UNIVERSIDAD VERACRUZANA

FACULTAD DE QUÍMICA FARMACÉUTICA

BIOLÓGICA

GUIA DE FITOQUÍMICA
(LABORATORIO)

Realizadores:
Dra. Ma. del Rosario Hernández Medel
Dra. Abril de los Ángeles Aguilar Tirado
MC. Vicente Velásquez Melgarejo
Dra. Lilia Mireya Méndez Ventura

Revisores:
Aquí van los profesores de la academia que revisen el manual
 Información general
El presente documento es una orientación para realizar la parte correspondiente al
Laboratorio del curso de la experiencia educativa (EE) Fitoquímica, curso que se ubica en el
Área Terminal de Química Orgánica de la Facultad de Química Farmacobiológica, Campus
Xalapa, de la Universidad Veracruzana.
En el semestre agosto-enero, el horario de esta EE es: miércoles y jueves de 7-10 am

El conocimiento químico sobre el origen, organización, diversidad estructural, reactividad,

síntesis y propiedades de los productos naturales nos ayuda a entender las complejas
relaciones químico-biológicas en la naturaleza. (Guillermo Delgado)

La Fitoquímica se encarga del estudio de los compuestos químicos presentes en las plantas,
particularmente de los llamados metabolitos secundarios o productos naturales, que son
aquellos característicos de una especie, de un género y/o de una familia vegetal.

El estado de Veracruz ocupa un lugar privilegiado en el país ya que cuenta con un gran
potencial para desarrollar la investigación básica y aplicada en la Química de los Productos
Naturales, en especial de aquellos con aplicaciones medicinales, pues los habitantes de
distintas regiones han venido explotando de manera empírica los recursos naturales con
fines terapéuticos obteniendo resultados sorprendentes sin que haya, en muchos de los
casos, un respaldo científico de su uso.
No obstante, a la extensa y variada vegetación que posee, tanto estado como el país, hay
poca información en esta área, en cambio en otras naciones ésta ha aumentado
considerablemente en los últimos años, ya que la obtención de metabolitos secundarios
con una posible actividad terapéutica ha adquirido una enorme importancia debido a la
necesidad de encontrar nuevas y más efectivas drogas para el tratamiento de las diversas
enfermedades existentes, incluyendo las que han resurgido recientemente. Baste mirar un
ejemplar de las revistas, entre otras muchas, Phytochemistry y Journal of Natural Products
(revistas que publican artículos relacionados con la obtención, dilucidación estructural y
actividades farmacológicas de los metabolitos secundarios aislados de productos naturales
como plantas, hongos, algas, etc.), para darse cuenta de la cantidad de artículos que se
editan mensualmente, de los cuales casi todos, por no decir el 100%, no son de instituciones
mexicanas.

En este sentido, este manuscrito pretende dar una idea de la metodología del estudio de
un producto natural de origen vegetal, haciendo énfasis en el aprovechamiento racional de
nuestros recursos naturales renovables, con la finalidad de que el estudiante tenga un

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panorama general sobre el tema, pues es una de las EE que conforman el área Terminal de
Química Orgánica, del Programa de estudios de la Facultad de QFB.

Reportes de laboratorio:
Con la elaboración del reporte se busca preparar al estudiante para que en el ejercicio de
su carrera profesional pueda presentar informes de actividades, elaborar propuestas,
reportar y analizar resultados confiables. Además, para elaborar este reporte, debe de
documentarse por lo cual, también, se le estimula a investigar sobre literatura relacionada
con el área.

Contenido del reporte:

1. Nombre de la práctica.
2. Introducción.
En él se indica la finalidad de la práctica, se presenta de forma general un resumen
de la teoría que se pretende corroborar con una descripción de la terminología
usada en la práctica.
3. Antecedentes.
Esta sección contiene toda la información necesaria para comprender el tema que
se está revisando en la práctica.
4. Objetivos.
5. Parte experimental.
Corresponde a lo que realmente se hizo en el laboratorio, evitando que sea una
copia textual de la guía de laboratorio, las observaciones deben ser escritas de
manera concisa, pero claras y redactadas de forma impersonal.
6. Observaciones y Resultados.
En esta parte se describe lo que ha llamado la atención a lo largo de la práctica, junto
con los resultados propiamente dichos. Se pueden reportar en forma de gráficos o
tablas.
7. Discusión de resultados.
Se presentan los argumentos teóricos comparados con los resultados
experimentales obtenidos, analizando las diferencias de los datos teóricos con los
experimentales, si los hubiera, indicando las posibles causas.
8. Conclusiones.
Se expresan en forma resumida los resultados del análisis efectuado, derivado del
trabajo experimental y de las interrogantes planteadas.
9. Bibliografía.

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 Se enlista el material bibliográfico consultado para la realización del reporte. A
continuación, se muestran algunos ejemplos de cómo se debe reportar la
bibliografía dependiendo de las fuentes más comunes.
• Libros
Autor o editor, (año de publicación), titulo, (edición), lugar de publicación, casa editora.
Páginas consultadas.
Ejemplo:
Chang, R. (2010). Química, 10ª edición, México, D. F. Mc Graw Hill. Pp. 210-226.
• Revistas
Autores, (fecha de publicación). Título del artículo. Título de la revista, número del
volumen y del ejemplar, número de las páginas del artículo.
Ejemplo:
Aguilar y Pineda (2009). Cáñamo: Una alternativa textil ecológica. Revista de
Química Textil, No. 195, noviembre-diciembre 2009, 334-337.
• Medios electrónicos
Autor, (fecha de publicación), titulo, identificación de la referencia para acceder a la
información (URLo DOI), URL (UniformResourceLocator). Dirección de internet
Ejemplo:
http://www.cmpr.edu/biblioteca/docs/resena.pdf
http://library.nmu.edu/guides/userguides/styleapa.html
10. Medidas de seguridad.
Incluir la información de seguridad de reactivos manejados en la práctica.
11. Disposición de reactivos.
Indicar las medidas tomadas para la disposición de los desechos generados en la
práctica.
Mecanismo evaluación:
La evaluación se llevará a cabo como se muestra a continuación:
Evidencia de desempeño Criterio de desempeño Porcentaje (%)
Asistencia Presentarse al laboratorio con el 0 (Requisito,
material de seguridad para trabajar. 80%
asistencia)
Tarea de investigación Evaluación del conocimiento, 10
aprobación.
Reporte Entregar la práctica en tiempo y forma,
bajo el formato establecido con 10
limpieza y orden.
Examen Evaluación del conocimiento, 80
aprobación
Total 100

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 Aislamiento y caracterización de
furanocumarinas de una especie vegetal
Tiempo de duración: 12 sesiones de 3h c/u

El trabajo de laboratorio de Fitoquímica comprende todos los pasos que se realizan para el
aislamiento, purificación y dilucidación estructural de metabolitos secundarios de origen
vegetal, conjuntado en una sola práctica, repartida en diversas sesiones.

1. Objetivo de la práctica.
a) Obtención del extracto clorofórmico crudo de Dorstenia contrajerba.
b) Aislar furanocumarinas, los metabolitos mayoritarios, del extracto clorofórmico de D.
contrajerba.
c) Dilucidar las estructuras de los metabolitos aislados y purificados del extracto crudo de
D. contrajerba.

2. Introducción.
El aislamiento, purificación y caracterización de un metabolito secundario es un trabajo que,
con frecuencia, consume mucho tiempo por lo cual se emplearan las sesiones de laboratorio
para alcanzar la meta de esta práctica que es la purificación y dilucidación estructural de
furanocumarinas de un extracto crudo. Todo ello, con la finalidad de dar un panorama
general de cual es la metodología que se sigue para estudiar un producto natural, desde la
localización, recolección, secado y molienda del material vegetal por estudiar, para obtener
un extracto, por maceración, con el cual se va a trabajar por cromatografía, capa delgada y
columna abierta, para separar y purificar un metabolito secundario. Al hacer su estudio
espectroscópico por RMN de los productos aislados, se cumplirán los objetivos de esta
práctica.

3. Antecedentes.
Dorstenia contrajerba es una planta herbácea de la familia Moraceae, que en Medicina
tradicional es utilizada para contrarrestar la picadura de animales ponzoñosos.
De especies del género Dorstenia se han aislado psoralenos (furanocumarinas), además de
algunos flavonoides, triterpenos y esteroles.

4. Parte experimental.
a) Reactivos y materiales
Material vegetal, raíz y hoja
Disolvente: Cloroformo, metanol, acetato de etilo, hexano, éter etílico, etanol.
Material de vidrio:
-Pipetas Pasteur con su respectivo bulbo de latex, mínimo 2 por equipo.
- Vasos de pp de 50-100 mL, 2 por equipo.

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- Probetas de 10, 20, 50 mL
-Capilares o micropipetas de capilares.
- Frascos Gerber, de preferencia de 113 g (papilla para bebe),
- Embudos de filtración rápida
-Picetas
- Papel filtro, Detergente, limpia pipas, lápiz, papel, etc.
Insumos
- Cromatoplacas de gel de sílice
- Gel de sílice de 100-200 mesh
- Sulfato de sodio anhidro
- Cloruro de cobalto
- Ácido sulfúrico al 10%
- Lámpara de luz ultravioleta

b) Descripción de la práctica
De acuerdo con la información bibliográfica, se recolectará el material vegetal por estudiar.
Se separará en raíz, hoja y flor (si se encuentra) y se pesará. Se dejará secar en una estufa a
50°C por 4-5 días.
Una vez seca, se molera la hoja y la raíz se picará finamente y se volverá a pesar, por
separado. El material ya molido se colocará a macerar con cloroformo la raíz y con metanol
la hoja, en un frasco seco y con tapa, de preferencia protegido de la luz por una semana.
Pasada esta, se filtrará y el filtrado se concentrará en un rotaevaporador. El concentrado se
colocará en un frasco seco, previamente pesado.
El material vegetal se vuelve a colocar con CHCl3 y MeOH, raíz y hoja respectivamente, para
continuar con la extracción por una semana más. Al cabo de la cual se hace el mismo
procedimiento.
Una vez que se tiene el extracto, se procede a realizar cromatografía en capa delgada (ccd)
y, posteriormente, cromatografía en columna abierta (cca).
La ccd se hará con cromatoplacas de gel de sílice y la cca con gel de sílice.
Una vez que se hayan separado y purificado los metabolitos secundarios se obtiene su
espectroscopía de RMN-1H, enviándose al SARA-UV (Unidad de Servicios de Apoyo en
Resolución Analítica)
Se discuten las señales para caracterizar los compuestos y se realiza el reporte de la practica
con todas las observaciones de la práctica.

6. Resultados.
Se deben de obtener dos furanocumarinas del extracto clorofórmico de raíz de D.
contrajerva

7. Discusión de resultados.
La discusión se hará a lo largo de las sesiones

8. Conclusiones.
Corresponde a la separación, purificación y elucidación de los metabolitos secundarios.

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9. Bibliografía.
1. Dewick PM. 2009. Medicinal Natural Products: A Biosynthetic Approach. Wiley & Sons
2. Biologically Active Natural Products: Ed. Cuttler and Cuttler. CRC Press. USA, 2000.
3. Cseke LJ, Kirakosyan A, Kaufman PB, Warber SL, Duke JA, Brielmann HL. 2006. Natural
Products from Plants. CRC Press, Taylor & Francis.
4. Domínguez XA. 1979. Métodos de Investigación Fitoquímica, Limusa, México.
https://es.scribd.com/document/120712585/metodos-de-investigacion-fitoquimica
5. Peniche-Pavía HA, Vera-Ku M, Peraza-Sánchez SR. Phytochemical and Pharmacological
Studies on Species of Dorstenia Genus (2000-2016). J. Mex. Chem. Soc. 2018, 62(3), 9-23.
6. Abegaza BM, Ngadjuib BT, Dongob E, Bezabiha M-T. Chemistry of the Genus Dorstenia.
Current Organic Chemistry 2000, 4, 1079-1090
7. De Oliveira Boeni B, Bustos Singer R. Synopsis of Dorstenia (Moraceae) in Rio Grande do
Sul, Southern Brazil. Annals of the Brazilian Academy of Sciences 2015, 87(2): 925-942
8. Peniche-Pavía HA, Medrano-Nahuat D, Torres-Tapia LW, Mut-Martín M, García-Miss R,
Peraza-Sánchez SR. Metabolites isolated from the rhizomes of Dorstenia contrajerva with
anti-leishmanial activity. Phytochemistry Letters 2016, 18, 140-143.
9. Revistas Digitales del área, como Phytochemistry, Journal of Natural Products,
Fitoterapia, etc.

10. Medidas de seguridad.

Seguir las recomendaciones en el manejo de reactivos de acuerdo con su clasificación
química y las recomendaciones del profesor. Revisar las hojas de seguridad para el manejo
de los reactivos (ver Anexo).

11. Disposición de residuos.

Disponer de los residuos de acuerdo con la norma NOM-052-Semarnat-1993

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1a. Sesión
Tiempo de duración: 3h
Visión general del curso.
Metodología para el estudio de un producto natural.

El aislamiento y caracterización de un metabolito secundario es un trabajo que consume

mucho tiempo, por lo cual se emplearan las sesiones de laboratorio para alcanzar la meta
de la practica que es la purificación y dilucidación estructural de furanocumarinas de un
extracto crudo, que también se va a obtener de material vegetal.
1. Selección del material vegetal por estudiar.
a) Información empírica
b) Información bibliográfica
2. Recolección y Clasificación botánica del material vegetal por estudiar
a) Ubicación del material vegetal
b) Recolección, separación, secado y molienda del material vegetal
c) Preparar un ejemplar para la clasificación botánica
3. Extracción del material vegetal
a) Disolventes Apolares
b) Disolventes medianamente polares
c) Disolventes polares
4. Separación y Purificación de los extractos obtenidos
a) Cromatografía en capa delgada (ccd)
b) Cromatografía en columna abierta (cca)
c) Cristalización
5. Análisis Espectroscópico del(os) metabolitos aislados.
a) RMN-1H
b) RMN-13C
6. Recopilación de resultados. A lo largo de las sesiones de la práctica
7. Examen final

Material vegetal, raíz y hoja

Disolvente: Cloroformo, metanol, acetato de etilo, hexano, éter etílico, etanol.
Material de vidrio:
-Pipetas Pasteur con su respectivo bulbo de latex, mínimo 2 por equipo.
- Vasos de pp de 50-100 mL, 2 por equipo.
- Probetas de 10, 20, 50 mL
-Capilares o micropipetas de capilares.

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- Frascos Gerber, de preferencia de 113 g (papilla para bebe),
- Embudos de filtración rápida
-Picetas
- Papel filtro, Detergente, limpia pipas, lápiz, papel, etc.
Insumos
- Cromatoplacas de gel de sílice
- Gel de sílice de 100-200 mesh
- Sulfato de sodio anhidro
- Cloruro de cobalto
- Ácido sulfúrico al 10%
- Lámpara de luz ultravioleta

Siendo una práctica de laboratorio, se requiere del uso de una bata.

Debido a la falta de insumos (cromatoplacas, disolventes, material, etc), se trabaja por
equipo, pues el material y reactivos no son suficientes. Dependiendo del número de
alumnos inscritos será el número de integrantes de cada equipo.
Para realizar la práctica es necesario material de vidrio como son: Pipetas Pasteur con su
respectivo bulbo de latex, mínimo 2 por equipo; vasos de pp de 50-100 mL, 2 por equipo;
probetas de10, 20, 50 mL; capilares o micropipetas de capilares; frascos Gerber, de
preferencia de 113 g (papilla para bebe), embudos, papel filtro, detergente, limpia pipas,
lápiz, papel, etc.
- Disolventes: Hexano, cloroformo, etanol, metanol, acetato de etilo, éter etílico.
- Insumos y reactivos: Gel de sílice, sulfato de sodio anhidro, cloruro de cobalto, ácido
sulfúrico.
Checar las especificaciones de los disolventes mencionados, así como sus puntos de
ebullición.

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2a-6a Sesión
Tiempo de duración: 18 h
Uso del rotaevaporador
Para realizar la práctica de Laboratorio es necesario la purificación de los disolventes por
utilizar (cloroformo, acetato de etilo y metanol) con ayuda de un rotaevaporador. Teniendo
cuidado de no sobrecalentar el baño y que el agua de enfriamiento tampoco se caliente,
utilizando hielo o cambiando el agua con frecuencia, cuando sea necesario. Todos los
disolventes se deben de manejar con las debidas precauciones, pues son volátiles, y tóxicos.
Si bien, este sistema no es el mejor, si el único que se puede implementar en la Facultad
debido a la falta de tiempo para el desarrollo de la práctica.
La purificación de disolvente se debe hacer lo largo de las primeras sesiones, para poder
empezar a trabajar, y dependiendo del número de estudiantes inscritos a la EE.

- Desechos. Los desechos de disolventes, cuando los haya, generalmente se colocan en los
contenedores que se encuentran habitualmente en la campana de extracción, y que se
tratan según la Norma. Anexo.

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3a Sesión
Tiempo de duración: 3 h
Manejo del material vegetal y obtención de extractos
Generalmente, el material vegetal se separa en sus diversas partes, en el caso particular de
esta práctica que se usa una hierba, se separa en raíz, hoja y flor, cuando la hay; este
material vegetal se seca en una estufa alrededor de 50°C. El tiempo de secado depende de
la cantidad de hierba que se tenga. Regularmente, se emplean 20-30 g, lo cual se seca en 3-
4 días, la hoja en un día.
Una vez que ya está seco el material, se procede a picar. El picado se debe de hacer
finamente con ayuda de un exacto (cutter), cuchillo filoso o pinzas fuertes, para que la
extracción sea exhaustiva. El material fresco y seco se debe pesar para tener estos datos,
pues da detalles sobre la perdida de agua, etc.
La extracción se hace por maceración, por lo general, dos semanas. La raíz con CHCl3 y la
hoja con MeOH.
- Manejo de la polaridad de los diferentes disolventes con los que se cuenta.
Se dispone, generalmente, de hexano (Hx), cloroformo (CHCl3), acetato de etilo (AE), etanol
(EtOH) y metanol (MeOH).
Los disolventes que se usan para la extracción del material vegetal son el CHCl 3 y el MeOH.
- El Hx es el disolvente de menor polaridad con que se trabaja, sin embargo, esta muy
contaminado, por lo cual se usa únicamente para realizar la cromatografía en capa delgada
(ccd).
- El CHCl3 es el disolvente de mediana polaridad, junto con el AE, que se maneja. Su punto
de ebullición permite manipularlo mejor que el AE, y por una destilación simple en
rotaevaporador, funciona muy bien para la extracción del material vegetal.
- El MeOH es el disolvente de mayor polaridad, sin considerar al agua, con el que también
trabaja. Este disolvente es el que utiliza para extraer la hoja del material vegetal.
Se deben tener las precauciones para el manejo de los disolventes.

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4a Sesión
Tiempo de duración: 3h
Reconocimiento de extractos por cromatografía en capa delgada (ccd)

Una vez que pasa una semana de la maceración del material, se procede a filtrar el
disolvente, procurando que no se pierda o desperdicie el filtrado, lavando repetidas veces
con CHCl3, la raíz, y con MeOH, la hoja, y concentrando el(os) filtrado(s) por rotaevaporador.
El(os) concentrado(s) se pasa(n) a un frasco Gerber enjuagando perfectamente con el
disolvente respectivo, permitiendo que se evapore el disolvente, y obtener el rendimiento
de extracto una vez seco. El material vegetal se vuelve a colocar con CHCl3 y MeOH, raíz y
hoja respectivamente, para continuar con la extracción por una semana más. Al cabo de la
cual se hace el mismo procedimiento.

- Manejo de la cromatografía, tanto en columna abierta como en capa delgada.

Para conocer el comportamiento y/o contenido de metabolitos secundarios en los extractos
conseguidos, se procede a obtener la ccd de cada uno de ellos, utilizando diferentes
polaridades, bien con disolventes puros, o bien con mezclas de éstos.
Como ya se mencionó, debido a la falta de insumos, se trabaja con cantidades pequeñas,
por lo cual se emplean micropipetas de capilares para tomar las muestras de los extractos.
El tamaño de las placas de ccd son de 2-2.5 cm X 5 cm, por lo cual las cámaras para correr
estas placas también son pequeñas.
Las polaridades por utilizar para las ccd, empleando diferentes disolventes y observar el
comportamiento del extracto con estos, pueden ser:
Hx
Hx-CHCl3 8:2, 1:1 y 2:8 v/v
Hx-AE 8:2, 1:1 y 2:8 v/v
AE
CHCl3-MeOH 9:1 y 8:2 v/v
Para observar los compuestos en las placas se emplean, generalmente, reactivos
cromógenicos, que producen color al reaccionar con los compuestos produciendo manchas
en la ccd, algunas veces de colores otras de un solo color, todo depende del reactivo y de la
estructura de los compuestos, incluso en ocasiones, pueden ser visibles.
En el caso de esta práctica se emplean CoCl2 en H2SO4 y, principalmente, luz ultravioleta
(UV) de 365 nm, pues la estructura de las cumarinas permite observar en UV.
Una vez que ya se tenga cual es la polaridad en la que se ve un mayor número de
compuestos, se procede a empacar la columna de vidrio que sirve como columna de
cromatografía.

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5a-11a Sesión
Tiempo de duración: 21 h
Separación y Purificación de los extractos obtenidos por cromatografía en
columna abierta

Para empacar la columna se puede hacer en seco o en húmedo. En esta práctica se hace en
húmedo.
Se pueden utilizar una variedad de soportes y mallas para la cca, sin embargo, en la Facultad
únicamente se cuenta con sílica de 100-200 mesh, que si funciona. Se emplean 50-70 g de
sílica por 1 g de extracto por separar.
Una vez empacada la columna en húmedo, se procede a colocar la muestra disuelta en lo
mínimo de disolvente con ayuda de una pipeta Pasteur, cuando se hace en líquido como es
el caso. Aunque también se puede hacer en seco, colocando la muestra disuelta en un poco
de sílica, dejando evaporar el disolvente, y entonces colocarla en la columna.
Una vez colocada la muestra, se comienza a eluir con CHCl3 como disolvente, tomando
fracciones de 10-15 mL en frascos Gerber, procurando que la columna no se seque, es decir,
que no le falte CHCl3. Las fracciones así obtenidas se evaporan, generalmente en la campana
de extracción, y una vez secas o concentradas se toman muestras para ccd y observar cómo
va eluyendo el extracto. Se continúa eluyendo con CHCl3 hasta que en la ccd se observe, o
que no salga ya nada o que está saliendo una mezcla diferente. Entonces se aumenta la
polaridad de CHCl3 con AE, una mezcla de 9:1, 8:2 y 1:1 v/v, para después agregar puro AE
y posteriormente MeOH. A todas las fracciones que se obtengan se les debe hacer la ccd.
Las fracciones, que por ccd muestren lo mismo, se juntan.
Finalmente, se deben obtener, en las primeras fracciones, una furanocumarina, el
bergapteno, y después, otra furanocumarina, el contrayerbeno. Ambas cumarinas se
observan con luz UV de color verde, obviamente son diferentes rf, su cristalización también
es diferente, la primera son agujas finas y la segunda son prismas. La purificación se puede
hacer con un poco de éter etílico, todo con el debido cuidado, aprovechando que ambos
compuestos son parcialmente solubles en este disolvente.
Se obtiene rendimiento y punto de fusión (pf) de ambos metabolitos. Siendo el pf de
bergapteno de 195-197°C, y del contrayerbeno de 145-147°C.

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12a Sesión
Tiempo de duración: 3 h
Elucidación de las estructuras de los metabolitos secundarios aislados
Las muestras se envían, cuando es posible, a estudios espectroscópicos de RMN-1H, para
caracterizarlos sin ninguna duda, dando una explicación de las señales que se observan en
los espectros.
Concluida la práctica se elabora el informe final.
A lo largo de las sesiones de laboratorio de hacen preguntas y, además, como se está
llevando a la par la parte teórica se mencionan ejemplos de lo que están realizando practico-
teórico.

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ANEXO.
Medidas de seguridad generales en el uso de reactivos:
RESIDUOS PELIGROSOS QUÍMICOS (RPQ)
La ley general del equilibrio ecológico y la protección al medio ambiente Artículo XXXII,
residuos peligrosos a los elementos, sustancias, compuestos, Residuos o mezclas de ellos
que, independientemente de su estado físico, Representen un riesgo para el ambiente, la
salud o los recursos naturales, Por sus características corrosivas, reactivas, explosivas,
tóxicas, inflamables o biológico infecciosas.
Disposición general de residuos:
La norma oficial mexicana NOM 052 SEMARNAT 2005 establece las características, el
procedimiento de identificación, clasificación y los listados de los residuos peligrosos.
La caracterización de los RPQ, ha permitido definir como:
• Constituyentes tóxicos ambientales
• Agudos
• Crónicos
Aquellas sustancias químicas capaces de producir efectos adversos a la salud o al ambiente.
Códigos de peligrosidad de los residuos
NOM-052-SEMARNAT-1993
Características Código
Corrosividad C
Reactividad R
Explosividad E
Toxicidad T
Ambiental Te
Aguda Th
Crónica Tt
Inflamabilidad I
Biológico-infeccioso B
Fuente: Semarnat (2005:8)

Normas Mexicanas de peligrosidad de los residuos

NOM-053-SEMARNAT-1993, establece el procedimiento para llevar acabo la prueba de
extracción para determinarlos constituyentes que hacen aun residuo peligroso por su
toxicidad al ambiente.
NOM-054-SEMARNAT-1993, establece el procedimiento para determinar la
incompatibilidad entre dos o más residuos considerados como peligrosos.

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La incompatibilidad la define la norma como reacciones violentas y negativas para el
equilibrio ecológico y el ambiente, que se producen con motivo de la mezcla de dos o más
residuos peligrosos.
RESIDUOS PELIGROSOS QUÍMICOS
Consideraciones generales:
- Cada departamento o área de trabajo designará a un responsable de residuos, para efectos
de control y enlace con las autoridades.
- Cada departamento deberá tener las hojas de seguridad de cada uno de los reactivos
utilizados en el mismo.
- El generador de los residuos es quien tiene la máxima responsabilidad sobre ellos, no el
responsable del área
- Todo generador debe conocer el Reglamento, no sólo el responsable de residuos.
- La administración, dará a conocer a la comunidad de esta Facultad, el calendario de acopio
de residuos, el cual deberá ser al menos de seis (6) fechas, dos de las cuales deberán ser
antes de los periodos vacacionales largos verano y fin de año.
RESIDUOS PELIGROSOS DEFINICIONES
Corrosivo, cuando una muestra representativa presenta cualquiera de las siguientes
propiedades
Líquido acuoso, presenta un pH menor o igual a 2.0 o mayor o igual a 12.5 de conformidad
con el procedimiento que establece la Norma vigente correspondiente.
Sólido, que cuando se mezcla con agua destilada presenta un pH menor o igual a 2.0 o
mayor o igual a 12.5 según el procedimiento que se establece en la Norma vigente
correspondiente.
Líquido no acuoso, capaz de corroer el acero al carbón, tipo SAE 1020 a una velocidad de
6.35 milímetros o más por cada año a una temperatura de 55 0C, según el procedimiento
que se establece en la Norma vigente correspondiente.
Reactivo, cuando una muestra representativa presenta cualquiera de las siguientes
propiedades:
Líquido o sólido que después de ponerse en contacto con el aire se inflama en un tiempo
menor a cinco minutos sin que exista una fuente externa de ignición, según el
procedimiento que se establece en la Norma vigente correspondiente
Cuando se pone en contacto con agua reacciona espontáneamente y genera gases
inflamables en una cantidad mayor de 1 Lt x Kg del residuo por hora, según el procedimiento
que se establece en la Norma vigente correspondiente
Residuo que en contacto con el aire y sin una fuente de energía suplementaria genera calor,
según el procedimiento que se establece en la Norma vigente correspondiente.
Reactivo, posee en su constitución cianuros o sulfuros liberales, que cuando se expone a
condiciones ácidas genera gases en cantidades mayores a 250 mg de ácido cianhídrico.

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Por kg de residuo o 500 mg de ácido sulfhídrico por kg de residuo, según el procedimiento
que se establece en la Norma vigente correspondiente
Explosivo, cuando es capaz de producir una reacción o descomposición detonante o
explosiva solo o en presencia de una fuente de energía o si es calentado bajo confinamiento,
esta característica no debe determinarse mediante análisis de laboratorio, por lo que la
identificación de esta característica debe estar basada en el conocimiento del origen o
composición del residuo.
Inflamable, líquido o mezcla de líquidos que contienen sólidos en solución o suspensión
que tiene un punto de inflamación inferior a 60.5 0C, establece la Norma vigente, quedando
excluidas soluciones acuosas que contengan un porcentaje de alcohol, en volumen, menor
a 24 %.
No es líquido y es capaz de provocar fuego por fricción, absorción de humedad o cambios
químicos espontáneos a 25 0C.
Gas, que a 20 0C y una presión de 101.3 kPa, arde si se encuentra en una mezcla de 13 % o
menos por volumen de aire, o tiene un rango de inflamabilidad con aire de cuando menos
12 % sin importar el límite inferior de inflamabilidad.
Gas oxidante, que puede causar o contribuir más que el aire, a la combustión de otro
material.
MANEJO RESIDUOS LABORATORIO
El generador de un residuo es responsable de:
• Clasificar el residuo, que generó de acuerdo con su naturaleza, grado de peligrosidad
según la Norma Oficial vigente correspondiente, que establece las características, el
procedimiento de identificación, clasificación y los listados de residuos peligrosos.
• Si es necesario, consultar al responsable de residuos de su departamento o al personal de
la dependencia.
• Cuando el residuo del análisis pueda tratarse o disponerse en el laboratorio, el generador
de este debe realizar esta operación. Ningún residuo podrá ser desechado si no ha sido
neutralizado o tratado adecuadamente.
• Cuando el residuo no pueda ser tratado en el laboratorio, el generador debe colocar el
residuo en el envase indicado e identificarlo con la etiqueta oficial.

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 DIAGRAMA IDENTIFICACIÓN RESIDUOS PELIGROSOS

Material
residual
Residuo sólido a
la basura
No presenta
característica
de peligrosidad
Residuo líquido
al drenaje
Características Características Características
Químicas de Biológicas de Radioactivas de
peligrosidad peligrosidad peligrosidad

Clasificación Clasificación Material con

Corrosivo Punzocortantes radiaciones
Reactivo Sangre arriba de límites
Explosivo Patológicos ambientales
Tóxico No
Inflamable anatómicos

Guía técnica de Guía técnica de

Guía técnica de
acción para acción para
acción para
residuos residuos
residuos
biológicos radiactivos
químicos
Fuente: Guía técnica acción residuos químicos-UNAM-2012

18
 ANEXO 1
Cloruro de CAS Proveedor Descripción
cobalto
CoCl2 7646-79-9 Merck S.A. de Pictograma de peligro
Masa molar C.V.
129,83 g/mol

Indicaciones de peligro Puede provocar

cáncer por inhalación. Puede perjudicar a
la fertilidad. Nocivo en caso de ingestión.
Puede provocar una reacción alérgica en
la piel. Provoca lesiones oculares graves.
Puede provocar síntomas de alergia o
asma o dificultades respiratorias en caso
de inhalación. Se sospecha que provoca
defectos genéticos. Muy tóxico para los
organismos acuáticos, con efectos
nocivos duraderos

Etanol CAS Proveedor Descripción

C2H5OH 64-17-5 Merck S.A. de Pictograma de peligro
Masa molar C.V.
46,07 g/mol

Indicaciones de peligro. Líquido y

vapores muy inflamables. Provoca
irritación ocular grave. Consejos de
prudencia Prevención Mantener alejado
del calor, de superficies calientes, de
chispas, de llamas abiertas y de cualquier
otra fuente de ignición. No fumar.
Conectar a tierra/enlace equipotencial
del recipiente y del equipo de recepción.
Intervención EN CASO DE CONTACTO
CON LOS OJOS: Enjuagar con agua
cuidadosamente durante varios minutos.
Quitar las lentes de contacto cuando
estén presentes y pueda hacerse con
facilidad. Proseguir con el lavado.
Almacenamiento: En un lugar bien
ventilado. Mantener el recipiente
cerrado herméticamente.

19
 Hexano CAS Proveedor Descripción
CH3(CH2)4CH3 110-54-3 Merck S.A. de Pictograma de peligro
Masa molar C.V.
86,18 g/mol

Palabra de advertencia Peligro

Indicaciones de peligro Líquido y vapores
muy inflamables. Puede ser mortal en
caso de ingestión y penetración en las
vías respiratorias. Provoca irritación
cutánea. Puede provocar somnolencia o
vértigo. Se sospecha que perjudica a la
fertilidad. Se sospecha que daña al feto.
Puede provocar daños en los órganos
(Sistema nervioso) tras exposiciones
prolongadas o repetidas si se inhala.
Tóxico para los organismos acuáticos,
con efectos nocivos duraderos. Consejos
de prudencia Prevención Mantener
alejado del calor, de superficies
calientes, de chispas, de llamas abiertas y
de cualquier otra fuente de ignición. No
fumar. Conectar a tierra/enlace
equipotencial del recipiente y del equipo
de recepción. Evitar su liberación al
medio ambiente. Intervención EN CASO
DE INGESTIÓN: Enjuagarse la boca. NO
provocar el vómito. EN CASO DE
CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua
y jabón abundantes. Consultar a un
médico en caso de malestar.
Almacenamiento: Almacenar en un lugar
bien ventilado. Mantener el recipiente
cerrado herméticamente.

Metanol CAS Proveedor Descripción

CH3OH 67-56-1 Merck S.A. de Pictograma de peligro
Masa molar C.V.
32,04 g/mol

Líquido y vapores muy inflamables.

Tóxico en caso de ingestión, contacto con
la piel o inhalación. Provoca daños en los

20
 ojos. Almacenar en lugares bien
ventilados. Mantener el recipiente
cerrado herméticamente.

Cloroformo CAS Proveedor Descripción

CHCl3 67-66-3 Merck S.A. de Pictograma de peligro
Masa molar C.V.
119,38 g/mol

Líquido inflamable. Tóxico en caso de

inhalación. Se sospecha que provoca
cáncer y puede dañar al feto. Perjudica
determinados órganos (hígado y riñón)
por exposición prolongada y repetitiva.
Almacenar en un lugar bien ventilado y
protegido de la luz. Mantener el
recipiente cerrado.

Acetato de etilo CAS Proveedor Descripción

CH3CO2C2H5 141-78-6 Merck S.A. de Pictograma de peligro
Masa molar C.V.
88,11 g/mol

Líquido y vapores muy inflamables.

Provoca irritación ocular grave. Puede
provocar somnolencia o vértigo. La
exposición repetida puede provocar
sequedad o formación de grietas en la
piel. Mantener alejado de fuentes de
calor, chispas, llama abierta. Almacenar
en un lugar bien ventilado. Mantener el
recipiente cerrado herméticamente.

Éter dietílico CAS Proveedor Descripción

(C₂H₅)2O 60-29-7 Merck S.A. de Pictograma de peligro
Masa molar C.V.
74,12 g/mol

Líquido y vapores extremadamente

inflamables. Nocivo en caso de ingestión.
Puede provocar somnolencia o vértigo.
Puede formar peróxidos explosivos. La
exposición repetida puede provocar
sequedad o formación de grietas en la
21
 piel. Mantener alejado de fuentes de
calor, chispas, llama abierta. Almacenar
en un lugar bien ventilado. Mantener el
recipiente cerrado herméticamente.

Ácido sulfúrico CAS Proveedor Descripción

H2SO4 7664-93-9 Pictograma de peligro
Masa molar
98,08 g/mol

Provoca quemaduras graves en la piel,

así como lesiones oculares graves.
Almacenar en un lugar seco y bien
cerrado.

Gel de sílice CAS Proveedor Descripción

SiO2 7631-86-9 Merck S.A. de Polvo blanco, tamaño variable.
Masa molar C.V. Puede ser nocivo en caso de ingestión.
68,08 g/mol No respirar el polvo. Almacenar a
temperatura ambiente en lugar seco.

22
 ANEXO 2.
Programa de la Experiencia Educativa
FITOQUÍMICA
Nombre Fitoquímica. Teórico-Practico
Actualización X Nueva creación
Horas Teóricas Horas Prácticas Horas Otras Créditos
(HT) (HP) (HO) (C)
6 6
Área de formación Terminal, Química
Saberes
Teóricos Heurísticos Axiológicos
1. Introducción.
2. Rutas Biosintéticas - Manejo de las bases de datos
2.1 Derivados del Acetato con las que cuenta la UV,
2.1.1 Lípidos además de libros y revistas
2.1.2 Quinonas, digitales.
naftoquinonas, antraquinonas
2.2 Derivados del Ácido - Manejar los conceptos
Shikímico relacionados con la
2.2.1 Fenilpropanoides, fitoquímica.
derivados de ácido cinámico Honestidad
2.2.2 Flavonoides - Buscar, analizar y sintetizar Apertura
2.2.3 Cumarinas información científica Colaboración
2.2.4 Lignanos relacionada con los diferentes Autocrítica
2.2.5 Derivados del ácido metabolitos secundarios. Compromiso
benzoico Constancia
2.3 Derivados del Ácido - Identificar las principales Disposición
Mevalónico rutas biosintéticas que Respeto
2.3.1 Terpenos expliquen la formación de los Responsabilidad
2.3.1.1 Monoterpenos e distintos metabolitos
iridoides secundarios.
2.3.1.2 Sesquiterpenos
2.3.1.3 Diterpenos - Manejar el material vegetal.
2.3.1.4 Sesterterpenos
2.3.1.5 Triterpenos - Manejar la polaridad de los
2.3.1.5.1 Esteroles diferentes disolventes con los
2.3.1.5.2 Quasinoides que se cuenta.
2.3.1.5.3 Limonoides
2.4 Derivados de Rutas mixtas. - Manejar el rotaevaporador.
2.4.1 Alcaloides

23
3.1 Secuencia de Trabajo para - Manejar la cromatografía,
el estudio de un Producto tanto en columna abierta
Natural como en capa delgada.
3.1 Selección del material
vegetal por estudiar. - Interpretación de los
a) Información empírica resultados espectroscópicos
b) Información bibliográfica con los que se cuente.
3.2 Recolección y Clasificación
botánica del material vegetal - Elaboración del informe final
por estudiar.
a) Ubicación del material
vegetal
b) Recolección, separación,
secado y molienda del material
vegetal
c) Preparar un ejemplar para la
clasificación botánica
3.3 Extracción del material
vegetal
a) Disolventes Apolares
b) Disolventes medianamente
polares
c) Disolventes polares
3.4 Separación y Purificación
de los extractos obtenidos
a) Cromatografía en capa
delgada
b) Cromatografía en columna
abierta
c) Cristalización
3.5 Análisis Espectroscópico
del(os) metabolitos aislados.
a) RMN-1H
b) RMN-13C
3.6 Recopilación de resultados

24
Evaluación del desempeño
Evidencia (s) de Criterios de Ámbito(s) de Porcentaje
desempeño desempeño aplicación (%)
Exámenes parciales Evaluación del Aula, laboratorio 90
conocimiento
Presentación de Aplicación del Aula, laboratorio 5
una tarea de conocimiento
investigación
5
Defensa oral de la Aplicación del Aula, laboratorio
tarea de conocimiento
investigación

Total 100

Bibliografía
Básica
1. Dewick PM. 2009. Medicinal Natural Products: A Biosynthetic Approach. Wiley & Sons
2. Biologically Active Natural Products: Ed. Cuttler and Cuttler. CRC Press. USA, 2000.
3. Cseke LJ, Kirakosyan A, Kaufman PB, Warber SL, Duke JA, Brielmann HL. 2006. Natural
Products from Plants. CRC Press, Taylor & Francis.
4. Revistas Digitales del área, como Phytochemistry, Journal of Natural Products,
Fitoterapia, etc.

Complementarias
1. Bioactive Molecules and Medicinal Plants. Eds Ramawat and Mérillon, Springer 2007.
2. Natural Products isolations. Eds Sarker, Latif y Gray, Humana Press, 2006
3. Phytochemistry of Medicinal Plants. Eds Arnason, Mata y Romeo, Springer Science
1995
4. Modern Phytomedicine. Eds Ahmad, Aqil y Owais. Wiley-VCH Verlag, 2006
5. Biochemistry of Plants Secondary Metabolism. Ed Wink M. Wiley-Blackwell, 2010

25