede
contribuir a la contaminación de la muestra, por otra parte, las elevadas temperaturas pueden favorecer a la
perdida de analito volátiles.
3.6.1 En horno a elevadas temperaturas
El tratamiento de muestras a elevadas temperaturas es una práctica común que consiste en someter la muestra a
una temperatura controlada en un recipiente adecuado, generalmente un horno. La evaluación de la
mineralización se ha llevado a cabo tradicionalmente mediante la medición de la variación del peso de la
muestra a lo largo del tiempo. Una vez que el peso se mantiene constante, se considera que el proceso ha
finalizado. Sin embargo, uno de los mayores riesgos de error en este tipo de tratamiento es la posible pérdida de
analito, así como la interacción de las cenizas con las paredes del crisol.

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Para minimizar estos riesgos, se pueden emplear agentes estabilizantes (tales como el ácido sulfúrico, por su
capacidad de formar sulfatos pocos solubles, ácido nítrico y nitratos alcalino, por actuar como agentes
oxidantes, entre otros) para evitar la pérdida por volatilidad y/o la interacción con las paredes del crisol.
Además, es importante seleccionar cuidadosamente el material del crisol, la temperatura adecuada y el analito a
determinar, así como el constituyente de la matriz.
El método de combustión Schöniger es una técnica que se utiliza para descomponer muestras orgánicas y
biológicas, y se basa en la combustión de la muestra en un saco cerrado enriquecido con oxígeno.
Posteriormente, se recuperan las especies volátiles de los elementos de interés en disolución con la ayuda de un
absorbente adecuado.
Por otro lado, para evitar la pérdida de materia orgánica en la mineralización a altas temperaturas, se puede
emplear oxígeno activado. Este método de mineralización en plasma de oxígeno o baja temperatura permite una
oxidación más uniforme que con el oxígeno normal, permitiendo la eliminación de la materia orgánica a
temperaturas de aproximadamente 120°C, en comparación con los 500°C requeridos con oxígeno no activado.
Una de las variables que influyen en el proceso son: La relación cantidad de muestra/volumen del matraz,
solución absorbente, compuestos auxiliares para ayudar a la combustión. De las posibles fuentes de error, son
dos las principales fuentes de error de estos métodos de descomposición: la oxidación incompleta y la absorción
incompleta; en ambos casos se produce un error por defecto en la determinación del analito.
Aplicaciones, la combustión en frascos de oxigeno ha sido ampliamente utilizada para la determinación de
halógenos, azufre y fosforo en matrices orgánicas y en menor extensión se ha empleado para la determinación
de otros elementos como selenio, arsénico, entre otros.
3.6.2 Mineralización en plasma de oxígeno a baja temperatura
es un proceso que se basa en el uso de oxígeno activado, una mezcla de átomos de oxígeno, iones y moléculas
que se encuentra en un estado electrónico fundamental y/o excitado. Su alta reactividad permite que la muestra
se oxide de manera efectiva a temperaturas que, por lo general, no superan los 150 °C. Una de las principales
ventajas de esta técnica es la disminución drástica del riesgo de pérdida por volatilización.
3.7 Extracción secuencial: lixiviación
La mayoría de los métodos de tratamiento de muestras implican la disolución completa, aunque en algunos
casos la información necesaria justifica la necesidad de un tratamiento más vigoroso. Es importante determinar
la forma en que se encuentran los metales en el material particulado para obtener una información más precisa
sobre la toxicidad y la disponibilidad. Actualmente, se han desarrollado dos métodos para evaluar la movilidad
y disponibilidad de metales en muestras ambientales: la separación iónica de metales y los métodos más
complejos de extracción secuencial. Este último proporciona información valiosa, aunque requiere más tiempo
de tratamiento de muestra.
Se pueden separar iones de metales residuales y no residuales, tanto solubles como no solubles, mediante un
método avanzado de extracción secuencial con distintos reactivos y condiciones variables. Aunque este método
requiere un mayor tiempo de procesamiento de la muestra, proporciona información valiosa sobre la
disponibilidad biológica y fisicoquímica, la movilidad y el transporte de diversos metales.

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3.8 Preparación de suspensiones o “slurries”

Esta técnica no es adecuada para el análisis mediante todas las técnicas analíticas. Es útil en técnicas óptico-
espectroscópicas atómicas siempre y cuando se utilicen nebulizadores adecuados, pero no en técnicas
moleculares ni electro analíticas. Para preparar suspensiones, una de las formas más comunes es agitar 1 gramo
de muestra en una botella con 10 g de bolas de circonio y agente dispersante. Sin embargo, las principales
fuentes de error en el análisis de suspensiones son su falta de homogeneidad y estabilidad con el tiempo. La
obtención de suspensiones o slurries, en lugar de la disolución total de la muestra, está adquiriendo popularidad
en el campo de la Química Analítica ya que, además de reducir el tiempo de tratamiento de la muestra,
disminuye los riesgos de contaminación por parte de los reactivos empleados y evita el uso de reactivos
peligrosos, como el HF.
Los slurries o muestras en suspensión son muy útiles en técnicas óptico-espectroscópicas atómicas siempre y
cuando se utilicen nebulizadores, pero no en técnicas moleculares ni en técnicas electro analíticas. Actualmente,
se utilizan ampliamente en concentraciones no superiores al 1%. Las suspensiones o slurries se pueden preparar
de diversas formas. Una de las más convencionales consiste en agitar durante cierto tiempo 1 gramo de muestra
en una botella con 10 g de bolas de circonio, que es un material de extraordinaria dureza, y unos milímetros de
un agente dispersante. Los dispersantes más ampliamente utilizados son los diferentes tensioactivos iónicos,
como el hexametafosfato sódico y el fosfato de sodio al 10% para muestras orgánicas, como suelos y
sedimentos.
Las causas de errores más importantes en el análisis de suspensión se deben a la falta de homogeneidad y
estabilidad con el tiempo. Muchos expertos proponen la homogeneización de la suspensión antes del análisis, ya
sea por agitación o por el empleo de una sonda de ultrasonidos.

4. Técnicas de separación extractivas

En el tratamiento de muestras, a menudo es necesario separar los analitos del resto de la matriz en la que se
encuentran. Los objetivos de esta etapa de separación pueden ser diversos, entre ellos:
- Mejorar la sensibilidad mediante la preconcentración de los analitos.
- Mejorar la selectividad mediante la eliminación de interferencias.
- Facilitar la detección de los analitos en el nuevo medio donde se encuentran.

Las técnicas extractivas son una vía común para lograr esta separación en la química analítica, y se pueden
clasificar en distintas categorías:
- Si la muestra es sólida, se utiliza el proceso de lixiviación para llevar a cabo la extracción.
- Si la muestra está en estado líquido, la extracción puede realizarse mediante un disolvente líquido, un
fluido supercrítico o una fase sólida
4.1 Extracción liquido-liquido
La técnica de extracción líquido-líquido se basa en la diferencia de solubilidad de un soluto en dos fases
líquidas inmiscibles, y se rige por leyes de partición y equilibrios de distribución. Por lo general, se utiliza para
extraer especies de interés de un medio acuoso a un disolvente orgánico no miscible. En términos generales, las
moléculas no cargadas, no polares y de gran tamaño serán más solubles en los disolventes orgánicos. Para
extraer iones metálicos, se pueden formar quelatos neutros con un ligando o complejos voluminosos de

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asociación iónica para reducir su carga. Es importante considerar estos factores en la extracción líquido-líquido
para obtener resultados precisos y confiables.
4.2 Extracción con fluidos supercríticos
La extracción con fluidos supercríticos se basa en el uso de un gas comprimido y calentado hasta alcanzar una
temperatura y presión críticas en las que sus propiedades físicas se comportan como las de un líquido y un gas
simultáneamente. Un fluido supercrítico tiene la densidad de un líquido y la capacidad de difusión de un gas, lo
que le confiere un alto poder disolvente similar al de los líquidos, pero con ventajas de poder modificarse
fácilmente mediante la variación de la presión. El fluido supercrítico más utilizado es el CO 2, ya que es
químicamente inerte, no es inflamable y tiene un punto crítico fácilmente accesible. Sin embargo, su marcado
carácter apolar limita su uso a la extracción de analitos de baja polaridad, por lo que se puede agregar un
modificador para aumentar su polaridad y eficiencia de extracción. Los parámetros principales que afectan a la
extracción son la presión, la temperatura, la naturaleza del modificador y la velocidad del fluido. La recolección
de los analitos se puede realizar en un disolvente adecuado en un vial refrigerado o en una superficie sólida
refrigerada con nitrógeno líquido, y se pueden optimizar parámetros como la temperatura del disolvente, el
tiempo de contacto, el tamaño de las burbujas, el volumen del disolvente y la solubilidad del analito.

5. Procedimiento de preconcentración
El nivel de concentración en el que muchos analitos de interés se encuentran en la muestra de ordene de μg/l o
menor, lo que hace imposible la determinación directa de los mismos por las técnicas más habituales, este hecho
obliga a introducir una etapa previa de preparación de la muestra donde el analito se concentra con respecto a la
concentración que presenta en la muestra original. Esta etapa generalmente conlleva una separación del analito
del resto de la matriz. En todos los procesos de preconcentración, hay que tener en cuenta el factor de
preconcentración o enriquecimiento y la eficiencia.
Si los patrones y muestras tienen un comportamiento idéntico frente al proceso de preconcentración, los analitos
presentes en la muestra podrán cuantificarse utilizando como factor de corrección la eficiencia del proceso.
5.1 Transferencia de la matriz a otra fase
a) Evaporación del disolvente: Este procedimiento es sencillo y económico puesto que no requiere ninguna
instrumentación, consiste en calentar la disolución por encima de su punto de ebullición hasta llegar al volumen
deseado e incluso hasta sequedad, para después disolver el residuo en el mínimo volumen de disolvente
apropiado. Por otra parte, no se consiguen grandes factores de preconcentración puesto que ello conllevaría, en
la mayoría de las ocasiones, la obtención de matrices demasiado complejas y a un alto tiempo de análisis.
b) Diálisis: Este proceso permite eliminar parte de la matriz mediante su paso a través de una membrana
semipermeable. Los analitos de peso molecular menor o menor tamaño se separan de los componentes de
mayor tamaño. La diálisis no suele aplicarse a la concentración de analitos inorgánicos ya que son estos los que
atraviesan la membrana y se eliminan y diluyen en el disolvente externo.
5.2 Transferencia de los analitos a otra fase
a) Destilación y volatilización: se utiliza para separar componentes gaseosos o volátiles de la matriz
mediante calor o burbujeo de gas de arrastre. Los compuestos volatilizados se pueden absorber en una
disolución o condensar sobre una superficie enfriada.

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b) Extracción líquido-líquido: se utiliza para reconcentrar y separar analitos de la matriz. Esta técnica es
popular en la determinación de metales mediante técnicas colorimétricas.
c) Precipitación: se puede utilizar para reconcentrar analitos mediante precipitación directa o
coprecipitación. Generalmente se utiliza la coprecipitación de trazas inorgánicas mediante un
precipitado colector.
d) Utilización de reactivos quelantes o de cambio iónico: se utiliza para reconcentrar compuestos
inorgánicos cargando. Los materiales quelantes proporcionan una mayor selectividad al proceso.
e) Atrapamiento en adsorbentes: se utiliza un soporte absorbente para retener los analitos.
f) Atrapamiento criogénico: se utiliza para atrapar compuestos que están en fase de gas mediante
condensación en una trampa enfriada a la temperatura del nitrógeno líquido.
g) Deposición electroquímica: se puede depositar metales o óxidos mediante electrolisis y posterior
disolución en un medio ácido adecuado para el aislamiento y preconcentración de los analitos.

6. Tratamiento de la muestra para la determinación de especies

El análisis de las diferentes formas químicas en que se encuentra un analito en una muestra es complejo, pero es
importante debido a la dependencia entre la forma química y la toxicidad. No todos los compuestos de un
elemento tienen la misma toxicidad, y las formas orgánicas suelen ser más tóxicas que las formas inorgánicas.
También influyen los distintos estados de oxidación de un elemento. La extracción de las especies constituye el
punto de mayor dificultad en el proceso de evaluación de contenidos en especies. En muestras líquidas, la
discriminación de las especies de interés suele ser suficiente, aunque en muchos casos se precede de una etapa
de preconcentración. En el caso de muestras sólidas, las especies han de pasar a la disolución sin ningún tipo de
transformación química, lo que es crucial para el tratamiento de la muestra.
Los procedimientos habituales para la separación de las especies implican la combinación entre un método
cromatográfico para separar las especies y un detector atómico o de masas para determinar el elemento cuando
eludir cada una de especies. En ocasiones, se emplea una reacción química discriminatoria o bien una
extracción en fase sólida selectiva. La generación de hidruros mediante NaBH 4 es el más popular de los
métodos utilizados para convertir los analitos al estado de gas, lo que permite la separación de la matriz, una
preconcentración y una discriminación de las especies.
Para la especiación mediante cromatografía de gases de compuestos organoestánnicos, organoplúmbicos y
organomercúricos, se sigue un esquema general que implica la conversión de los compuestos orgánicos de
estaño en sus respectivos cloruros, la extracción en un disolvente orgánico polar, la derivación por diversos
métodos de las especies extraídas, la preconcentración de las especies derivatizadas por evaporación del
disolvente, la separación mediante una columna de cromatografía de gases y la detección por varios tipos de
detectores. El proceso es largo y complejo, pero necesario para la identificación y determinación de las
diferentes formas químicas en una muestra.
6.4 Hidrolisis enzimática
La hidrólisis enzimática se utiliza para romper compuestos y aislar componentes específicos de mezclas
orgánicas naturales o convertir un compuesto en uno con menor peso molecular, lo que facilita su
determinación cuantitativa. Las enzimas son útiles para la ruptura de proteínas y polisacáridos, y las proteasas
no específicas suelen utilizarse para romper proteínas en grupos amino-terminales. Es esencial optimizar
distintas variables, como la cantidad de enzima, la temperatura, el tiempo, el pH y la naturaleza del medio, para

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alcanzar la máxima actividad enzimática. Un ejemplo de aplicación exitosa de hidrólisis enzimática es la

identificación de especies de selenio, como trimetilselenio y selenometionina, en muestras de atún y mejillón
mediante el uso de subtilisina.

7. Conclusión
El análisis de muestras requiere en la mayoría de los casos un tratamiento previo para poder llevar a cabo su
análisis, incluso cuando se trata de muestras líquidas. Es fundamental tener una clara definición de los objetivos
y una selección adecuada de la metodología a emplear antes de realizar la toma de muestra. La etapa previa al
análisis incluye varias operaciones que pueden ser alteradas, obviadas o agrupadas, pero tienen características
que deben ser consideradas, como la variabilidad, la necesidad de participación humana y la fuente común de
errores. Los objetivos del tratamiento de muestra deben estar orientados a lograr una recuperación máxima del
analito y evitar posibles pérdidas del mismo. El tratamiento de muestras depende de la información que se desea
obtener y del analito a determinar, más que de la naturaleza de la muestra en sí misma. Los métodos de
tratamiento de muestras pueden ser clasificados en métodos tradicionales y modernos, y varían según la
naturaleza del analito y la muestra. Es importante conocer los métodos más comúnmente utilizados, los riesgos
de error y las precauciones a tomar, cómo evaluar la recuperación del analito, las características de los reactivos,
las posibilidades de automatización y los riesgos de explosión y peligro que algunos métodos de tratamiento de
muestra pueden implicar.

8. Referencias Bibliográficas
- -J. G. Dick. "Química Analítica".
- Scoog, West. "Fundamentos de Química Analítica". Vol. I.
- Kolthoff; Sandell; Meehan; Bruckenstein. "Análisis Químico Cuantitativo".
- L. F. Hamilion; S. G. Simpson. "Cálculos de Química Analítica".
- F. J. Welcher; R. B. Hahn. "Semimicro Qualitative Analysis".
- P. W. West; M. M. Vick. "Qualitative Analysis and Analytical. Chemical Separations".
- H. A. Laitinen; W. E. Harris. "Chemical Analysis"

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