BACILOS GRAM-POSITIVOS

Bacillus spp
Familia Bacillaceae
 Género Bacillus
Características generales

• Bacilos grampositivos esporulados

• Aerobios o anaerobios facultativos
• Ubicuos en la naturaleza (suelo, aire, parásitas)
• Especies más importantes:

B. anthracis: Carbunco
B. cereus: Intoxicaciones alimentarias
 GÉNERO BACILLUS
• Suelo → papel importante en el ciclo del C,
descomponen una amplia gama de materia
orgánica. Para ello se vale de
• Exoenzimas → descomponen los polisacáridos
y proteínas, que no pueden entrar en la
bacteria, hasta monosacáridos y aa, que ya
pueden entrar en la bacteria y ser utilizados.
• Catalasa (+)
• Hay especies móviles con flagelos peritricos
 GÉNERO BACILLUS
• Tª óptima de crecimiento muy variable (30-
45ºC)
• Algunos son termófilos extremos (Tª óptima =
65ªC)
• Bacillus stearothermophilus puede subsistir en
las fuentes de aguas termales (Tª > 100ºC) en
forma de esporas.
• Bacillus subtilis y Bacillus megaterium → muy
abundantes en el suelo. No patógenos.
BACILLUS SUBTILIS
BACILLUS SUBTILIS ESPORULANDO
 BACILLUS ANTHRACIS
• Primer m.o. visto al microscopio
• Primero donde se demostró la presencia de esporas
• Primero en el que se demostró que era responsable de
enfermedades infecciosas en animales
• Primero del que se hicieron vacunas
• Son bacilos grandes, de 3-6 µm de longitud
• En sangre pueden encontrarse aislados o en cadenas
cortas (2-3 bacterias)
• Producen cápsula
 BACILLUS ANTHRACIS
• Produce el ántrax o carbunco en óvidos y bóvidos
• El hombre se contamina por contacto directo, por
excrementos o por inhalación de esporas .
• Las manifestaciones clínicas del carbunco son:
- Cutánea → es la más frecuente. Se forma
una pústula con costra negra
- Pulmonar → por inhalación de esporas
- Gastrointestinal → la más grave y rara. Por
ingestión de carne contaminada
 Factores de Virulencia
Los bacilos de ántrax expresan dos factores de virulencia:

• Cápsula.
• Toxina

• Todas las cepas de B. anthracis virulentas son portadoras de

los plásmidos PXO1 y PXO2.

• La falta de uno de los dos da lugar a cepas atenuadas que son

las que se utilizan para la producción de vacuna.
 Cápsula
• Acido D-glutámico, es un polipéptido de alto peso molecular

• Forma una cápsula, que envuelve la pared celular y contribuye

con la patogenicidad permitiendo:

– La evasión de los mecanismos de inmunidad y defensa

como la fagocitosis.

– Convierte en incoagulable la sangre

– Responsable de las reacciones inflamatorias y necróticas.

 Toxina
• La toxina edematosa es una adenilciclasa dependiente de
calmodulina que aumenta el nivel del AMP cíclico, perturbando la
homeostasis del agua.

– Se piensa que es la responsable del edema masivo por

alteración del metabolismo del agua que se observa en las
formas cutáneas.

• La toxina letal es una zinc metaloproteasa que inactiva MAPKK. (la

proteína kinasa-kinasa mitógeno activada)

– La toxina letal estimula en el macrófago la liberación de TNF alfa

y de lL-1beta que son en parte responsables de la muerte súbita
en los enfermos de ántrax.
 CARACTERES CULTURALES
• Crecen en medios de cultivo ordinarios
• Tª óptima = 37ºC
• En medio líquido forman un enturbiamiento
dando lugar a copos blanquecinos que quedan
adheridos a las paredes o en el fondo del tubo
• En medios sólidos forman colonias en forma de
medusa o cabeza de león (extremos
filamentosos)
• Al microscopio, se ven grandes cadenas en forma
de caña de bambú ya que tiene los extremos
rectos.
.
.
.
.
 CARACTERES BIOQUÍMICOS
• Sembrado en picadura, a 22ºC, licúa la
gelatina en forma de abeto invertido.
• Es poco sacarolítico, no utiliza los hidratos de
carbono.
• Citrato (+)
• Indol (-)
• Reducción de nitratos (+)
 IDENTIFICACIÓN
• Trabajar con mucha precaución ya que es muy contagioso.
• A partir de una lesión cutánea, se elimina la costra y se
toma con un hisopo el exudado:
• Tinción de Gram → Bacilos Gram-positivos
• Se siembra en agar sangre y se incuba a 37ºC
• A las 18-24 h. aparecen colonias de 4-5 mm. de ø, planas,
de bordes irregulares, con protuberancias en forma de
coma.
• Confirmación:
- Tinción de esporas (+), Gelatinasa (+), Citrato (+),
Indol (-), Reducción de nitratos (+)
BACILLUS ANTHRACIS
ESTRUCTURA DEL BACILLUS ANTHRACIS
Bacillus cereus
 BACILLUS CEREUS
• Patógeno para el hombre
• Causa toxinfecciones alimentarias ya que
produce enterotoxinas
• La infección es producida por dosis mayores a
107 m.o. / g. de producto, y provoca vómitos y
diarreas
 IDENTIFICACIÓN
• Se puede aislar a partir de conservas contaminadas, de
heces o de vómitos:
• Siembra en agar Bacillus cereus → medio selectivo y
diferencial. Está compuesto entre otras cosas por
Polimixina, yema de huevo, Azul de bromotimol y
Manitol.
• Se incuba a 37ºC 24-48 horas.
• Colonias sospechosas → irregulares, de forma más o
menos de estrella, centro sobrelevado, blanquecinas
(aspecto de huevo frito) Halo lecitinasa +, degrada la
yema de huevo. Manitol (-), el halo se queda del color
del medio (azul).
 IDENTIFICACIÓN (2)
• Confirmación:
- Tinción de esporas (+)
- Gelatinasa (+)
- Amilasa (+)
- Rojo de metilo (+)
- Reducción de nitratos (+)
BACILLUS CEREUS
BACILLUS CEREUS
BACILLUS CEREUS
BACILLUS CEREUS
 Bacillus Bacillus Bacillus
anthracis cereus subtillis
Motilidad - + +
Hemólisis - + +
TSA Cabeza de Rugosas Grisáceas
medusa irregulares dentadas
TSB Copos de TUR. SED TUR SED
algodón
Cápsula + - -
Hidrólisis dela -
gelatina LENTA RAPIDA
Penicilina SENSIBLE NO SENSIBLE
Patogenicidad +++ -/+ -
 FAMILIA CLOSTRIDIACEAE
GÉNERO CLOSTRIDIUM
• Bacilos Gram-positivos esporulados
• Anaerobios estrictos
• Móviles por flagelos peritricos
• Repartidos en suelo, agua, aire e intestino de hombres
y animales
• Pueden ser confundidos con Bacillus por ser algunas
cepas microaerófilas. Diferencias:
- Clostridium → Forman esporas en
anaerobiosis. Catalasa (-)
- Bacillus → No forman esporas en
anaerobiosis. Catalasa (+)
 CLOSTRIDIUM PERFRINGENS
• Para esporular requiere medios especiales (Ellner,
Duncan y Strong)
• Es inmóvil si se aísla a partir de tejidos o lesiones,
pero si se aísla de la cérvix o cuello del útero es
móvil
• Se puede detectar la presencia de cápsula
• En agar sangre crecen colonias de borde entero,
convexas, con doble hemólisis (α en el exterior y
β alrededor de la colonia)
• Elevado poder sacarolítico y proteolítico.
C. PERFRINGENS (Tinción de gram)
CLOSTRIDIUM PERFRINGENS
PLACA DE AGAR DE YEMA DE HUEVO
C. PERFRINGENS (Doble hemólisis en agar sangre)
C perfringens: PATOGENIA Y CUADROS CLÍNICOS

•Ampliamente distribuido: suelo, tracto intestinal

•Toxinas histotóxicas: α (fosfolipasa), θ (hemolisina),
ß (necrotizante), κ (colagenasa), μ (hialuronidasa)
•Enterotoxinas
•Cuadros clínicos: Gangrena gaseosa
Celulitis anaerobia
Endometritis
Enteritis necrotizante
Toxiinfección alimentaria
 TOXIINFECCIÓN ALIMENTARIA
• Diarrea, dolor abdominal y vómitos.
• Por ingesta de alimentos contaminados en
anaerobiosis (en conserva), generalmente
carne.
• La responsable es una enterotoxina producida
por C. perfringens tipo A (existen 5 tipos que
se distinguen serológicamente: A, B, C, D y E)
que es el más activo sobre el hombre.
 GANGRENA GASEOSA
• C. perfringens es el responsable del 80 % de
los casos.
• Otras especies implicadas son C. septicum
(desenlace fatal), C. novyi, C. histolyticum y
C.bifermentans.
• Necrosis muscular y signos de toxicidad
sistémica debido a la producción de toxinas
histotóxicas.
 GANGRENA GASEOSA (2)
• No son m.o. invasores, se acantonan en el lugar
de la lesión y destruyen el tejido conjuntivo,
porque producen gran cantidad de metabolitos
tóxicos (necrotizantes, hemolizantes, letales) y
enzimáticos (hialuronidasa, colagenasa…)
• El tratamiento de las gangrenas gaseosas es muy
urgente y se basa en medidas quirúrgicas con
desbridamiento y extirpación de todos los tejidos
afectados y la administración de antibióticos a
altas dosis.
 CLOSTRIDIUM TETANI
• Delgado, apariencia de palillo de tambor.
• Esporas terminales gruesas, esféricas y
deformantes.
• Móvil.
• Colonia gris, translúcida, con borde irregular.
Pequeño halo de hemólisis.
• Productor del tétanos.
 TÉTANOS
• Producido por la toxina tetánica
(tetanospasmina) → Neurotoxina que bloquea
las uniones musculares de las neuronas
motoras, produciendo una parálisis rígida (los
músculos de contracción voluntaria quedan
contraídos de forma permanente)
• Tratamiento preventivo con vacuna.
• Inoculación de antitoxina tetánica (Ig
antitetánica)
•Patogenia: tetanoespasmina
•Ubicuo: suelo, tracto intestinal
•Cuadro clínico: tetano
•Diagnóstico: clínico
•Tratamiento:
Medidas de sostén
Neutralización de la
toxina
Vacunación
Eliminación de la fuente
•Profilaxis: Vacunación
PROFILAXIS ANTITETÁNICA EN HERIDAS

TIPO DE HERIDA

VACUNACIÓN
PREVIA LIMPIA SUCIA

No, dudosa o Vacunación Vacunación más

incompleta inmunoglobulina

Completa Nada (vacunar si hace Nada (vacunar si hace

más de 10 años desde más de 5 años desde
la última dosis) la última dosis)
 CLOSTRIDIUM BOTULINUM
• Bacilo grande.
• Esporas deformantes ovales en posición
subterminal.
• Móvil.
• Fermenta la glucosa.
• Agente causal del botulismo.
 Clostridium botulinum
•Muy ubicuo
•Patogenia: toxina botulínica
•Cuatro formas clínicas:
Intoxicación
alimentaria
Botulismos de herida
Botulismo del lactante
Botulismo de origen
desconocido
Diagnóstico: detección de la
toxina
Tratamiento: neutralizar la
toxina
 BOTULISMO
• Producido por neurotoxinas → 7 tipos: A, B, C,
D,E,F,G. Las activas en el hombre son A,B,E,F.
• La intoxicación alimentaria es la forma clínica más
frecuente y se produce tras la ingestión de
alimentos contaminados (conservas de carne, de
vegetales…)
• La toxina pasa del tubo digestivo a la sangre, y
puede llegar al sistema nervioso, bloqueando la
acción de la acetilcolina y produciendo la parálisis
flácida de los músculos y fallo parasimpático.
 BOTULISMO (2)
• La toxina es muy activa, con poca cantidad puede producir la
muerte:
- La toxina botulínica tipo A es la sustancia
más venenosa que se conoce.
- 1g de toxina, dispersada e inhalada, sería
suficiente para matar > 1 millón de personas.
- Dosis letal para el hombre:
· IV o IM: 0,09-0,15 µg
· Inhalada: 0,70-0,90 µg
· Oral: 70 µg
• Es una toxina bastante sensible al calor → 10 minutos a 100ºC la
destruye.
• Tratamiento: antitoxina polivalente (de origen equino)
 BOTULISMO: SINTOMATOLOGÍA
• Gastroenteritis: vómitos, diarrea, náuseas. NO
FIEBRE.
• Síntomas neurológicos: debilidad, mareos y
vértigo.
• Síntomas oftalmológicos: visión borrosa, diplopia,
pupilas dilatadas, respuesta lenta a la luz.
• Otros: debilidad músculos faciales, dificultad para
hablar y deglutir, sequedad de garganta,
debilidad muscular e hipotensión.
• Parálisis de los músculos respiratorios y
diafragma.
 APLICACIONES DE LA TOXINA
BOTULÍNICA
• 1989- FDA la aprueba como “orphan drug”
• Cepa Hall (lote certificado en 1979)
• Estrabismo
• Tortícolis espasmódica
• Blefarospasmo (cierre involuntario párpados)
• Distonías musculares
• Hiperhidrosis axilar (sudoración excesiva)
• Sialorrea (excesiva formación de saliva)
• Espasticidad tras ictus (muñeca, pie equino)
• Dermoestética (arrugas)
IDENTIFICACIÓN DE CLOSTRIDIUM
• Tinción de Gram: Bacilos Gram-positivos
• Tinción de esporas
• Siembra en medio Manitol-movilidad en
picadura → para ver la movilidad
• Siembra en medio CTA con discos de glucosa,
maltosa, sacarosa, lactosa, manitol… →
propiedades sacarolíticas
IDENTIFICACIÓN DE CLOSTRIDIUM
(2)
• Siembra en Leche tornasolada (Litmus-milk) y
en medio Carne cocida (Cook-meat) →
propiedades proteolíticas
• Siembra en agar sangre → Hemólisis
• Siembra en medio de Nagler (medio Agar
Columbia + Yema de huevo + Neomicina) →
Actividad lecitinasa y lipasa.
IDENTIFICACIÓN DE CLOSTRIDIUM
C.botulinum C. tetani C. perfringens C. difficile
Glucosa + - + +

Lactosa - - + -

Manitol - - - +

Lipasa + - - -

Lecitinasa - - + -

D.M.C.C. Habitualmente - - -
+
Cápsula - - + -

Movilidad + + - -