Practica 8: Cuantificacion de hierro por espectrofotometria

en el visible
Ruiz Olvera Karla Yuneli Matricula: 570106015
Asignatura: Desarrollo analitico
Licenciatura Quimico Farmaceutico Biotecnologo
Periodo 2022-2
Fecha de entrega: 07 de diciembre de 2022
Docente: QFB. Edlin Mariel Ramos Gonzalez

Resumen: la absorbacia de las soluciones es directamente proporcional a su concentracion, por lo

tanto de esta manera se logra identificar la cantidad de luz absorbida, entre mayor sea esta, mayor
es lo concentrada que se encuentra la muestra. Se llevo a cabo la preparacion de diversas soluciones
donde empleamos cloruro ferrico, tioicanato de amonio y agua destilada para obtener 7
disoluciones con diferentes concentraciones de cada compuesto, lo que nos permite realizar una
curva de calibracion con la absorbancia de cada muestra, siendo leida a diferente longitud de onda,
abarcando desde los 400 a los 550 nm, con intervalos de 10nm. Ademas de realizarse la
determinacion de la concentracion de hierro en la disolucion problema, sin embargo la lectura de
esta se realizo a la maxima longitud de onda, 550nm.

Palabras clave:, espectofotometria, absorcion, curva, analito, cuantificacion, blanco, disolucion.

Introduccion

Espectrofotometría Los espectrofotómetros son equipos que, en

función de la Ley de Lambert-Beer, calculan
Su fundamento se basa en la existencia de una
la concentración de un analito en una
relación entre la cantidad de luz que es
muestra, mediante reacciones conocidas que
absorbida por el analito y la concentración de
generalmente involucran coloración de la
este en la muestra. Se caracteriza por su
muestra, y un sistema óptico para realizar la
precisión, sensibilidad y su aplicabilidad a
lectura.
moléculas de distinta naturaleza.
Cuantificación – Los datos obtenidos serán de utilidad para
la cuantificación del hierro
Una vez que se conoce la presencia de cierta
Justificación
sustancia en una muestra, la cuantificación o
medida de su abundancia absoluta o relativa La espectrofotometría nos permite
puede ayudar en la determinación de sus determinar la concentraciones de ciertas
propiedades específicas, siendo necesaria soluciones, por lo que es posible identificar la
para conocer los compuestos que se cantidad de compuesto presente, de acuerdo
encuentran en alguna solución. con la proporcionalidad que existe entre la
cantidad de luz absorbida por la muestra y su
Muestra problema
concentración. En este tipo de técnicas sigue
Hace referencia a una parte representativa de existiendo la aparición de ciertos errores, en
la materia objeto de análisis, siendo una algún momento dado debidos a la calibración
alícuota de la muestra una porción o fracción inadecuada del equipo, la colocación de las
de esta. celdas y en ocasiones la preparación de las

Absorbancia disoluciones o su incorrecta manipulación.

Cantidad de luz absorbida por la muestra al Objetivos

estar dentro del espectrofotómetro, en – Determinar el espectro de absorción y

función a una longitud de onda determinada. elaborar la curva patrón de un analito
Planteamiento del problema – Emplear esta información para
cuantificar una muestra problema del
El conocimiento de la concentración de
mismo analito
soluciones de interés nos permite determinar
con exactitud la cantidad de soluto disuelto Método
en cierta cantidad de disolvente, siendo de Material
utilidad para la identificación de las
Material:
cantidades presentes ciertas sustancias, en
– Espectrofotómetro Genesys o Biomate
este caso del hierro.
– 2 celdas de acrílico o vidrio óptico
Hipótesis
– Papel seda
– La lectura adecuada de la absorbancia nos – 1 matraz volumétrico de 50 ml
permitirá realizar la curva de calibración – 2 matraces volumétricos de 500 ml
– 1 pipeta graduada de 1 ml su profesor los cálculos y forma de
– 1 pipeta graduada de 5 ml preparación.
– 2 pipetas graduadas de 10 ml Determinación del Espectro de Absorción
– 12 tubos de ensayo con tapones de rosca del Complejo Tiocianato de Hierro (III)
– 1 gradilla para tubos de ensayo 1. Coloque en un tubo de ensayo 5 mL de la
– 4 vasos de precipitados de 100 ml disolución de cloruro férrico, 0.3 mL de
– 1 espátula la disolución de tiocianato de amonio, 4.7
– 1 propipeta mL de agua destilada, tape y agite por
– 1 agitador de vidrio inversión.
2. Transfiera a una celda y lea la
Equipo:
absorbancia en el modo barrido de 400 a
– Balanza analítica 550 nm a intervalos de 5 nm. Ajuste la

Sustancias absorbancia con un blanco preparado con

0.3 mL de la disolución de tiocianato de
– 500 ml disolución de acido clorhídrico
amonio y 9.7 mL de agua destilada.
(HCL) 0.05 M
Elaboración de la Curva de Calibración del
– 500 ml disolución de cloruro férrico
Complejo Tiocianato de Hierro (III)
(FeCl3) 1 x10-4 M en HCL 0.05 M
Prepare la siguiente serie de tubos:
– 50 ml Tiocianato de amonio
(NH4SCN) 0.5 M
– Disolución problema de cloruro
férrico. Concentración aproximada:
5x10-5 M cbp
Procedimiento:

Preparación de Disoluciones
1. Prepare las disoluciones de ácido
clorhídrico (HCl) 0.05 M (en
campana de extracción), cloruro férrico
(FeCl3) 1 X 10-4 M y tiocianato de
amonio (NH4SCN) 0.5 M. Antes de
proceder a su preparación verifique con
Resultados Determinación de la Concentración de
Fe3+ en la Disolución Problema

Longitud de onda máxima: 550nm

Muestra Absorbancia
1 0.96
2 .282
3 .576
4 .763
5 .914
6 1.150
7 (blanco) 0.212

Determinación del Espectro de Absorción

del Complejo Tiocianato de Hierro (III)

Longitud de
Absorbancia
onda (nm)
400 0.809
410 0.943
420 1.088
430 1.214
440 1.317
450 1.411
460 1.448
470 1.453
480 1.286
490 1.252
500 1.196
Análisis de resultados

Curva de calibración. Concentración de

Fe3+ en la Disolución Problema

Curva de calibración. Determinación del Espectro de

Absorción del Complejo Tiocianato de Hierro (III)

Conclusiones para obtener resultados mayormente

eficientes, donde no se vean
El desarrollo de la practica permitido la
comportamientos inadecuados en cuanto la
obtención de la medición de absorbancia en 7
medición de absorbancia por parte de cada
soluciones, cada una de estas presentando
disolución, obteniendo asi una cuantificación
una diferente concentración del estándar de
más exacta del analito de iteres en su
hierro, de tal manera que identificamos por
composición.
medio de la curva de calibración una
tendencia estacional debido a que se Referencias
presentan incrementos y decrementos en las
– ¿qué es cuantificar y ejemplos? (2021, 18
últimas absorbancias leídas. De igual forma
marzo). aleph. https://aleph.org.mx/que-
con el empleo de esta técnica comprendemos
es-cuantificar-y-ejemplos
factores a considerar al momento de llevar a
cabo el procedimiento, lo cual es de utilidad
– Díaz, N. A., Bárcena Ruiz, J. A.,
Fernández Reyes, E., Galván Cejudo, A.,
Jorrín Novo, J., Peinado Peinado, J.,
Meléndez-Valdés, F. T. & Túnez Fiñana,
I. (s. f.). 8. Espectrofometría: Espectros
de absorción y cuantificación
colorimétrica de biomoléculas. En uco.
https://www.uco.es/dptos/bioquimica-
biol-
mol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETRI
A.pdf
– Espectrofotometría. (2018, 7 mayo).
Hanna Instruments.
https://ww2.hannachile.com/blog/post/es
pectrofotometria

– PRÁCTICA 4.
ESPECTROFOTOMETRÍA. (s. f.).
https://www.upo.es/depa/webdex/quimfi
s/docencia/quimbiotec/FQpractica4.pdf
 Cuantificación de hierro por espectrofotometría
en el visible

HCL 0.05 M
FeCl3 1 x 10-4 M
NH4SCN 0.5 M
1 Preparación de
disoluciones

Determinación del
Espectro de Absorción del
2
Colocar en tubo de ensayo 5 ml
Complejo de Tiocianato de de FeCl2
Hierro III

Agregar .3 ml de NH4SCN
3

4 Añadir 4.7 ml de agua

destilada

Tapar y agitar por inversion

5

6 Añadir/pasar a una celda

7
Medir absorbancia de 400 a
500 nm con intervalos de 10
nm

1
Preparación de 0.3 ml de NH4SCN y 9.7 ml de
agua destilada
blanco

Determinación de la
Colocar 5 ml de sln problema
FeCl3 en un tubo de ensayo 1 concentración de Fe3+
en solución problema

2 Añadir 0.3 ml de NH4SCN

Agregar 4.7 ml de agua

destilada 3
 4
Tapar y agitar por inversión
Transferir a una celda

Elaboración de la Curva de Preparar la siguiente serie de

Calibración del Complejo
Tiocianato de Hierro (III)
1 tubos:

 Preparar 3 cromatoplacas 1 Experimento 2

2
Aplicar la solución patrón de AAS
y cafeína

3
Eluir con acetona, alcohol y
acetato de etilo por separado

Seguir procedimiento de
4 visualización de manchas

1
Identificar el principio activo
de analgesicos Experimento 3

Colocar gotas de analgésicos

2 (CAS, sacidol o bioelectro,

comparando con muestras
patron de AAS y cafeína)

Colocando las gotas de la

siguiente manera 3