Copia de Micropipetas

2FB3B
Uso y
funcionamiento de
las micropipetas
RETO 6
Cultivo celular
Indice
01 03 05
¿Qué son las micropipetas? Partes de las micropipetas Buenas practicas
02 04 06
Tipos de micropipetas Dispensado Mantenimiento
01
¿Qué son las micropipetas?
Introducción
Las micropipetas son instrumentos muy utilizados en los
laboratorios ya que sirven para succionar y transferir pequeños
volúmenes de líquidos. Esto hace que sean muy útiles en
ensayos que requieren volúmenes de muy poca cantidad gracias
a su precisión y exactitud.
Introducción
El uso de micropipetas permite trabajar con
distintos líquidos sin tener que lavarlas ya que se
emplean puntas desechables, de plástico, que
habitualmente son estériles.
Existen diferentes tipos de puntas en función del

volumen a dispensar, teniendo desde los 0.2 uL a
los 1000 uL. Esto permite no contaminar nuestro
producto y trabajar de una forma segura evitando
contaminaciones.
Tipos de micropipetas
Existen diferentes tipos de micropipetas en función de si son manuales
o electrónicas, de volumen fijo o variable, monocanal o multicanal, de
desplazamiento de aire o de desplazamiento positivo, etc.
Pipetas electrónicas Pipetas de repetición
Las pipetas electrónicas son muy Las pipetas de repetición permiten

precisas y eliminan el riesgo de posible dispensar hasta 45 veces el mismo
error gracias a su avanzada tecnología. volumen de reactivo a partir de una
Mediante una pantalla electrónica sola carga. Esto es de gran ayuda en
configuras el volumen que quieres los ensayos que requieren un rápido
dispensar y automáticamente lo absorbe, pipeteo y una dispensación muy
dispensa o homogeniza en función de lo precisa. Requiere de un tipo de puntas
que selecciones. Esto permite obtener especiales pero al pipetear varios
resultados reproducibles y exactos y volúmenes a la vez, se reduce el gasto
disfrutar de un pipeteo sin fatiga. de puntas notablemente
Pipetas automáticas Pipetas multicanal

Es la más común en ensayos de
laboratorio. El volumen y la La función principal es la misma
dispensación se realizan de que la de las pipetas automáticas,
manera manual pero esto sirve de teniendo como novedad el poder
gran ayuda para controlar mejor la dispensar hasta 12 veces de una
dispensación en placas y geles y sola carga. Esto facilita mucho el
también en ensayos que requiera trabajo en placas de 96 pocillos ya
retirar líquidos o sobrenadantes que permite pipetear de manera
mucho más rápida.
Pipetas serológicas
A diferencia de las anteriores pipetas, las

serológicas son instrumentos de laboratorio
aptos para transferir volúmenes más grandes
(mL). Las pipetas serológicas disponen de
gradaciones que permiten ver el volúmen que
está siendo aspirado o dispensado. Estos
instrumentos comúnmente se utilizan junto a
un dispensador de pipeta (manual o
automático) el cual facilita la transferencia de
líquidos. Estas pipetas pueden ser de plástico,
estériles y desechables o de vidrio estériles y
reutilizables.
EJEMPLOS
Electronica Repeticion Automatica Multicanal Serologica
Partes de una micropipeta
1. Émbolo o botón de accionamiento. Tiene dos topes, el

primero sirve para absorber o dispersar el líquido y el
segundo para limpiar la punta por completo, retirando
cualquier líquido que quede.
2. Rueda o tornillo de ajuste del volumen
3. Botón eyector. Sirve para retirar la punta una vez usada.
4. Rueda de ajuste del volumen
5. Bloqueo del volumen. Muchas micropipetas tienen este
mecanismo para evitar cambios accidentales en la
configuración de volumen seleccionado durante el
pipeteo.
6. Indicador de volumen
7. Empuñadura o cuerpo de la pipeta
8. Eje y eyector de puntas. Al presionar el botón eyector,
entra en juego el eje y retira la punta impulsando la.
9. Soporte la punta. Es un sobresaliente que tiene el eje
que permite que las puntas encajen y se sujeten
perfectamente.
10. Punta desechable.
El pipeteo
A continuación se encuentran explicados 8 puntos a
tener en cuenta para realizar un correcto pipeteo:
1. Humedecer la punta. Con esto se consigue

aumentar la capilaridad entre el reactivo y la
punta y lo que hace es que el líquido no se
dispense fácilmente. Este punto no es aplicable
con algunos reactivos como el Tween debido a su
viscosidad.
2. Trabajar a temperatura ambiente. Está
demostrado que la temperatura afecta a la
precisión del pipeteo debido a la humedad
relativa y la presión de vapor del líquido, por eso
es aconsejable evitar cualquier tipo de error
trabajando siempre a temperatura ambiente.
El pipeteo
3.Tener cuidado con las puntas.
● Durante el aspirado no tocar la pared del recipiente con la punta para evitar
contaminaciones
● Una vez aspirado, revisar que en la punta no queden gotas en el exterior las cuales
desajustan el volumen dispensado. En caso de haber, intentar retirarlas deslizando
suavemente las puntas con el borde del recipiente.
● Dispensar el volumen tocando la pared del reservorio o el líquido que hubiera en él.
● Tras la dispensación y antes de soltar el botón de accionamiento, retirar el líquido que se
queda en la punta tocando contra la pared del recipiente.
4. Elegir bien las pipetas. Para aprovechar al máximo posible la exactitud de las micropipetas, es muy
importante tener en cuenta el volumen que se quiere dispensar. En función de ello elegiremos una
pipeta la cual su volumen nominal superior se acerque más al volumen que queremos dispensar.
Por ejemplo, si se quiere dispensar 200ul es preferible utilizar la pipeta de 200 ul que una de 1000 ul,
ya que en los volúmenes más bajos tienden a dar más errores.
El pipeteo
5. Hacer pausas de manera consistente. Una vez dispensado el
líquido haces una pausa de unos 2 segundos para confirmar
que todo el líquido ha sido bien dispensados. En función del
reactivo que sea este tiempo ha de ser superior (ej: Tween)
6. Aspirar la muestra con la pipeta en 90º y dispersar en 45º.
7. Usar la correcta profundidad de inmersión. Evitar sumergir

mucho la punta en la muestra ya que esto genera gotas en la
parte externa de la punta y si se sumerge demasiado poco
puede hacer que aspiremos aire.
8. Tratar de pipetear siempre de la misma manera. Con esto se

consiguen acciones repetitivas las cuales producen resultados
reproducibles; un punto muy importante en ensayos de
laboratorio.
Mantenimiento de pipetas
● La vida útil de un instrumento de laboratorio se resume en un buen uso y mantenimiento
del mismo. Es muy importante tener en cuenta ciertos aspectos a la hora de trabajar con
las pipetas y guardar una buena rutina ya que son muy frágiles y costosas.
● No forzar la rueda de ajuste de volumen. Es uno de los principales motivos de rotura de
pipetas, ya que al seleccionar el volumen a dispensar es muy fácil pasarse de la máxima
cavidad del instrumento. Esto hace que el émbolo se ceda y no deje dispensar el volumen
exacto o incluso llegar provocar la ruptura completa de la pipeta.
● Limpiar las pipetas una vez usadas. Debido al gran uso que se les da a las pipetas en el
laboratorio es necesario llevar una buena limpieza de ellas para poder evitar cualquier
tipo de contaminación cruzada. Por eso, un buen hábito de laboratorio es que en función
del ensayo que se vaya a llevar a cabo se deben limpiar una vez se empieza y una vez se
finaliza la práctica, pero sino con una buena limpieza una vez finalizado su uso sería
suficiente.
Mantenimiento de pipetas
Para esto se recomienda en función del líquido a dispensar usar un tipo de agente
esterilizante u otro:
● Es muy importante siempre terminar la limpieza con etanol y realizar una limpieza
profunda para retirar cualquier tipo de residuo. En el caso del exitus, es muy
importante dejarlo actuar unos minutos y después retirarlo completamente con etanol
ya que es uno de los reactivos causante de los mayores deterioros de las pipetas.
● Calibrar las micropipetas una vez al año. Un buen mantenimiento de las pipetas
conlleva una buena calibración, para ello se recomienda mandar a calibrar las pipetas
mínimo una vez al año para asegurarnos que se encuentran en buen estado. En caso
de percibir cualquier tipo de fallo en ellas, se deberá informar inmediatamente al
profesorado y que examinen la situación actuando de manera pertinente. Es muy
importante mandar a calibrar las pipetas con sus correspondientes puntas.

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Existen diferentes tipos de puntas en función del

Pipetas electrónicas Pipetas de repetición

Las pipetas electrónicas son muy Las pipetas de repetición permiten

Pipetas automáticas Pipetas multicanal

A diferencia de las anteriores pipetas, las

1. Émbolo o botón de accionamiento. Tiene dos topes, el

1. Humedecer la punta. Con esto se consigue

6. Aspirar la muestra con la pipeta en 90º y dispersar en 45º.

7. Usar la correcta profundidad de inmersión. Evitar sumergir

8. Tratar de pipetear siempre de la misma manera. Con esto se

exacto o incluso llegar provocar la ruptura completa de la pipeta.

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