Año del Fortalecimiento de la Soberanía Nacional"

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

FACULTAD DE CIENCIAS

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA

LABORATORIO DE QUÍMICA ANALITICA

INFORME DE LA PRÁCTICA N°9 (GRUPO G*)

Determinación de la longitud de onda de máxima absorbancia

PROFESORA: Dra. Carmen Alicia Rodríguez Best

MESA: 3

INTEGRANTES: CÓDIGO:

- Aliaga Rueda, Silvana Miyuit 20210987

- Conejo Fernandez Cielo Kristal 20200166
- Llacchuarimay Palomino, Nell Cinthya 20200183
- Miranda Horna, Roberto Carlos 20200190 (Coordinador)

Fecha de práctica: 13/12/2022

Fecha de entrega: 19/12/2022

LA MOLINA-LIMA-PERÚ
2022
 ÍNDICE

I. INTRODUCCIÓN 3
1.1 Objetivos 3
II. REVISIÓN DE LITERATURA 3
Espectrofotometría de absorción 3
Espectrofotometría de absorción molecular uv-visible 4
Absorbancia y transmitancia 4
Ley de Lambert y Beer 4
III. MATERIALES Y MÉTODOS 5
3.1 Determinación de la longitud de onda de máxima absorbancia 5
3.2 Determinación espectrofotométrica del manganeso 5
IV. RESULTADOS Y DISCUSIONES 6
4.1 Determinación de la longitud de onda de máxima absorbancia 6
4.2 Determinación espectrofotométrica del manganeso 7
4.3 Muestra problema 8
4.4 Discusión de resultados 8
V. CONCLUSIONES 8
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 9

2
I. INTRODUCCIÓN

Se denomina espectrofotometría a la medición de la cantidad de energía radiante que

absorbe un sistema químico en función de la longitud de onda de la radiación, y a las
mediciones a una determinada longitud de onda, este es uno de los métodos de análisis
más usados, y se basa en la relación que existe entre la absorción de luz por parte de un
compuesto y su concentración.

La teoría ondulatoria de la luz propone la idea de que un haz de luz es un flujo de cuantos
de energía llamados fotones; la luz de una cierta longitud de onda está asociada con los
fotones, cada uno de los cuales posee una cantidad definida de energía. Un espectro de
absorción es un gráfico de absorbancia con respecto a la longitud de onda. La absorbancia
también puede ser graficada contra el número de onda o de la frecuencia. Una gráfica de
absortividad molar como función de la longitud de onda es independiente de la
concentración. Este tipo de gráficas de espectros son características para una molécula
determinada y en ocasiones como auxiliares en la identificación o confirmación de la
identidad de especies particulares. El color de una disolución está relacionado con su
espectro de absorción (SKOOG, 2015).

1.1 Objetivos

● Hallar la longitud de onda de máxima absorbancia.

● Calcular la concentración de manganeso en una muestra.
● Calcular la concentración de manganeso y cromo en una muestra.

II. REVISIÓN DE LITERATURA

Espectrofotometría de absorción

Es la medida de la cantidad de luz absorbida por un compuesto en función de la longitud

de onda de la luz. En general, se irradia una muestra con una fuente de luz y se mide la
cantidad de luz transmitida a varias longitudes de onda, utilizando un detector y
registrando el fenómeno en un gráfico. Al contrario que en los ensayos químicos, la
mayoría de las técnicas espectroscópicas no son destructivas, es decir, no destruyen las
muestras durante el análisis; se pueden realizar diferentes tipos de espectros sin pérdida o
perdiendo muy poco de muestra (Gary, 2009).

3
Espectrofotometría de absorción molecular uv-visible

La absorción de este tipo de radiación se produce como consecuencia de la excitación de

los electrones externos de los átomos. Nos concentramos en la absorción que presentan los
compuestos orgánicos, aunque existen aniones inorgánicas capaces de absorber
(carbonato,nitrato) (Skoog, 2001).

Para que una molécula sea capaz de absorber en la región UV-VIS ha de tener grupos
cromóforos. Estos grupos son grupos funcionales que contienen dobles o triples enlaces,
dobles enlaces conjugados, etc (alquenos, alquinos, carbonilo, carboxilo). Otros grupos
que contribuyen a las características de absorción de una molécula orgánica son los
auxocromos. Un auxocromo es un grupo funcional que por si no absorbe pero que presenta
la capacidad de modificar la absorción del cromóforo al que esté unido. Estos suelen ser
sustituyentes con pares electrónicos sin compartir (oxígeno, halógenos, azufre y nitrógeno)
(Skoog, 2001).

Absorbancia y transmitancia

Cuando un haz de luz de intensidad Io incide sobre una cubeta cuadrada que contiene una
solución coloreada que absorbe luz a una determinada longitud de 2onda, se produce en la
solución un proceso de absorción, y el haz de luz que sale después de atravesar la cubeta
tiene una intensidad menor, Y se define como transmitancia la relación de luz incidente y
transmitida (Garcia S., 2006).
Si se conoce la intensidad de la luz que incide en la solución y se puede medir la
intensidad de la que sale, se puede calcular la luz que absorbe la solución o
Absorbancia(A). La luz absorbida depende de la concentración que hay en una solución de
compuestos capaces de absorber esa longitud de onda (Garcia S., 2006).

A = −log(T)
Ley de Lambert y Beer

Esta ley expresa la relación entre absorbancia de luz monocromática (de longitud de onda
fija) y concentración de un cromóforo en solución (Sierra, 2010):

A = ε.c.l

4
 La absorbancia de una solución es directamente proporcional a su concentración(C), a
mayor número de moléculas mayor interacción de la luz con ellas; también depende de la
distancia que recorre la luz por la solución(l), al igual que con la concentración, cuanto
mayor distancia recorre la luz por la muestra más moléculas se encontrará; y, por último,
depende de (ε), una constante de proporcionalidad denominada coeficiente de extinción-
que es específica de cada cromóforo. (Sierra, 2010) Como A es adimensional, las
dimensiones de ε dependen de las de c y l. La segunda magnitud (l) se expresa siempre en
cm mientras que la primera (c) se hace, siempre que sea posible, en M, con lo que las
dimensiones de ε resultan ser M-1.cm-1. Este coeficiente así expresado, en términos de
unidades de concentración molar (o un submúltiplo apropiado), se denomina coeficiente
de extinción molar (εM) (Sierra, 2010).

III. MATERIALES Y MÉTODOS

3.1 Determinación de la longitud de onda de máxima absorbancia

3.1.1. Materiales y Equipos

● Disolución de KMnO4 0002 M estandarizado.

● Disoluciones de estándares de KMnO4
● Vasos de precipitado
● Pipetas volumétricas
● Fiolas
● Pizeta con agua destilada
● Espectrofotómetro UV-VIS

3.1.2. Metodología

● Calibrar el espectrofotómetro.
● Preparar los estándares de KMnO4 : 0; 2x10-4; 4x10-4 y 6 x 10-4 M en fiolas de
10 mL.
● Enrasar y homogeneizar las disoluciones.
● Medir la absorbancia de las disoluciones a las longitudes de onda ( λ)
indicadas.
● Anotar las mediciones.

5
 3.2 Determinación espectrofotométrica del manganeso

3.2.1. Materiales y Equipos

● Disolución de 20 mg Mn/L
● Vasos de precipitado
● Pipetas volumétricas
● Fiolas
● Pizeta con agua destilada
● Balanza analítica
● Espectrofotómetro UV-VIS

3.2.2. Metodología

 Preparar los estándares de 0, 2, 4, 6, 8 y 10 mg Mn/L a partir de la disolución

de 20 mg Mn/L, en fiolas de 10 mL, respectivamente.
 Enrasar y homogeneizar las disoluciones.
 Medir la absorbancia de las disoluciones.
 Anotar las mediciones.

IV. RESULTADOS Y DISCUSIONES

4.1 Determinación de la longitud de onda de máxima absorbancia

Tabla 1. Absorbancia de KMnO4

ABSORBANCIA
λ (nm)
0 2x10-4 4x10-4 6x10-4
506 0 0,296 0,661 1,010
510 0 0,310 0,697 1,069
515 0 0,310 0,700 1,070
517 0 0,322 0,718 1,100
520 0 0,349 0,784 1,143
522 0 0,368 0,830 1,265
524 0 0,390 0,881 1,338
526 0 0,400 0,909 1,373
528 0 0,402 0,935 1,391
530 0 0,393 0,895 1,359
535 0 0,355 0,806 1,220
540 0 0,355 0,806 1,220

6
 545 0 0,384 0,870 1,316

Figura 1. Espectro de absorción del KMnO4.

4.2 Determinación espectrofotométrica del manganeso

Tabla 2. Absorbancia para distintas concentraciones de Mn.

Conc. mg Mn/L Absorbancia

0 0
2 0,084
4 0,170
6 0,259
8 0,350
10 0,454

7
 Figura 2. Absorbancia del Mn.

4.3 Muestra problema

Una muestra de 0,5208 g se disuelve y el manganeso presente se oxida a

permanganato, luego la disolución se diluyó con H SO 0,25 M en un matraz
2 4

volumétrico de 100 mL. La lectura de absorbancia a 528 nm en una celda de 1 cm es

0,418. Calcule el %p/p Mn en la muestra.
Según ecuación de la curva de calibración:
−3
A=0,0451(mg Mn / L)−6 x 10

0,418=0,0451(mg Mn/ L)−6 x 10−3

mg Mn/ L=9,401

(mg Mn/ L)(100 mL)=0,9401 mg Mn

0,9401mg
%p / p Mn=
0,5208 g
0,9401mg
%p / p Mn= x 100 %
0,5208 g
0,1805 %p / p Mn.

4.4 Discusión de resultados

● En la Figura 1, se puede observar el espectro de absorción obtenido del KMnO4,

usando los datos de la Tabla 1. Teniendo que a mayor concentración de KMnO4 el
barrido mostrará una gráfica con una mayor amplitud, siendo este el caso de la
concentración de 6x10^-4. Del espectro de absorción puede seleccionarse el valor de
longitud de onda para el cual la absorbancia es máxima, siendo en este caso el valor
de 528 nm.

8
 ● Con los datos de la Tabla 2, los cuales son disoluciones de estándares de
concentraciones conocidas y crecientes de manganeso. Se elaboró la curva de
calibración, Figura 2; la cual arrojó la ecuación de la mejor línea recta que pasa por
los puntos. Al momento de realizar la medición de una muestra, lo que se obtiene es
una respuesta instrumental que se interpola en la recta de calibración, esto último
permite obtener la concentración del analito (AGQ labs, 2017).

V. CONCLUSIONES

Se pudo determinar la longitud de onda de máxima absorbancia la cual fue 528 nm, según
el espectro de absorción; así como una longitud de recorrido de la radiación igual a 1 cm.
Se logró realizar con éxito el Espectro de absorción del KMnO4.
Además, se debe indicar que gracias a la determinación, se pudo realizar la gráfica de
curva de calibración de absorbancia del Mn y por lo tanto hallamos la concentración del
analito con uso de la ecuación de la misma recta, de la cual se hizo una correlación entre
esta y la ecuación de Lambert & Beer, para poder poder obtener el % p/p de Mn que
resultó 0,1805 %p/p Mn.

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

AGQ labs. (2017). Análisis Químico, Qué es la química analítica. Chile. Recuperado
de https://agqlabs.cl/wp-content/uploads/Analisis-quimico-medir-es-
comparar.pdf
Bermejo, R. & Moreno, A. (2014). Análisis Instrumental. España: SÍNTESIS
EDITORIAL (pp. 164-193)
Garcia, J. & Gomez, D. (2006). Técnico especialista-química. Sevilla: MAD. (pp.
287-304) Garcia, S. (2006). Técnico especialista en laboratorio. Sevilla: MAD.
Nieves,A. et al. , (2010) Espectros de absorción y cuantificación colorimétrica de
biomoléculas. Córdoba, Argentina: Departamento de Bioquímica y Biología
Molecular
https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/08_ESPECTROFOT
OMETRIA.pdf
Pickering, W. (1976). Química analitica moderna. New York: Reverte. (pp 4-23)
Sierra, I. (2010). Análisis instrumental. La Coruña: Netbiblo. (pp. 60-76)
Skoog, D. (2001). Fundamentos de química analitica. Barcelona: Reverte. (pp. 670-
789)