Preparacion de Medios de Cultivo
Preparacion de Medios de Cultivo
Preparacion de Medios de Cultivo
CULTIVO
o Utilización.
Medios Enriquecidos
Medios Selectivos
Medios Especiales
Medios de Transporte
Origen
Utilización
Composición
Consistencia
Medios de cultivo.
Son un método para la multiplicación de microorganismos, tales como
bacterias, hongos y parásitos, en el que se prepara un medio óptimo para favorecer el proceso
deseado. Son una mezcla de nutrientes que en concentraciones adecuadas y en condiciones
físicas optimas, permiten el crecimiento de los microorganismos.
Utilización.
Para el cultivo y cosecha de bacterias para la elaboración de productos biológicos.
Para el aislamiento de bacterias desde un material patógeno.
Diagnóstico clínico en medicina humana y veterinaria
Industria farmacéutica y biotecnológica
Industria alimenticia
Otras industrias y sectores productores (agricultura, química)
Control del medio ambiente
Investigaciones
Agar Sangre (AS): Permite el crecimiento de Gram (+) y (-) y permite observar el tipo de
hemólisis. Sirve para: Estreptococos, Estafilococos, Haemophillus influenzae,
Gardnerella vaginalis.
Agar Chocolate (AC): Este medio es más rico en nutrientes que el anterior y resulta
adecuado para el cultivo de organismos delicados, por ejemplo, Estreptococos.
Müller Hinton (MH): Es utilizado para antibiogramas porque desarrollan tanto Gram (+)
y (-).
Agar sangre con Violeta Cristal: Sirve para la diferenciación de Estreptococos cuando en la
muestra pueden existir otros gérmenes.
Medios Especiales: Son aquellos en los que se ponen de relieve propiedades que un
determinado tipo de microorganismo posee.
Sabouraud (Sap): Este medio tiene pH bajo que facilita el desarrollo de hongos e inhibe
el desarrollo de la mayoría de las bacterias.
Lowenstein Jensen y Middlebrook: Ambos medios contienen glicerol y verde malaquita
constituyentes que favorecen el crecimiento de la Micobacterias como el
Mycobacterium tuberculosis.
Agar con Tiosulfito, Citrato, Sales Biliares y Sacarosa (TCBS): Para desarrollo de Vibrio
cholerae.
Kligler o TSI (agar triple, azúcar, hierro): Sirve para observar la fermentación de
azúcares y producción de ácido sulfhídrico.
Urea: Para observar la utilización de urea.
Citrato: Para ver la utilización de citrato.
Indol: Para observar el uso de triptófano.
Fenilalanina: Para ver la utilización de fenilalanina.
Medios de Transporte:
Los medios de cultivo se clasifican según diferentes criterios, pero los más importantes son
aquellos que se basan en:
a) Origen
b) Utilización
c) Composición
d) Consistencia
a) Origen
1-. Medios Naturales: Son los preparados a partir de sustancias
2-. Medios Sintéticos: Son los medios que contiene una composición
b) Utilización
1-. Medios Comunes: Son aquellos que poseen los componentes mínimos para que pueda
producirse el crecimiento de baterías que no necesiten requerimientos especiales. El medio
más conocido de este grupo es el agar nutritivo, que resulta de la adición del agar caldo
nutritivo.
2-. Medios de Enriquecimiento: Son aquellos que, además de las sustancias nutritivas
normales, incorporan una serie de factores indispensables para el crecimiento de
microorganismos exigentes. Este enriquecimiento se hace por adición de sangre u otros
productos biológicos (sangre, suero, leche, huevo, etc.) que aportan dichos factores. En
ocasiones es posible añadir suplementos artificiales a los medios para producir un
enriquecimiento del mismo. El gonococo, por ejemplo, necesita de cistina y cisteína para su
crecimiento.
3-. Medios Selectivos: Son los medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas
bacterias contenidas en una población microbiana. El fundamento de estos medios consiste en
facilitar nutricionalmente el crecimiento de una población microbiana específica. Un ejemplo
de medio selectivo es el caldo selenito, que se utiliza para favorecer el crecimiento de
salmonellas y frenar el resto de entero bacterias.
4-. Medios Inhibidores: Cuando las sustancias añadidas a un medio selectivo impiden
totalmente el crecimiento de una población microbiana, se denomina inhibidor. Los medios
inhibidores podrían considerarse como una variante más restrictiva de los medios selectivos.
Los medios inhibidores se consiguen habitualmente por la adición de sustancias
antimicrobianas o de cualquier otra que inhiba completamente el desarrollo de una población
determinada. Un medio inhibidor es el MacConkey que permite el crecimiento de los
gérmenes Gram negativos e impide el crecimiento de Gram positivos.
5-. Medios Diferenciales: se utilizan para poner en evidencia características bioquímicas que
ayuden a diferenciar géneros o especies. La adición de un azúcar fermentable o sustrato
metabolizable se utilizan para este fin. El medio MacConkey es un medio diferencial porque
permite distinguir los gérmenes que fermentan la lactosa de aquellos que no lo hacen.
También lo son el C.L.E.D (Agar cistina-lactosa deficiente en electrólitos – lactosa+/lactosa -), el
agar sangre (tipo hemólisis), el SS (Salmonella Shigella Agar que es doblemente diferencial) etc.
6-. Medios de Identificación: Son destinados a comprobar alguna cualidad específica que
puede servirnos para reconocer la identidad de un microorganismo. Estos medios han de
poseer los elementos necesarios para asegurar el crecimiento de los microorganismos, el
sustrato específico que vaya a ser metabolizado y el indicador que nos muestre el resultado. El
agar Kligler, el medio Simmons y en general, cualquier medio al que se le haya añadido un
elemento diferencial de un microorganismo, son medios utilizados en identificación.
7-. Medios de Multiplicación: Sirven para obtener en gran cantidad de células ante de un
microorganismo ya aislado. Se emplean en la obtención de vacunas, en la investigación y en la
industria. Los medios más adecuados para la multiplicación suelen ser líquidos. El caldo-
infusión cerebro-corazón (BHI), es un ejemplo típico de estos medios.
8-. Medios de Conservación: Se utilizan para conservar una cepa que, por diversas razones nos
interese mantener. Fundamentalmente se utilizan como controles de calidad de las pruebas y
reactivos utilizados en el laboratorio de microbiología. En el laboratorio se pueden conservar
las cepas de tres formas:
9-. Medios de transporte: Se usan para el transporte de muestras clínicas que no pueden
sembrarse inmediatamente. Su utilización debe hacerse introduciendo la torunda con la que se
obtuvo la muestra en el interior del medio (generalmente en un tubo). Son ejemplos típicos de
este grupo los medios de Stuart-Amies,Cary-Blair, etc
c) Composición
Según las sustancias que entren a formar parte en su composición,
1-. Medios Complejos: Fueron los primeros utilizados, y los más empleados se preparan a
partir de tejidos animales, y más raramente de vegetales. Su composición no es exactamente
definida, y por consiguiente no es rigurosamente constante. Esto puede tener ciertos
inconvenientes en condiciones experimentales, donde la reproductibilidad no podrá ser
exacta. En la práctica corriente estos medios dan excelentes resultados y son los más
empleados.
3-. Medios Semisintéticos: El gran número de factores de crecimiento exigidos para ciertos
gérmenes hace que la fabricación de un medio sintético para estos gérmenes sea imposible o
demasiado cara. En este caso se aportan los factores de crecimiento bajo la forma de un
extracto orgánico complejo (extracto de levadura, extracto de tejidos, etc.). Ciertos gérmenes
no crecen en ningún medio por muy enriquecido que esté éste, haciéndolo exclusivamente en
células vivas con unas características determinadas. Ejemplos de este tipo son, aparte de los
virus, las Chlamydias, Rickettsias, etc.
d) Consistencia
1-. Medios líquidos: Son los que se presentan en este estado, denominándose por esta razón
caldos. El medio líquido más utilizado es el llamado caldo nutritivo, compuesto principalmente
de extracto de carne, peptona y agua. Se utiliza fundamentalmente cuando se pretende la
obtención de una suspensión bacteriana de una determinada concentración.
2-. Medios sólidos: Se preparan a partir de los medios líquidos, agregándoles un agente
gelificante. Los más utilizados son la gelatina y el agar. Gelatina: Es una proteína animal
obtenida de los huesos. Tiene el inconveniente de que es hidrolizada por muchas bacterias, y
además su uso está muy limitado porque su punto de fusión es bajo (licúa a temperatura
ambiente) razón por la que no puede utilizarse para cultivos a 37ºC, que es la tempera óptima
de crecimiento para muchos microorganismos. Agar-agar: Es un polímero d3e azúcares
obtenido de algas marinas. Se trata de una molécula insoluble en agua pero soluble en agua
caliente; una solución al 1,5% p/v forma un gel firme entre 32 y 39ºC y no se funde por debajo
de 85ºC. Funde a 90ºC y solidifica una vez fundido alrededor de los 45ºC. Tiene el
inconveniente de que introduce compuestos orgánicos indefinidos que pueden falsear los
resultados de las necesidades nutritivas de un microorganismo.
3-. Medios semisólidos: Se preparan a partir de los medios líquidos, agregando a éstos un
agente solidifícate en una proporción menor que para preparar medios sólidos. Uno de sus
usos es la investigación de la movilidad de las bacterias
BIBLIOGRAFIA
Clasificación DE Los Medios DE Cultivo [Internet]. Idoc.pub. [citado el 16 de abril de
2022]. Disponible en: https://idoc.pub/documents/clasificacion-de-los-medios-de-
cultivo-dvlrjk9v0z4z
CUESTIONARIO
1. Diga que medios de cultivo utilizaría para cultivar los siguientes
microorganismos