Siembra e identificación de microorganismos mesófilos

Planting and identification of mesophilic microorganisms

Maria Camila Saavedra Llanos

Escuela de química- Universidad tecnológica de Pereira, Risaralda, Colombia.
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Resumen- los mesófilos son aquellos ciclo de la naturaleza , es por esto que los solemos
microorganismos que tienen gran facilidad para encontrar, en el agua, en la tierra, aire y otros
reproducirse, ya que se desarrollan teniendo habitan lugares específicos como en el interior de
presencia de oxígeno libre y a una temperatura seres vivos cuando nos referimos específicamente
fácil, pues su temperatura optima esta entre los 30 a los parásitos, nosotros los seres humanos
°C y 40ºC.esto permite que sea fácil su cultivo y contamos con una gran fauna bacteriana que está
crecimiento. En esta práctica se llevó a cabo la presente en muchos procesos biológicos.
siembra de mesófilos, utilizando cajas Petri y
realizando diferentes muestras, las cuales son El crecimiento de todos estos microorganismos va
microorganismos mesófilos del aire, de tejidos depender de distintos factores en donde la
vivos o mucosas y finalmente una tercera muestra temperatura es uno de los más influyente pues
de mesófilos en superficies inertes, para esto se estos tienen capacidad de desarrollarse a
utilizaron las cajas de Petri con agar Plate Count y temperaturas mínimas y algunos temperaturas
agua peptona, para una siembra y cultivo correcto. extremas, estos tienen un rango entre -5 y +80 °C,
Además se realizó la identificación de colonias las donde el crecimiento biológico tiene relación con
cuales son masas visibles que se dan por la la termolabilidad de las proteínas celulares y
división celular de los microorganismos. cuando hablamos de la temperatura mínima por el
punto de congelación del agua. Este factor es
Palabras claves- mesófilos, agar, siembra, importante ya que de acuerdo a esto se ha logrado
microorganismos, colonias. identificar los microoganismos procariotas
acuerdo a su crecimiento notable en las distintas
Abstract- Mesophiles are those microorganisms temperaturas.
that are very easy to reproduce, since they develop
with the presence of free oxygen and at an easy Los microorganismos mesófilos son de gran
temperature, since their optimum temperature is importancia a nivel industrial y durante esta
between 30 °C and 40 °C. This allows their práctica se busca aprender y observar el desarrollo
cultivation and growth to be easy. In this practice, de estos, se debe tener en cuenta que para su
the sowing of mesophiles was carried out, using crecimiento no se requiere de temperaturas muy
Petri dishes and making different samples, which altas, pues su temperatura optima es de 30 °C,
are mesophilic microorganisms from the air, from adicional se deber contar con un medio de cultivo
living tissues or mucous membranes and finally a que aporte lo necesario para el crecimiento de los
third sample of mesophiles on inert surfaces, for mesófilos, por lo cual es utilizado el Agar Plate
this the boxes were used. of Petri with plate count Count y agua peptona, ya que estos aportaran las
agar and peptone water, for correct sowing and fuentes de nitrógeno y vitaminas necesarias para
cultivation. el crecimiento y es así que la transparencia del
medio y el tamaño de las colonias facilitan los
Key words- mesophiles, agar, seeding, recuentos bacterianos. Facilitando así la calidad
microorganisms. de productos pues se estimara un número total de
bacterias encontradas por ejemplo en alimentos,
aunque es necesario saber que un recuento bajo de
INTRODUCCIÓN mesófilos no asegurara de manera completa el que
Los microorganismos los podemos encontrar en no haya presencia de toxinas o patógenos.
cualquier lugar algunos conocidos como
microbios de vida libre pues estos hacen parte del METODOLOGÍA
Se inicio con la recolección y posterior Se utilizo un hisopo estéril y se humedeció́ en
inoculación, para esto se utilizaron 3 cajas de agua peptona 0.1 % , después se frotó el hisopo en
Petri, cada una de ellas tendría una inoculación una superficie inerte y se realizó la siembra en
distinta. La primera se buscaba observar el superficie igual que en la parte anterior Figura 1.
crecimiento de mesófilos dispuestos en un Se tapó y se incubó a temperatura ambiente por 48
ambiente, el segundo de tejidos vivos o mucosas y horas.
el último de una superficie inerte.

Para esto las cajas contaban con un agar conocido

como Agar Plate Count compuesto de triptona, Identificación de mesófilos
extracto de levadura, glucosa y agar, el cual es un
medio muy utilizado para la enumeración de Pasadas las horas necesarias para el crecimiento
bacterias aerobias en aguas, aguas residuales y
de las bacterias se continuo con el reconocimiento
alimentos. Este medio tiene algunas limitaciones de estas, cada una de las colonias que se
de crecimiento y adicional no son de utilidad obtuvieron se clasificaron según su forma, la
cuando se trata de aerobios exigentes y para superficie y el borde. En la figura 2 se tiene una
anaerobios.
tabla la cual nos muestra las distintas formas que
podían identificar.
También fue necesario el agua peptona, este es un
medio de cultivo que su función es servir como
diluyente y permite el crecimiento adecuado de
microorganismos

Microorganismos mesófilos al aire

Se dispuso de una caja de Petri que continua el

Agar Plate Count, se llevó a un lugar de
preferencia, allí se removió la tapa y se dejo
expuesto durante 15 min y se incubo durante 48
horas.

Microorganismos mesófilos de tejidos vivos o Figura 2. Morfología y crecimiento de colonias.

mucosas

Se utilizo un hisopo estéril, este fue humedecido

con agua peptona al 0.1% el cual estaba contenido
Tinción de Gram
en un tubo de ensayo y se frotó sobre el tejido
vivo. Posterior a esto se realizó la siembra
utilizando técnica de siembra en superficie con Finalmente se realizó la tinción de Gram a las
hisopo como se observa en la figura 1. diferentes colonias obtenidas, con el fin de tener
un indicio de las posibles bacterias encontradas,
esta es de gran ayuda en la identificación de
formas y otras características con ayuda del
microscopio.

DISCUSIÓN Y RESULTADOS

Microorganismos mesófilos al aire

Figura 1. Técnica de siembra en superficie con
hisopo.
La caja de Petri fue colocada en la bodega de
reactivos, no se observó un crecimiento alto de
Microorganismos mesófilos de superficies colonias, se obtuvo solo una como se observa en
la Imagen 1.
 Microorganismos mesófilos de tejidos vivos o
mucosas

Para esto se realizó un frotis en un tejido vivo en

este caso de los pies, se obtuvo como resultado
muchas colonias las cuales se observan en la
Imagen 2 , donde se observan que son de
diferentes tamaños.

Imagen 1. Colonias presentes en medio de cultivo

expuesto al aire (bodega).

La morfología de la única colonia obtenida puede

ser descrita como circular, plana y redondeada, la
cual es de color blancuzco. No se observó
contaminantes ya que no se utilizó una siembra
especifica y solo se expuso a un medio, el poco
crecimiento de colonias pudo ser debido a que era
un lugar con muchos compuestos químicos que
pueden influir en el crecimiento de las bacterias o
que simplemente no se dejó el tiempo necesario Imagen 2. Colonias presentes en medio de cultivo
para el crecimiento por exposición al aire. de tejido vivo (pies).

Tinción de Gram ( mesófilos al aire) Al obtener una gran carga de microorganismos, la

identificación morfológicas es un poco mas
En la tinción de Gram para la única colonia del compleja, pero se lograron observar algunas
cultivo tomadas se observan Bacilos Gram colonias con forma circular, planas y redondeadas,
positivos, como se puede observar en la Imagen y otras puntiformes, planas y redondeadas.
1.1. es común encontrar bacilos gran positivos en Adicional a esto no se observaron diferentes
lugares al aire, tierra, agua y en vegetación, los colores, todas las observadas eran de color blanco.
cuales se caracterizan por ser microorganismos
del género saprofitos, lo cual hace referencia a que La gran cantidad de colonias obtenidas en este
viven sobre materia caso se debe a que los tejidos vivos se encuentran
expuestos al ambiente que de por si es donde
habitan las bacterias, además de que los tejidos de
los seres humanos por naturaleza tienen
microbiota, por esto se logra observar gran carga
microbiana.

Tinción de Gram (tejidos vivos o mucosas)

En la muestra tomada en tejidos vivos en este caso

los pies se observan microorganismos de
Estafilococos Gram positivos y Gram negativos
como se aprecia en la imagen 2.1.

La microbiota de la piel tiene una gran cantidad

Imagen 1.1 . Bacilos Gram positivos en muestra
de bacterias y es posible encontrar hasta mas de
de cultivo (Aire).
150 especies diferentes, es común encontrar
microbiota residente en la cual se encuentra
estafilococos y micrococos y microbiota carga bacteriana como se observa en la Imagen 3.
transitoria en la cual se pueden encontrar bacterias Estas colonias presentan forma irregular,
gran positivas como estreptococos. superficie plana convexa y borde espiculado.

Los estafilococos y micrococos son cocos Gram

positivos, donde uno de los mas importantes es el
S. aureus y Staphylococcus epidermis el cual es
uno de los más comunes y aislados en la piel,
estos pueden ser posiblemente los encontrados
durante la práctica. Lo hábitats de las bacterias
tienen una gran variabilidad de acuerdo a la zona
del cuerpo, y se espera que cuando un individuo
es colonizado por Staphylococcus este se
considere un microorganismo dominante
desplazando los demás microorganismos.

En las plantas de los pies es posible que

predominen bacterias como: Actinobacteria,
Firmicutes y Proteobacterius. De los más
abundantes, Propionibacterium, estreptococos, S. Imagen 3. Colonias presentes en medio de cultivo
aureus, Corynebacterium y Lactobacillus. Al tener de superficie (llaves de carro).
tanta diversidad, para saber adecuadamente de
cual se está observando se necesitan de imágenes
más especializadas.
Microorganismos mesófilos de superficies

La tinción de Gram para la muestra de superficies

en este caso las llaves del carro se observan
bacilos esporulados gran positivos, como se
observa en la Imagen 3.1

Imagen 2.1. Estafilococos Gram positivo y Gram

negativos en muestra de cultivo (pies).

Microorganismos mesófilos de superficies Imagen 3.1. bacilos Gram positivos en muestra de

inertes cultivo de superficie.

La muestra tomada en superficie se realizó en Es muy común encontrar gran cantidad de

unas llaves de carro, el cual presento una bacterias es objetos como llaves, pues diariamente
particularidad y es que la colonia creció a un solo son utilizados y no se tiene la precaución de estar
lado de la caja de Petri, adicional se obtuvo buena desinfectando objetos como estos o hacer un
lavado adecuado y constante de manos. Los https://www.lifeder.com/morfologia- colonial-
bacilos al ser bacterias saprofitas con muy bacteriana/
comunes encontrarlos en superficies, ya que
sobreviven a situaciones adversas. https://codeinep.org/wp-
content/uploads/2017/02/BACTERIAS_GRAM.pdf

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

- Es necesario tener un medio de cultivo

adecuado para obtener un buen
crecimiento de colonias y poder así hacer
la identificación más fácil de los
microorganismos.
- Los mesófilos son microorganismos de
fácil crecimiento gracias a sus
características y a que no necesitan de
temperaturas extremas para crecer y
sobrevivir, lo que permite que puedan
crecer en diferentes ambientes.
- La morfología de las colonias son de gran
ayuda para la determinación de una
especie bacteriana, pues gracias a las
características descriptivas se tiene un
indicio de la especie.
- En cualquier cultivo es posible encontrar
microorganismo patógenos, es por esto
que es necesario una buena desinfección
de objetos para así evitar posibles
enfermedades.

APLICACIONES INDUSTRIALES

El recuento de microorganismos mesófilos es de

gran utilidad para la estimación de número total
de bacterias que se encuentran en un alimento. Es
con esto que se espera determinar la calidad
sanitaria de diferentes productos y así saber tanto
las condiciones de materia prima y la forma en la
cual fueron manipulados durante la elaboración.
Es por esto que es de gran utilidad en todo lo que
incluye la industria alimentaria, pues de esta
forma se evita propagación de diferentes
enfermedades.

BIBLIOGRAFÍA

https://revistasocolderma.org/sites/default/files/microbi
ota_de_la_piel_el_ecosistema_cutaneo.pdf

https://www.innotec-laboratorios.es/analisis-de-
superficies-su-importancia-en-la-industria-alimentaria/