Fisologia de Membrana

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31 de agosto

FISIOLOGIA ANIMAL
de 2017

FISIOLOGIA DE LA MEMBRANA

Blgo. Victor Carbajal Zegarra

1.0 INTRODUCCION:

La vida celular depende de un continuo intercambio con el medio externo, ya que la célula debe tomar
de este, los nutrientes y expulsar hacia él, los productos de su metabolismo.

El intercambio se establece a través de la membrana celular, la cual se comporta como una estructura
semipermeable que permite el paso de determinadas sustancias e impide el de otras.

La membrana está constituida por una bicapa de moléculas lipídicas anfipáticas, orientadas de forma
tal que sus grupos polares quedan expuestos hacia las interfaces interna y externa, mientras los grupos
apolares se disponen hacia el interior, alejados del agua. La bicapa lipídica se ve interrumpida en
determinados puntos por la presencia de moléculas proteicas.

De acuerdo con la estructura molecular de las sustancias que atraviesan la membrana, el paso se
efectúa a través de la parte lipídica o de la proteica.

Las sustancias apolares se solubilizan en los lípidos de membrana y la atraviesan fácilmente; las
sustancias polares pequeñas atraviesan los polos proteicos. En ambos casos la sustancia se mueve
siguiendo su potencial químico y el mecanismo se conoce como permeabilidad simple. Las sustancias
polares, cuyo diámetro molecular sobrepasa el diámetro máximo de los poros, requieren de un
mecanismo especial de paso a través de la membrana, en el cual están involucradas las proteínas de
membrana; este mecanismo se conoce como transporte mediado o facilitado.

El transporte de sustancias a través de los compartimentos del organismo generalmente va seguido de


transporte de agua mediante el proceso conocido como ósmosis.

Cuando entre dos compartimentos separados por una membrana semipermeable existe una diferencia
de concentración de solutos, lo cual constituye un desequilibrio, el sistema restablece el equilibrio
moviendo el soluto y/o el solvente.

En la práctica se utilizan eritrocitos humanos y organismos unicelulares, que al lisarse liberan al


exterior la hemoglobina y algunas sustancias, en el primer caso, la solución se colorea de rojo. Al
medir el porcentaje de hemólisis provocado por una serie de soluciones cada vez más diluidas, puede
constituirse la curva de fragilidad de los eritrocitos, lo mismo ocurre con los organismos unicelulares.

2.0 MATERIAL:

2.1. Reactivos:

ClNa 0,17 M
Sacarosa 0,3 M

Blgo. Víctor Carbajal Zegarra / ESBI – DABI – FACI - UNJBG


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Urea 0,3 M
Glicerol 0,3 M
Solución Locke
Solución problema
Anestésico general

2.2. Equipo:

Equipo de disección

2.3.Material Biológico:

Sangre humana fresca


Rattus norvegicus

3.0 METODOLOGIA:

3.1. Determinación de la curva de fragilidad en eritrocitos:

Preparar una batería de tubos:

T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 T11
NaCl 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0
Agua 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0.0
Sangre 3g 3g 3g 3g 3g 3g 3g 3g 3g 3g 3g

- Homogenizar
- Medir la transparencia o turbidez
- Graficar la curva de fragilidad, considerando los valores de transparencia o turbidez.

3.2. Determinación de solutos penetrantes y no penetrantes:

Preparar una batería de tubos:

T1 T2 T3 T4
NaCl 0,17M 10 ml
Urea 0,3M 10 ml
Glicerol 0,3M 10 ml
Sacarosa 0,3M 10 ml
Sangre 3g 3g 3g 3g

- Agitar y dejar en reposo por 5 min. (en todas las soluciones el proceso debe durar el mismo
tiempo).

Blgo. Víctor Carbajal Zegarra / ESBI – DABI – FACI - UNJBG


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- Evaluar la transparencia o turbidez.


- Determinar la velocidad de penetración de las diferentes sustancias.

3.3. Transporte Activo:

- Pesar una rata en ayunas (24 h) e inyectar vía intra peritoneal un anestésico general.
- Situar al animal en posición dorsal en una tabla de disección y fijarla con esparadrapo.
- Hacer una incisión media abdominal y localizar la región pilórica duodenal.
- Perforar el mesenterio en esa zona y pasar por debajo del intestino un pedazo de seda de
aproximadamente 15 cm. Hacer sobre el intestino una pequeña incisión en forma de V.
- Medir a partir de esta zona 15 - 20 cm, de asa duodenal y repetir lo anterior.
- Introducir una jeringa con solución salina a 38C por la incisión en V superior y lavar la
porción del intestino.
- Ligar el intestino con la seda por encima de la incisión en V inferior.
- Introducir por la incisión superior una jeringa con solución problema a 38C y tratar de que el
segmento se llene de forma homogénea y que sus paredes no queden demasiado distendidas por
un exceso de volumen de solución patrón.
- Cerrar la ligadura superior por debajo de la incisión.
- Colocar las vísceras de nuevo en el interior del animal y bañarle frecuentemente con solución
Locke a 38C durante 20 min.
- Repetir las operaciones con la segunda rata agregando a la solución Locke que va a introducir
en el intestino 1 ml de solución de cianuro de potasio o colocarla en un ambiente frío.
- Extraer el segmento intestinal, secarlo en un papel filtro y vaciar su contenido en un tubo de
centrífuga. Centrifugar a 5,000 r.p.m. durante 5 min.

- Determinar la concentración y volumen de la solución problema:

4.0 CUESTIONARIO
1. Que características presenta la difusión simple.
2. Esquematice el mecanismo del transporte activo.
3. Diferencie un transporte facilitado de un co trasporte.
4. Qué mecanismo de transporte utiliza el ion sodio para atravesar la membrana celular.
5. Qué mecanismo de transporte utiliza el ion potasio para atravesar la membrana celular.
6. Qué mecanismo de transporte utiliza el ion cloro para atravesar la membrana celular.
7. Qué mecanismo de transporte utiliza el ion calcio para atravesar la membrana celular.

Blgo. Víctor Carbajal Zegarra / ESBI – DABI – FACI - UNJBG

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