“AÑO DEL BICENTENARIO DEL PERÚ: 200 AÑOS DE INDEPENDENCIA”

Universidad Nacional de Piura

Facultad de Ingeniería Industrial
Escuela Profesional de Ingeniería Agroindustrial e Industrias Alimentarias

INFORME PRÁCTICA: 1ER TALLER VIRTUAL

MATERIALES DE USO FRECUENTE EN EL
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
Microbiología General

Harold Robert Valle Campoverde – CU 0522015019

Fátima Anthonelly Castillo Zapata - CU 0522014015
Maria Teresa Sosa Echevarria – CU 0522013048
Pool Jefry Piedra Ruiz – CU 05220019059

Encargado de la materia
María Dorothy Torres de León

Piura – Perú
Enero de 2021
 I. INTRODUCCION

Un laboratorio de Microbiología es un lugar habilitado para manejar y estudiar

microorganismos.

El trabajo debe realizarse de acuerdo con los estándares técnicos y de seguridad propios de
un laboratorio de Microbiología Clínica.

Es importante recordar que la finalidad es determinar los microorganismos presentes en la

muestra por lo que es preciso extremar las precauciones para evitar contaminaciones que
den lugar a resultados erróneos.

Todas las muestras deben ser manejadas con precaución por su potencial patogenicidad.

Para deshacerse del material contaminado se deben utilizar recipientes adecuados que
deben ser esterilizados posteriormente.

Nunca se puede tirar nada contaminado por el fregadero o al cubo de la basura común sin
haber sido esterilizado previamente.

En el laboratorio deben existir unas recomendaciones generales de limpieza y en caso de

vertidos:

Procedimientos de limpieza de superficies externas mediante papel humedecido con

solución desinfectante (alcohol 70%, desinfectante fenólico diluido, etc.). Aclarar con agua
los restos de desinfectante.

En caso de usar soluciones de hipoclorito en zonas metálicas, limpiar posteriormente para

evitar el efecto corrosivo.

En caso de derramamientos de material peligroso o formación de aerosoles: evitar

inspiraciones de esos aerosoles, esperar 30 minutos hasta que las partículas se hayan
depositado y limpiar con mascarilla, guantes y otros útiles protectores.

En caso de vertido de materiales, cubrir la superficie con desinfectante y posteriormente

cubrir con papel humedecido con desinfectante. Dejar durante 15 minutos y limpiar. En caso
necesario aclarar con agua.

En caso de derramamientos menores limpiar el material vertido mediante papel humedecido

y posteriormente aclarar, cuando sea necesario.

Los laboratorios deberán disponer de los aparatos e instrumental necesario para el correcto
desarrollo de su actividad.

Debe existir un procedimiento de control de calidad en el laboratorio de Microbiología que

implique la monitorización de los medios e instrumentos, con el fin de asegurar la adecuada
realización de los aislamientos, identificación y caracterización de los patógenos y la
realización precisa de las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos como referencia
terapéutica.

El sistema de la calidad deberá contemplar la existencia de registros de formación de

personal.es imprescindible la existencia de un procedimiento sobre medidas de protección
personal en el manejo de equipos y aparatos.

Los equipos del laboratorio deben funcionar de forma que se asegure la reproducibilidad de
los resultados de las pruebas diagnósticas.

El laboratorio deberá estar bajo la dirección y responsabilidad de un facultativo con la

especialidad correspondiente, legalmente capacitado para realizar aquellas determinaciones
clínicas que el laboratorio tenga autorizadas.

Un laboratorio de microbiología debe estar implementado con una serie de instrumentos

básicos de acuerdo a los requerimientos científicos actuales.

Los materiales pueden ser de vidrio, de plástico, de aluminio y de acero inoxidable.

Los vidrios empleados para el uso de laboratorio, tienen propiedades especiales, de acuerdo
a la composición que paseen. Las marcas Kimax y Pirex, utilizan el boro – silicato que
toleran temperaturas de hasta 510°C sin deformarse.

Los plásticos presentan diferentes propiedades de acuerdo a la composición resinas que

poseen, no sufren la acción de álcalis ni de ácidos.

Los metales empleados en la fabricación de los instrumentos, son de alta calidad que toleran
la actividad química de los ácidos y álcalis y resistentes a la manipulación y funcionamiento
continuo.

No solo es necesario conocer los instrumentos básicos que se utilizan en el laboratorio de

microbiología si no también se debe conocer la forma de cómo darles la limpieza y el
acondicionamiento adecuado.

OBJETIVO: reconocimiento y utilidad de los instrumentos de uso frecuente en el laboratorio

de microbiología y conocer los procedimientos para la limpieza y acondicionamiento de los
mismos.

II. MATERIALES Y METODOS

MICROSCOPIO

El microscopio se emplea para aumentar o ampliar las imágenes de objetos y organismos no

visibles a simple vista. Se trata de un instrumento óptico que contiene una o varias lentes
que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refracción. El
microscopio óptico puede ser monocular, binocular. La observación en estos casos se hace
con un solo ojo. Es binocular cuando posee dos tubos. La observación se hace con los dos
ojos. Esto presenta ventajas tales como mejor percepción de la imagen, más cómoda la
observación y se perciben con mayor nitidez los detalles.
Está conformado por tres sistemas:

El sistema mecánico, está constituido por una serie de piezas en las que van instaladas las
lentes que permiten el movimiento para el enfoque.

El sistema óptico, comprende un conjunto de lentes dispuestas de tal manera que produce
el aumento de las imágenes que se observan a través de ellas

El sistema de iluminación, comprende las partes del microscopio que reflejan, transmiten y
regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la observación a través del microscopio.

 El sistema mecánico lo conforman:

BRAZO: Es la parte de donde se debe sujetar, las pinzas el carro el tubo del microscopio y
el revólver. Además, sirve para trasladar el microscopio de un lugar a otro.

BASE O PIE: Es una pieza que proporciona estabilidad y sirve de soporte a todas las partes
del microscopio.

PLATINA: Es una pieza metálica, cuadrada, que tiene en su centro una abertura circular por
la que pasará la luz del sistema de iluminación. Aquí se coloca el portaobjetos con la
muestra a observar

PINZAS DE SUJECION: Parte mecánica que sirve para sujetar la preparación. La mayoría
de los microscopios modernos tienen las pinzas adosadas a un carro con dos tornillos, que
permiten un avance longitudinal y transversal de la preparación.

TORNILLO MACROMETRICO: Permite hacer un movimiento rápido hacia arriba o hacia

abajo del tubo o la platina, y se utiliza para localizar la imagen a observar.

TORNILLO MICROMÉTRICO O DE ENFOQUE SUAVE REVOLVER: Parte mecánica de

movimiento giratorio que nos permite colocar en posición cualquiera de los objetivos que se
encuentran en él.

TUBO: Parte mecánica que proporciona sostén a los oculares y objetivos.

CREMALLERA: Permite que el movimiento de los tornillos macro y micrométrico sea de

mayor o de menor amplitud.

 El sistema óptico:

OCULAR: Se localiza en la parte superior del tubo ocular y son las lentes que Capta y
amplia la imagen formada en los objetivos. Los primeros microscopios eran monoculares, es
decir, poseían una sola lente. Los microscopios actuales poseen dos oculares, uno para
cada ojo y se les llama binoculares.

OBJETIVOS: Se encuentran incrustados en el revolver Son unos pequeños cilindros

colocados en el revolver que proporciona el poder de resolución del microscopio y
determinan la cantidad total de aumento.

Existen 4 tipos entre los que se encuentran:

1.- La lupa (4 X) que sirve para hacer observaciones a bajo aumento.

2.- El objetivo seco débil (10 X) que se utiliza para localizar la imagen que se va a observar.

3.- El objetivo seco fuerte (40 X) aumenta la imagen anterior, para poder observar se
necesita primero acercar el objetivo al portaobjetos y posteriormente, enfocar el objetivo
hasta que aparezca la imagen.

4.- El objetivo de inmersión (100 X) es un lente especial para observar imágenes tan
pequeñas como las bacterias. Y se requiere del aceite de inmersión para lograr una buena
observación.

La parte óptica del microscopio es la que determina el número de aumentos que presenta la
imagen observada. El aumento total que permite un microscopio óptico se calcula
multiplicando la magnificación que producen el objetivo por la que producen los oculares.
Usando microscopios ópticos avanzados se consiguen unos 1000-1500 aumentos (objetivo
de 100x más oculares de 10x o 15x). Algunos microscopios ópticos tienen lentes internas
que producen aumentos adicionales que tendremos que tener en cuenta para calcular la
magnificación de la imagen que se observa.

 El sistema iluminación:

La fuente luminosa consiste en un espejo o una fuente de luz eléctrica que dirige un haz de
luz hacia el condensador.

CONDENSADOR: Es una lente de gran abertura que permite dirigir o condensar la mayor
parte de los rayos luminosos en la preparación. En nuestro microscopio está integrado en la
platina y tiene un diafragma unido en la parte inferior.

DIAFRAGMA: Existe un diafragma en el condensador, que elimina el exceso de luminosidad

para tener una buena iluminación del objeto a observar

FUENTE DE LUZ: Para observar la muestra microscópica es necesario que ésta se ilumine
con algún tipo de luz y nuestros microscopios cuentan con un foco que da energía eléctrica
que dirige sus rayos luminosos hacia el sistema condensador.
 Autoclave

Es el equipo más utilizado para la esterilización mediante calor húmedo. Se realiza

durante 15 ó 20 min, según el volumen, a 115°C ó 121°C, según la naturaleza del
material que se desee esterilizar.

Auto clavado: es un procedimiento en el que se emplea vapor a presión (a 1

atmósfera). Como tiene gran poder de penetración la temperatura y el tiempo
utilizado son menores que los que se emplean con el horno Pasteur (121º C, 15-20
minutos).

 Horno de Pasteur
Emplea altas temperaturas (160-180º C) durante un tiempo prolongado (1.5 a 3
horas). Debido a su poca capacidad de penetración se usa para esterilizar vidrio y
metales. Actúa principalmente desnaturalizando las proteínas y secundariamente
oxidando los compuestos celulares.
 Estufa o incubadora

Es una cámara de temperatura controlada para cultivo de microorganismos.

Se utiliza para facilitar el desarrollo de los microorganismos a su temperatura óptima

de crecimiento (generalmente 35-37º).

 Frigorífico o cámaras refrigeradas

Se utilizan para conservar tanto materiales (medios de cultivo, reactivos) como

microorganismos generalmente están a una temperatura fija de 4ºC.
 La balanza
Se usa para pesar colorante, componentes de medio de cultivo, animales, etc.

 Baño maría
Tienen salida de aire, presentan un termostato que regula la temperatura del agua
presenta un piso para colocar los materiales que se desea.
 Bomba de vacío:

Extrae moléculas de gas de un volumen sellado, para crear un vacío parcial.

 Contador de colonias
Es un aparato que, mediante la iluminación de la placa y una lupa, nos permite
observar con mayor nitidez las colonias y por tanto facilita su recuento.
 Asas de siembra:

Se utilizan para sembrar. Pueden ser metálicas o de plástico, curvas o rectas

(para la siembra por picadura).

 Portas y cubres

Para realizar las observaciones al microscopio.

 Cucharas y espátulas:

Se utilizan para pesar muestras o medios de cultivo.

 Matraces:

 Potenciómetro:
Miden el Ph de los medios de cultivo y de las soluciones buffer. Constituido de un par de
electrodos sensible a concentraciones de hidrogeniones, conectados a un potenciómetro
que indique las mediciones. En los potenciómetros se emplean un electrodo de vidrio,
unido a un electrodo de calomel como estándar.

 Probetas:
Recipientes graduados de forma cilíndrica y capacidad variable.
Con base para la esterilidad. Pueden estar graduadas.
  Pipetas:

Tubos cilíndricos delgados terminados en punta, graduados al décimo y al centésimo de

mI. Se emplean en la medición de pequeñas cantidades de líquidos

Volumétricas:

Se reconocen por presentar una dilatación bulbosa central con unas marcas de aforamiento
conocida, en el extremo proximal angosto de la pipeta, se les llama también pipetas de bola,
las medidas más conocidas son de 10, 25, 50 y100 ml.

Pipetas Pasteur:
Confeccionados de varillas de vidrio de diámetro de 4x 20mmde 30 ó 40cm de longitud. La
calidad de vidrio debe facilitar reblandamientos a la acción directa de la llama del mechero, para
conseguir por estiramiento la capilaridad deseada. Se emplea para la toma de pequeños inóculos
de siembra.

Placas Petri:
Cajas cilíndricas, se emplean como recipientes de medios de cultivo para el cultivo y
aislamiento de microorganismos. Las más usadas son las de10,15ó 20 mm x100 mm.
Pasos para la limpieza de los materiales de vidrio del laboratorio

1. Se considera como insegura la práctica de sumergir todo el material de vidrio (tubos,

placas, etc.) con cultivos descartables o contaminados, dentro de un cubo de
desinfectante, dejándolo durante la noche, lavándolos después o tirándolos. Por eso
TODO EL MATERIAL DEBE SER ESTERILZADO EN EL AUTOCLAVE antes de
proceder a su lavado.
2. Al sacarlos, aun en caliente quitar los tapones y vaciar el contenido.
3. Lavar con agua caliente y detergente.
4. Enjuagar con agua de caño a chorro continuo hasta la eliminación del detergente o
agente bactericida. Luego con agua tibia y por último tres veces con agua destilada.
5. Dejar escurrir y secar.

Las pipetas y otros dispositivos se desinfectan sumergiéndolos en un recipiente de base

ancha que contenga una solución bactericida dicromática o una solución de fenol al 5%
por 24 horas.
Los porta y cubre objetos pueden colocarse en una solución de fenol al 5% por 24
horas. Luego hervirlos en agua jabonosa por 10 minutos.
Cuando el material de vidrio retiene muchas manchas se trata con la mezcla
sulfocrómica
Enjuagar y dejar secar

Pasos para el acondicionamiento de material de laboratorio

1. El material debe estar limpio y totalmente seco

2. Las placas Petri deben ser envueltas en papel Kraft aislados o en grupos. Es preferible
utilizar cilindros metálicos.
3. A los tubos de ensayo o frascos, debe colocárseles tapones de algodón largo y
suficientemente consistente para no permitir el paso de gérmenes.
4. A las pipetas se le coloca en el extremo bucal un pequeño tapón de algodón,
ayudándose con un alambre fino; se elimina cualquier fibra suelta con el flameo, se
cubre la pipeta con una fibra de papel empezando por el extremo delgado para terminar
por el extremo bucal y se asegura la envoltura mediante la torsión del resto de papel
que queda.
5. Es preferible utilizar cilindros metálicos cuando se prepara grandes cantidades de
material.
 II. RESULTADOS

En esta práctica los resultados que obtuvimos es el conocer el material más usado
incluyendo los equipos que se usan en el laboratorio de microbiología y no es solo de
conocer si no también de saber cuál es uso adecuado y para qué sirven.

También se aprendió a como darle su limpieza y acondicionamiento adecuado el cual debe

ser primordial para que el material permanezca sin contaminación al almacenarlos. Todo
material usado se debe dársele su limpieza después de haber sido utilizado.
III. DISCUSIONES

 Se observó los materiales de laboratorio y sus usos mas no se tocó el tema de

sus restricciones.
 Si no usamos adecuadamente los equipos, automáticamente nuestros resultados
analíticos nos saldrán erróneos.
 Si no tenemos en cuenta todas las normas de bioseguridad podemos
ocasionarnos un accidente y hasta llegar a extremos.
 Si programamos mal el esterilizador o el autoclave o no controlamos el tiempo
durante la esterilización los microorganismos pueden quedar vivos debido a un
tiempo menor de lo necesario, o por lo contrario el producto analizado puede que
se pierda todos sus componentes y nutrientes debido al exceso de tiempo.

IV. CONCLUSONES

La mayoría de los instrumentos usados deben pasar por la autoclave donde son
esterilizados para recién poder lavarlos y acondicionarlos en otras palabras no
es limpieza si no pasa por la autoclave.

Todo material para darle un buen acondicionamiento debe estar protegido del
polvo el cual también contiene microorganismos esto se hace al envolverle ya
sea el papel Kraft, algodón al colocarle como tapones o papel.

Además, se debe asegurar que antes de empezar a acondicionar el material,

este debe estar limpio y seco.

V. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
 https://materialeslaboratorio.com/microbiologia/
 http://campus.usal.es/~micromed/Practicas_odontologia/unidades/labv/
LabMicro/practica1.html
 https://es.slideshare.net/ronal1800/instrumentos-de-laboratorio-de-
microbiologia