Preparacion de Medios de Cultivo

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PREPARACION DE MEDIOS DE

CULTIVO

NOMBRE: ESTEFANI NICOL ARAUCO MARQUEZ.


GRUPO: I2.
FECHA: 16/04/2022.
Índice
 Medios de cultivo.

o Utilización.

o Clasificación de los Medios de Cultivo

 Medios Enriquecidos

 Medios Selectivos

 Medios Para Microorganismos Anaerobios

 Medios Especiales

 Medios de Identificación y/o Pruebas Bioquímicas:

 Kligler o TSI (agar triple, azúcar, hierro):

 Medios de Transporte

 Origen

 Utilización

 Composición

 Consistencia
Medios de cultivo.
Son un método para la multiplicación de microorganismos, tales como
bacterias, hongos y parásitos, en el que se prepara un medio óptimo para favorecer el proceso
deseado. Son una mezcla de nutrientes que en concentraciones adecuadas y en condiciones
físicas optimas, permiten el crecimiento de los microorganismos. 

Utilización. 
 Para el cultivo y cosecha de bacterias para la elaboración de productos biológicos.
 Para el aislamiento de bacterias desde un material patógeno.
 Diagnóstico clínico en medicina humana y veterinaria
 Industria farmacéutica y biotecnológica
 Industria alimenticia
 Otras industrias y sectores productores (agricultura, química)
 Control del medio ambiente
 Investigaciones

 Clasificación de los Medios de Cultivo

Medios Enriquecidos: Favorece el crecimiento de un determinado tipo de microorganismo, sin


llegar a inhibir totalmente el crecimiento del resto

 Agar Sangre (AS): Permite el crecimiento de Gram (+) y (-) y permite observar el tipo de
hemólisis. Sirve para: Estreptococos, Estafilococos, Haemophillus influenzae,
Gardnerella vaginalis.
 Agar Chocolate (AC): Este medio es más rico en nutrientes que el anterior y resulta
adecuado para el cultivo de organismos delicados, por ejemplo, Estreptococos.
 Müller Hinton (MH): Es utilizado para antibiogramas porque desarrollan tanto Gram (+)
y (-).

Medios Selectivos: Permiten el crecimiento de un determinado tipo de microorganismos,


inhibiendo el desarrollo de los demás

 Mac Conkey (Mac): Útil para Enterobacterias


 Medio de Cisteina y Lactosa deficiente en electrolitos (CLDE): Para bacterias patógenas
en orina.
 Azul de Metileno (AME): Los tres son selectivos para Enterobacterias, contienen
lactosa y un indicador, por lo tantopermiten la diferenciación entre gérmenes que
fermentan y que no fermentan la lactosa, una reacción importante para la
identificación de las Enterobacterias.
 Salmonella- Shigella (S-S): Para desarrollo de Salmonella o Shigella.
 Thayer Martin (TM): Para desarrollo de Neisseria Gonorrhoeae y Neisseria
Meningitidis.

Agar sangre con Violeta Cristal: Sirve para la diferenciación de Estreptococos cuando en la
muestra pueden existir otros gérmenes.

Medios Para Microorganismos Anaerobios:


 Caldo de Tiogliconato:
 Caldo para Anaerobios delicados (CAD): Ambos medios contienen agentes reductores
que ayudan a mantener el estado anaerobio, sirven para Clostridium.

Medios Especiales: Son aquellos en los que se ponen de relieve propiedades que un
determinado tipo de microorganismo posee.

 Sabouraud (Sap): Este medio tiene pH bajo que facilita el desarrollo de hongos e inhibe
el desarrollo de la mayoría de las bacterias.
 Lowenstein Jensen y Middlebrook: Ambos medios contienen glicerol y verde malaquita
constituyentes que favorecen el crecimiento de la Micobacterias como el
Mycobacterium tuberculosis.
 Agar con Tiosulfito, Citrato, Sales Biliares y Sacarosa (TCBS): Para desarrollo de Vibrio
cholerae.

Medios de Identificación y/o Pruebas Bioquímicas:

 Kligler o TSI (agar triple, azúcar, hierro): Sirve para observar la fermentación de
azúcares y producción de ácido sulfhídrico.
 Urea: Para observar la utilización de urea.
 Citrato: Para ver la utilización de citrato.
 Indol: Para observar el uso de triptófano.
 Fenilalanina: Para ver la utilización de fenilalanina.

Medios de Transporte:

 Stuart: Para transportar las muestras hasta el laboratorio.

Los medios de cultivo se clasifican según diferentes criterios, pero los más importantes son
aquellos que se basan en:

a) Origen

b) Utilización

c) Composición

d) Consistencia

a) Origen
1-. Medios Naturales: Son los preparados a partir de sustancias

naturales de origen animal o vegetal como lo pueden ser extractos

de tejidos o infusiones, cuya composición química se conoce exactamente

2-. Medios Sintéticos: Son los medios que contiene una composición

química definida cualitativa y cuantitativamente. Se utilizan para

obtener resultados reproducibles.

3-. Semisintéticos: Son los sintéticos a los que se le añaden factores


de crecimiento bajo una forma de un extracto orgánico complejo, como

por ejemplo, la levadura. 

b) Utilización
1-. Medios Comunes: Son aquellos que poseen los componentes mínimos para que pueda
producirse el crecimiento de baterías que no necesiten requerimientos especiales. El medio
más conocido de este grupo es el agar nutritivo, que resulta de la adición del agar caldo
nutritivo.

2-. Medios de Enriquecimiento: Son aquellos que, además de las sustancias nutritivas
normales, incorporan una serie de factores indispensables para el crecimiento de
microorganismos exigentes. Este enriquecimiento se hace por adición de sangre u otros
productos biológicos (sangre, suero, leche, huevo, etc.) que aportan dichos factores. En
ocasiones es posible añadir suplementos artificiales a los medios para producir un
enriquecimiento del mismo. El gonococo, por ejemplo, necesita de cistina y cisteína para su
crecimiento.

3-. Medios Selectivos: Son los medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas
bacterias contenidas en una población microbiana. El fundamento de estos medios consiste en
facilitar nutricionalmente el crecimiento de una población microbiana específica. Un ejemplo
de medio selectivo es el caldo selenito, que se utiliza para favorecer el crecimiento de
salmonellas y frenar el resto de entero bacterias.

4-. Medios Inhibidores: Cuando las sustancias añadidas a un medio selectivo impiden
totalmente el crecimiento de una población microbiana, se denomina inhibidor. Los medios
inhibidores podrían considerarse como una variante más restrictiva de los medios selectivos.
Los medios inhibidores se consiguen habitualmente por la adición de sustancias
antimicrobianas o de cualquier otra que inhiba completamente el desarrollo de una población
determinada. Un medio inhibidor es el MacConkey que permite el crecimiento de los
gérmenes Gram negativos e impide el crecimiento de Gram positivos.

5-. Medios Diferenciales: se utilizan para poner en evidencia características bioquímicas que
ayuden a diferenciar géneros o especies. La adición de un azúcar fermentable o sustrato
metabolizable se utilizan para este fin. El medio MacConkey es un medio diferencial porque
permite distinguir los gérmenes que fermentan la lactosa de aquellos que no lo hacen.
También lo son el C.L.E.D (Agar cistina-lactosa deficiente en electrólitos – lactosa+/lactosa -), el
agar sangre (tipo hemólisis), el SS (Salmonella Shigella Agar que es doblemente diferencial) etc.

 6-. Medios de Identificación: Son destinados a comprobar alguna cualidad específica que
puede servirnos para reconocer la identidad de un microorganismo. Estos medios han de
poseer los elementos necesarios para asegurar el crecimiento de los microorganismos, el
sustrato específico que vaya a ser metabolizado y el indicador que nos muestre el resultado. El
agar Kligler, el medio Simmons y en general, cualquier medio al que se le haya añadido un
elemento diferencial de un microorganismo, son medios utilizados en identificación.

7-. Medios de Multiplicación: Sirven para obtener en gran cantidad de células ante de un
microorganismo ya aislado. Se emplean en la obtención de vacunas, en la investigación y en la
industria. Los medios más adecuados para la multiplicación suelen ser líquidos. El caldo-
infusión cerebro-corazón (BHI), es un ejemplo típico de estos medios.
8-. Medios de Conservación: Se utilizan para conservar una cepa que, por diversas razones nos
interese mantener. Fundamentalmente se utilizan como controles de calidad de las pruebas y
reactivos utilizados en el laboratorio de microbiología. En el laboratorio se pueden conservar
las cepas de tres formas:

 Haciendo pases periódicos de placa a placa.


 Mediante liofilización de una suspensión bacteriana
 Congelando las cepas en leche descremada estéril al 0,1%.

9-. Medios de transporte: Se usan para el transporte de muestras clínicas que no pueden
sembrarse inmediatamente. Su utilización debe hacerse introduciendo la torunda con la que se
obtuvo la muestra en el interior del medio (generalmente en un tubo). Son ejemplos típicos de
este grupo los medios de Stuart-Amies,Cary-Blair, etc

c) Composición
Según las sustancias que entren a formar parte en su composición,

los medios de cultivo pueden ser clasificados en:

1-. Medios Complejos: Fueron los primeros utilizados, y los más empleados se preparan a
partir de tejidos animales, y más raramente de vegetales. Su composición no es exactamente
definida, y por consiguiente no es rigurosamente constante. Esto puede tener ciertos
inconvenientes en condiciones experimentales, donde la reproductibilidad no podrá ser
exacta. En la práctica corriente estos medios dan excelentes resultados y son los más
empleados.

2-. Medios Sintéticos: Son aquellos que contienen en su composición exclusivamente


sustancias químicas conocidas y disueltas en agua destilada en proporciones determinadas,
resultando un medio de composición perfectamente definida.

3-. Medios Semisintéticos: El gran número de factores de crecimiento exigidos para ciertos
gérmenes hace que la fabricación de un medio sintético para estos gérmenes sea imposible o
demasiado cara. En este caso se aportan los factores de crecimiento bajo la forma de un
extracto orgánico complejo (extracto de levadura, extracto de tejidos, etc.). Ciertos gérmenes
no crecen en ningún medio por muy enriquecido que esté éste, haciéndolo exclusivamente en
células vivas con unas características determinadas. Ejemplos de este tipo son, aparte de los
virus, las Chlamydias, Rickettsias, etc. 

d) Consistencia

1-. Medios líquidos: Son los que se presentan en este estado, denominándose por esta razón
caldos. El medio líquido más utilizado es el llamado caldo nutritivo, compuesto principalmente
de extracto de carne, peptona y agua. Se utiliza fundamentalmente cuando se pretende la
obtención de una suspensión bacteriana de una determinada concentración.

2-. Medios sólidos: Se preparan a partir de los medios líquidos, agregándoles un agente
gelificante. Los más utilizados son la gelatina y el agar. Gelatina: Es una proteína animal
obtenida de los huesos. Tiene el inconveniente de que es hidrolizada por muchas bacterias, y
además su uso está muy limitado porque su punto de fusión es bajo (licúa a temperatura
ambiente) razón por la que no puede utilizarse para cultivos a 37ºC, que es la tempera óptima
de crecimiento para muchos microorganismos. Agar-agar: Es un polímero d3e azúcares
obtenido de algas marinas. Se trata de una molécula insoluble en agua pero soluble en agua
caliente; una solución al 1,5% p/v forma un gel firme entre 32 y 39ºC y no se funde por debajo
de 85ºC. Funde a 90ºC y solidifica una vez fundido alrededor de los 45ºC. Tiene el
inconveniente de que introduce compuestos orgánicos indefinidos que pueden falsear los
resultados de las necesidades nutritivas de un microorganismo. 

3-. Medios semisólidos: Se preparan a partir de los medios líquidos, agregando a éstos un
agente solidifícate en una proporción menor que para preparar medios sólidos. Uno de sus
usos es la investigación de la movilidad de las bacterias

BIBLIOGRAFIA
 Clasificación DE Los Medios DE Cultivo [Internet]. Idoc.pub. [citado el 16 de abril de
2022]. Disponible en: https://idoc.pub/documents/clasificacion-de-los-medios-de-
cultivo-dvlrjk9v0z4z

 Tipos y medios de cultivo [Internet]. scientist-site. [citado el 16 de abril de 2022].


Disponible en: https://labdemicrobiologia.wixsite.com/scientist-site/tipos-y-medios-
de-cultivo

CUESTIONARIO
1. Diga que medios de cultivo utilizaría para cultivar los siguientes
microorganismos

Agente etiológico Medio Muestra

Staphylococcus Agar salado manitol Secreción nasal,


aureus muestra de tejido

Neisseria Cultivo, thayer Cervicales y rectales


gonorrhoeae martin, agar
chocolate

Streptococcus Agar en sangre Amígdalas hisopos


pyogenes cultivo alginato

Salmonella typhi Agua peptonada y Muestra hisopo


fructosa

Escherichia coli Agar macconkey Muestra de heces

Mycobacterium Lowesnstein jeneen Muestra orina


tuberculosis

Clostridium tetani c.botulium Muestra de heces

Neisseria Medios con sangre Por punción lumbar


meningitidis

Pseudomona Agar sangre Muestra sangre y


aeroginosa liquido corporal

Giardia lamblia invitro Materia fecal

1. Llene la siguiente tabla:


Muestra biológica Medio

Heces con sospecha de cólera Agua peptonada alcalina

Sangre con sospecha de salmonella Agua peptonada y tamponada

Aspirado traqueal Agar sangre

Secreción faríngea Cultivo de muestra faringea

Secreción de herida postquirúrgica Cultivo de secreción, con hisopo tambien


(paciente que recibe ciprofloxacina y con jeringa y aguja para entrar pus
ceftriaxona)

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