Referencia: 064-BA7080 Scharlau Microbiología - Ficha Técnica

Producto: IRON SULFITE AGAR

Especificación
Medio sólido para el aislamiento e identificacion presuntiva de Clostridios sulfito reductores.
Presentación
10 Frascos Encajado Caducidad Almacenamiento
Botella 250 ml 1 caja con 10 botellas de 250 ml. Tapón inyectable: 12 meses 8-25 ºC
con: 200 ± 5 ml tapón plástico con rosca. No se recomienda la
utilización de jeringas con agujas de diámetro
superior a 0,8 mm.

Composición
Triptona........................................... 10,0
Sulfito sódico................................... 0,5
Hierro amonio citrato.......................0,5
Agar.................................................15,0
Descripción/Técnica

La actual formulación del Agar de Hierro y Sulfito ha sido ampliamente experimentada por numerosos autores y proporciona un número
de falsos negativos relativamente bajo.
La mayor parte de clostridios poseen las reductasas del sulfito en su citoplasma pero son incapaces de segregarlas al exterior, por lo
que, cuando se produce SH2 a partir del sulfito sólo se ennegrece la colonia.
La formación de precipitados de sulfuro de hierro a partir del citrato es mucho menos tóxica que el alumbre inicialmente programado por
Wilson y Blair. Hay que tener en cuenta que muchas bacterias gram-negativas son capaces de reducir los sulfitos con producción de
sulfuros de hierro en éste medio pero, en estos casos, los enzimas son extracelulares y se ennegrece todo el medio, imposibilitando el
recuento de colonias.

Técnica de uso recomendada:

Para la enumeración de clostridios sulfito-reductores, debe eliminarse la presencia de células vegetativas, calentando un volumen de la
muestra a 80°C durante 10 minutos. Este volumen se enfría a chorro de agua y se mezcla asépticamente con un volumen igual del
medio estéril, doble concentrado, fundido y enfriado a 60°C. Se deja solidificar y se incuba a 37°C durante 48 horas con examen visual
a las 24 horas. Se enumeran las colonias negras, que contrastan perfectamente con el medio, y se expresa el resultado como esporas
de clostridio sulfito-reductor por volumen de muestra.
Los tubos con medio ennegrecido, sin colonias discretas, deben desecharse y reiniciar el ensayo calentando la muestra a la misma
temperatura, pero alargando el tiempo de calentamiento otros cinco minutos. Si se desea enumerar las especies termofílicas la
incubación debe hacerse a 55°C.
Si el ensayo se realiza por filtración, se recomienda depositar la membrana sobre una capa de medio solidificado en placa y luego
cubrirla con otra capa de medio (15-20 mL) fundido y enfriado a 60°C.

Nota: Los medios sólidos pueden fundirse de diferentes maneras: autoclave, baño y si el cliente lo ve conveniente también el
microondas. Siempre que se escoja la opción del microondas es necesario tomar ciertas medidas de seguridad para evitar la rotura del
frasco o tubo, tales como aflojar el tapón y poner la botella o tubo en un baño maría dentro del microondas. Las temperaturas y tiempos
de fusión dependerán de la forma del envase, del volumen de medio y de la fuente calorífica. Deben evitarse tanto los
sobrecalentamientos como los calentamientos prolongados.

Página 1 / 2 Fecha revisión:29/01/22

 Referencia: 064-BA7080 Scharlau Microbiología - Ficha Técnica
Producto: IRON SULFITE AGAR

Control de Calidad
Control Físico/Químico
Color : amarillo pajizo pH: 7,1 ± 0,2 a 25ºC
Control de Fertilidad
Fusión - Siembra en Masa : rango práctico 100 ± 20 UFC. Min. 50 UFC (Productividad) /10 4-106 UFC( Selectividad).

Metodología analítica acorde con ISO 11133:2014/A1:2018; A2:2020

Anaerobiosis. Incubación a 37 ºC ± 1, lectura a las 24-48 horas
Microorganismo Desarrollo
® ®
Clostridium perfringens ATCC 13124, WDCM 00007, NCTC 8237 Bueno - Ennegrecimiento del medio
Escherichia coli ATCC® 25922, WDCM 00013 Escaso
Clostridium perfringens ATCC® 10543, WDCM 00174 Bueno - Ennegrecimiento del medio
Control de Esterilidad
Incubación 48 horas a 30-35 ºC y 48 horas a 20-25 ºC: SIN CRECIMIENTO
Verificación a 7 días tras incubación en las mismas condiciones.
Bibliografia
·TANNER, F.W. (1944) The Microbiology of Food. 2 Ed. Garrad Press U.S.A.
·BUTTON, A.W.J. (1959) A note on the enumeration of thermophilic sulfate-reducing bacteria. J. Appl. Bact., 22(2) 278-280.
·SCARR, M.P. (1959) Selective Media Used in the Micro- biological Examination of Sugar Products. J. Sci. Food Agri., 678-681.

Página 2 / 2 Fecha revisión:29/01/22