Compuestos Cuaternarios de Amonio

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ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA

Estudio
tudio comparativo de efectividad antimicrobiana de varios compuestos
cuaternarios de amonio.
Por QFB. Marco Antonio Barrueta Alcalá
Organo Síntesis, Laboratorio de Microbiología.

Los compuestos de amonio cuaternario Tercera Generación. Es la mezcla de las dos


representan una familia de compuestos primeras generaciones de cuaternarios:
antimicrobianos, considerados como agentes Cloruro de Benzalconio (1a Generación) y el
activos catiónicos potentes en cuanto a su Cloruro de Alquil Dimetil Etilbencil Amonio
actividad desinfectante, ya que son activos (2a. Generación).
para eliminar bacterias gram positivas y gram
negativas,
ivas, aunque éstas últimas en menor La mezcla de estos dos cuaternarios resulta
grado. Son bactericidas, fungicidas y tener un incremento en la actividad biocida,
virucidas. mayor detergencia y un incremento en la
seguridad de los usuarios por una relativa
Primera Generación. Cloruro de Benzalconio, baja toxicidad. El uso de la mezcla coadyuva
también denominado como Cloruro de N N- a evitar la resistencia bacteriana al uso
Alquil Dimetil Bencil Amonio, donde la constante de una sola molécula. Nuestra
cadena alquílica puede tener variaciones en marca comercial es: OSSAMONIO 4280
la composición
mposición de número de carbonos
carbonos. Las (Cloruro de n-alquil
alquil dimetil bencil amonio y
cadenas alquílicas de 12 y 14 Carbonos, son cloruro de n-alquil
alquil dimetil etilbencil amonio).
amonio
los que presentan mayor poder antibacterial
por lo que el producto de OSSA está Cuarta Generación. Denominados "Twin or
fabricado de esta manera. Dual Chain Quats" o cuaternarios de "cadena
gemela", son productos cuaternarios con
Segunda Generación. No existe ya cadenas dialquílicas lineales
lineal y sin anillo
comercialmente. Es un producto cuya cuy bencénico, como por ejemplo Cloruro de
denominación química era:: Cloruro de N- N Didecil Dimetil Amonio, Cloruro de Dioctil
Alquil Dimetil Etil Bencil Amonio, es decir, Dimetil Amonio y Cloruro
Clo de Octil Decil
tiene un radical Etilo en el anillo aromático. Amonio.. Nuestra marca
mar comercial es:
OSSAMONIO 2280 (Cloruro
Cloruro de didecil dimetil
amonio).

CH3 CH3
C2H5
H2 H2
R1 N +
C Cl- R1 N +
C Cl-

CH3 CH3
Estos cuaternarios son superiores en cuanto ruptura de la membrana celular de las
a su actividad germicida, son de baja espuma bacterias y hongos produciendo su muerte.
y tienen una alta tolerancia a las cargas de
proteína y al agua dura. Los cuaternarios de amonio, en especial los
de cuarta y quinta generación son activos
Se recomiendan para desinfección en contra bacterias gram-positivas y gram-
industria alimenticia y de bebidas, ya que negativas, hongos y levaduras.
debido a su baja toxicidad se pueden aplicar
en estas industrias. Los de quinta generación presentan una
elevada actividad germicida y actúa en
C10H21 CH3 condiciones muy hostiles (presencia de
+ materia orgánica y/o aguas duras).
N Cl-
C10H21 CH3 Independientemente de la clasificación por
generaciones de los compuestos cuater-
narios de amonio, la actividad biológica de
Quinta Generación: Mezcla de las cuarta estos puede variar, dependiendo de la
generación con la segunda generación, es mezcla en particular. Debido a sus diferentes
decir, se mezcla el Cloruro de didecil dimetil características, se ha comprobado que la
amonio con cloruro de alquil dimetil bencil combinación de dos o más compuestos, es
amonio (cloruro de benzalconio) y el Cloruro más efectivo y menos tóxicos que el uso de
de alquil dimetil etilbencil amonio. La Quinta uno solo.
generación tiene un desempeño mayor
germicida en condiciones hostiles y es de uso Actividad antimicrobiana:
seguro. Nuestra marca comercial se llama Ninguna estudio o referencia en particular
OSSAMONIO 6480 (mezcla de 60% de identifica a todos los patógenos contra los
OSSAMONIO 2280 y 40% de OSSAMONIO que se han probado los desinfectantes-
4280). detergentes basados en cuaternarios de
amonio. Se ha establecido la eficacia contra
Mecanismo de acción. los patógenos más comunes indicados a
Los compuestos cuaternario de amonio son continuación:
detergentes catiónicos (contienen cargas
positivas), que disminuyen la tensión -Virus: VIH-1 (Virus del SIDA), Herpes simplex
superficial de una solución, aumentando la 1 y 2, Influenza A, Rubella, Vaccinia, Rabia,
permeabilidad de la membrana celular y entre otros.
facilitando la salida de protoplasma e ingreso
de agua al interior de la bacteria, haciéndola -Bacterias: Pseudomonas aeruginosa,
estallar. Staphylococcus aureus, varios tipos de
Salmonella como typhi, typhimurium o
Los cuaternarios de amonio inhiben la enteritidis, Escherichia coli, Enterobacter
respiración o producción ácida de las cloacae, Klebsiella pneumoniae, Proteus
bacterias gram-positivas, inhibiendo su vulgaris, Shigella flexneri, Streptococcus
metabolismo. Esto se traduce en una pyogenes, etc.
inactivación de los sistemas enzimáticos
productores de energía (glicólisis), -Hongos: Trichophyton mentagrophytes,
desnaturalización de proteínas esenciales y Candida albicans, Aspergillus niger (eficaz
contra el moho).
CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA

La concentración mínima inhibitoria es la Cada inóculo se comparó con un estándar de


mínima cantidad del agente antimicrobiano 0.5 de la escala de McFarland para obtener
que inhibe la multiplicación y producción de suspensiones bacterianas de cada cepa con
un crecimiento visible de una cepa dada en una concentración aproximada de 1-2x108
el sistema de prueba. UFC/mL.

Se determina la concentración en el Para cada cepa a probar y cada producto se


laboratorio incubando una cantidad preparó una serie de 10 tubos estériles a los
conocida de bacterias con diluciones cuales se agregó 1 mL de caldo Mueller
definidas del agente antimicrobiano y se Hinton. Al primer tubo se le agregó 1 mL de
expresa en ppm o mg/L. una solución del producto a analizar a una
concentración conocida. Se realizaron
Metodología: diluciones binarias transfiriendo 1 mL de
La determinación se realizó de acuerdo al forma sucesiva después de haber agitado
método cualitativo de macrodilución con Vortex. Al último tubo se le descartó 1
descrito por la NCCLS. En el laboratorio de ml para igualar volúmenes.
Investigación y Desarrollo se sintetizaron y
prepararon los siguientes compuestos: Posteriormente se adicionó 1 mL de la
-OSSAMONIO 2280 suspensión bacteriana estandarizada en
-OSSAMONIO 4280 cada uno de los tubos y se incubaron a 35
-OSSAMONIO 6480 ±2°C por 22 ±2h horas para bacterias, a
-Mezcla 1:1 de OSSAMONIO 2280 y 21±2°C por 120 horas para hongos y 48
OSSAMONIO CB80. horas para levaduras.
Los microorganismos que se utilizaron en
esta prueba son:
Se observaron los tubos en busca de
-Aspergillus brasiliensis (ATTC 16404) crecimiento en forma de turbidez o
-Candida albicans (ATCC 10231) sedimento. La concentración mínima
-Escherichia coli (ATCC 11229) inhibitoria (CMI) se calculó de acuerdo con
-Salmonella typhimorium (ATCC 13311) la dilución menor del producto en la que
-Staphylococcus aureus (ATCC 6538P) no se presentó crecimiento (turbidez y/o
-Pseudomonas aeruginosa (ATCC 9027) sedimento). El experimento fue realizado
por duplicado.

Prueba de Concentración Mínima Inhibitoria (ppm)


PRODUC. P. aeruginosa S. aureus S. typhimurium E. coli C. albicans A. brasiliensis
OSSAMONIO
15 10 16 25 12 200
2280
OSSAMONIO
20 12 20 20 12 480
4280
OSSAMONIO
15 10 15 20 12 250
6480
OSSAMONIO
12 10 15 20 12 200
2280/CB80
Resultados: cuenta bacteriana en un 99.99% también se
observó en los siguientes productos:
Con los datos obtenidos, se pudo demostrar OSSAMONIO 2280, OSSAMONIO 4280 y
que el compuesto cuaternario de amonio OSSAMONIO 6480. Gracias a estos
más efectivo contra las diferentes bacterias resultados se puede afirmar que estos
retadas es la mezcla del OSSAMONIO 2280 compuestos cuaternarios de amonio son
con el OSSAMONIO CB80; aunque la excelentes bactericidas.
concentración requerida para reducir la

Gráfico comparativo para Bacterias


30

2280
25

4280
20
2280
6480
CMI

15 4280
6480
10
2280/CB80 2280/CB80

0
P. aeruginosa S. aureus S. typhimurium E. coli

Gráfico comparativo para Hongos


600

500

400
CMI

300 C. albicans
A. brasiliensis
200

100

0
2280 4280 6480 2280/CB80
En cada producto también se analizó su Bibliografía
función fungicida y se obtuvieron Arenas, R. 1993. Micología médica ilustrada:
concentraciones mínimas inhibitorias clínica, laboratorio y terapéutica. Ed.
similares en los tres productos que Interamericana McGrawHill. México DF. 386
contienen el OSSAMONIO 2280. Para la p.
levadura Candida albicans se obtuvieron
resultados idénticos en los cuatro productos Jennifer M. Andrews. Determination of
demostrando su eficacia frente a esta minimum inhibitory concentrations.
levadura, mientras que para el Aspergillus Department of Microbiology, City Hospital
brasiliensis, los productos que contenían NHS Trust, Birmingham B18 7QH, UK. 2001
OSSAMONIO 2280 en su formulación fueron
los más efectivos contra el hongo ya que en Litter, M. 1992. Compendio de farmacología.
el OSSAMONIO 4280 la concentración se Ed. El Ateneo. Buenos Aires. 932 p.
incrementó notablemente.
Merianos, J. 1991. Quaternary ammonium
Se comprueba que los compuestos antimicrobial compounds. En: Disinfection,
cuaternarios de amonio son efectivos contra sterilization and preservation. 4th ed.
los hongos a bajas concentraciones por lo Chapter XIII. Lea & Fabiger. Philadelphia.
que son recomendables como fungicidas.
Royal A., Cutlen. 1967. A comparative study
of the odd and even chain homologues of 12
different quaternary ammonium compound
type antimicrobial agents. New York.

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