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    Antibiograma

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    Maria Mas
    Este documento describe la prueba de difusión en medio sólido para determinar la sensibilidad de microorganismos a antimicrobianos. Se colocan discos impregnados con antimicrobianos en placas con cultivos bacterianos y se mide el diámetro de los halos de inhibición después de la incubación, lo que indica si el microorganismo es sensible, intermedio o resistente a cada antimicrobiano.

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    Antibiograma

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    Maria Mas
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    Este documento describe la prueba de difusión en medio sólido para determinar la sensibilidad de microorganismos a antimicrobianos. Se colocan discos impregnados con antimicrobianos en placas con cultivos bacterianos y se mide el diámetro de los halos de inhibición después de la incubación, lo que indica si el microorganismo es sensible, intermedio o resistente a cada antimicrobiano.

    Título original

    2. ANTIBIOGRAMA

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    Este documento describe la prueba de difusión en medio sólido para determinar la sensibilidad de microorganismos a antimicrobianos. Se colocan discos impregnados con antimicrobianos en placas con cultivos bacterianos y se mide el diámetro de los halos de inhibición después de la incubación, lo que indica si el microorganismo es sensible, intermedio o resistente a cada antimicrobiano.

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    Este documento describe la prueba de difusión en medio sólido para determinar la sensibilidad de microorganismos a antimicrobianos. Se colocan discos impregnados con antimicrobianos en placas con cultivos bacterianos y se mide el diámetro de los halos de inhibición después de la incubación, lo que indica si el microorganismo es sensible, intermedio o resistente a cada antimicrobiano.

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    ANTIBIOGRAMA

    PRUEBA DE DIFUSIÓN EN MEDIO


    SÓLIDO
    • Consiste en depositar discos impregnados de antimicrobiano sobre
    cultivos de m.o. en placa. La difusión del mismo a través del medio
    produce un halo de inhibición del crecimiento, cuyo diámetro será
    proporcional a la potencia del antimicrobiano.
    • Material: - Placas Petri de 9 cm. de diámetro.
    - Pinzas metálicas estériles o dispensador automático de
    discos.
    - Regla o pie de rey.
    - Mechero.
    - Tabla de valores de los halos de inhibición.
    • Reactivos: - Agar Mueller-Hinton
    - Discos de antimicrobiano
    - Agua destilada estéril
    TÉCNICA
    • Preparación de medio Mueller-Hinton: gran reproducibilidad de
    fabricación (composición homogénea de todos los lotes), permite el
    crecimiento de la mayoría de m.o. y no presenta efectos
    antagónicos con los antibióticos.
    • Vertido en placas: espesor del medio 4 mm.
    • Preparación del inóculo: se coge con el asa una colonia y se
    introduce en 5 ml. de agua destilada estéril.
    • Siembra-inoculación: Kirby-Bauer, Barry o inundación.
    • Elección de los antimicrobianos más adecuados: según las
    características tintoriales del m.o., lugar de infección, m.o.
    investigado…
    Los discos tienen un diámetro de 6 mm. y van impregnados con
    una concentración perfectamente estandarizada de antimicrobiano.
    Los discos se deben conservar en nevera a 4ºC.
    TÉCNICA (2)
    • Implantación de los discos:
    - Implantación manual→ se extrae cada disco de su tubo con unas pinzas estériles y
    se depositan sobre el medio, teniendo en cuenta que:
    · La distancia mínima entre los discos debe ser de 24 mm (para evitar la
    superposición de halos).
    · Se situarán a un mínimo de 15 mm del borde de la placa.
    · Placas de 9 cm de diámetro→ 6 discos
    · Presionar ligeramente cada disco con la punta de las pinzas para que queden
    fijados en el agar.
    - Implantación automática→ se utilizan dispensadores automáticos, de plástico del
    tamaño de una placa Petri, con unos orificios que permiten la colocación
    simultánea de todos los discos en el lugar adecuado.
    - Sistemas multidisco→ consiste en un soporte central al que van unidos los discos
    de diferentes antimicrobianos a la distancia y concentración adecuadas.
    • Incubación: 24 horas a 37ºC.
    RESULTADOS E INTERPRETACIÓN
    • Los resultados se expresan según el halo de inhibición que aparece
    alrededor de cada disco.
    • Se mide con una regla calibrada o un pie de rey el diámetro de los
    halos.
    • Los ø de los halos clasifican al m.o. como sensible (S), intermedio (I)
    o resistente (R) a cada antimicrobiano, según las normas
    recomendadas por los organismos oficiales, que incluyen tablas que
    relacionan dicho ø con la susceptibilidad del m.o.
    • La nomenclatura más utilizada para expresar los resultados
    corresponde al empleo de las siglas S, R o I:
    - Sensible: a las dosis habituales, el antimicrobiano es eficaz.
    - Intermedio: necesita un incremento de las dosis habituales.
    - Resistente: es ineficaz.
    OBSERVACIONES
    • Puesto que la difusión del antimicrobiano es casi
    instantánea, no debe moverse ningún disco una
    vez se ha puesto en contacto con el agar.
    • Si se detectan colonias dentro de un halo de
    inhibición, debe comprobarse la pureza del
    cultivo y repetir la prueba.
    • Para m.o. exigentes se emplean medios
    enriquecidos (agar sangre, agar chocolate, etc.)
    • Existen métodos automatizados.

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