ANÁLISIS INSTRUMENTAL Espectroscopía de Absorción

ESPECTROSCOPÍA DE ABSORCIÓN.
1. TÉRMINOS Y SÍMBOLOS UTILIZADOS EN ESPECTROSCOPÍA DE ABSORCIÓN.

Término y Símbolo Definición Nombre alternativo y símbolo

(nomenclatura antigua)
Energía (julios) de la radiación
Potencia radiante, Pt, P0 incidente en el detector, por m2 Intensidad de radiación, It, I0
y por segundo.

Absorbancia, A Log (Pt/Po) Densidad óptica D; extinción E

Transmitancia, T Pt/P0 Transmisión, T

Longitud de la trayectoria de
- l, d
la radiación en cm, b.
A/b·c
c se expresa en g/L, pero pueden
utilizarse otras unidades de
Absortividad, a. concentración; b en cm pero
Coeficiente de extinción, k.
pueden utilizarse otras unidades de
longitud.

Absortividad molar, ε. A/b·c Coeficiente de extinción molar, ε.

c se expresa en mol/L y b en cm.

2. LEYES FUNDAMENTALES DE LA ESPECTROSCOPÍA DE ABSORCIÓN.

Transmitancia: Se define como el cociente entre la

Refracción potencia radiante transmitida por la muestra y la potencia radiante
Po Pt incidente.

T = Pt/ Po El porcentaje de transmitancia %T = (Pt / Po)· 100

Dispersión
Reflexión Absorbancia: se define por la ecuación:

A = - log T = log (Pt / Po)

b
Puede observarse que la transmitancia de una disolución aumenta conforme disminuye la
transmitancia, A = 1 / log T , es decir que están en relación inversa.

2.1. Ley de Beer.

Teniendo en cuenta que la cantidad de luz absorbida por una sustancia depende del espesor
(b) y de la concentración (c) de la muestra que atraviesa la luz. Si consideramos constante el
espesor de la muestra (b = cte), la ley que rige la variación de la potencia luminosa con la
concentración será la siguiente:

dP / dc = K · b · P => dP / P = K · b · dc Integrando esta ecuación se obtiene:

log (Po / Pt) = K · b · c Ù Pt = Po · 10 - K · b · c

El coeficiente K caracteriza la absorción de la radiación por una sustancia dependiendo de la

longitud de onda, temperatura y naturaleza del disolvente empleado, y representa la “absortividad”
(a), (antiguamente se le denominaba coeficiente de absorción, extinción o índice de absorbancia)
Por tanto la ley de Lambert-Beer se expresa como:

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A=a·b·c o bien A=ε·b·c

Absortividad molar, ε. Es la absortividad cuando la concentración (c) se expresa en mol/L y el

espesor (b) en cm.

Absortividad específica, E. Es la absortividad cuando la concentración (c) se expresa en g/100mL y

el espesor (b) en cm. Ej.: E1%1cm 425 = 35
Indica que la sustancia tiene una absortividad específica de 35, en una disolución de 1 g de
soluto por 100 mL de disolución, para un espesor de muestra de 1 cm y a una longitud de onda de
425 nm.

2.2. Desviaciones de la ley de Lambert-Beer.

En la representación gráfica de A frente a la concentración se obtiene una línea recta, ya que

de la expresión de esta ley puede deducirse lo siguiente:
a: es constante para una longitud de onda fija, siempre que la determinación se realice a la misma
temperatura y con el mismo disolvente.
b: es constante siempre que se utilice la misma cubeta para la medida.

Por tanto las únicas variables que quedan son A y c. Y la ley puede expresarse como:
A = m · c => siendo m = a · b

A
La comprobación de que la ley de Beer
(A2,c2) no tiene desviaciones, será que la gráfica obtenida
ΔA
sea una línea recta. No obstante la ley de Beer
(A1,c1) sufre desviaciones que la mayoría de las veces
son más aparentes que reales y son debidas a
Δc
algunas de de las siguientes causas:
c
m = ΔA / Δc = (A2-A1)/(c2-c1)

1. En disoluciones de concentración próxima al intervalo de aplicabilidad. Las desviaciones

reales de la ley de Beer son insignificantes a concentraciones menores de 0,01 M, pero
pueden aumentar a concentraciones mayores, porque la absortividad puede variar al
cambiar el índice de refracción de la disolución (lo que suele ocurrir al aumentar
concentración). También a altas concentraciones, las partículas de soluto están más juntas
y se altera su distribución de carga y la capacidad para absorber radiaciones de una
determinada longitud de onda.

2. Carencia de monocromatismo de la luz incidente. Aparecen con frecuencia desviaciones

cuando se mide con un fotómetro de filtro, en el que la luz incidente tiene una ancha
banda de longitudes de onda, sobre todo si el centro de la banda no coincide con la
longitud de onda en que se mide la muestra con máximo de absorción.

3. Errores cometidos en el método que pueden ser químicos, instrumentales y personales.

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9 Errores instrumentales. Son aquellos inherentes al equipo y se conocen como errores

fotométricos. En general los equipos dan el mínimo error instrumental cuando se trabaja
con valores de absorbancia comprendidos entre 0,2 y 0,8 unidades de absorbancia.
9 Errores personales. Son los inherentes al analista y pueden ser los más difíciles de
eliminar.
9 Errores químicos. Fundamentalmente son de dos tipos:
ƒ Cambios químicos en el sistema y presencia de equilibrios. Los cambios mas
frecuentes son asociación, disociación, interacción con el disolvente (hidrólisis,
efectos del pH, etc.). la existencia de equilibrios ácido-base, redox, de formación de
complejos, etc.
ƒ Efecto del disolvente. Según el tipo de disolvente utilizado se pueden dar diferentes
efectos:
♦ Efecto batocrómico: Desplazamiento de la banda de absorción hacia el rojo (a
mayores λ).
♦ Efecto Hipsocrómico: Desplazamiento de la banda de absorción hacia el azul (a
menores λ).
♦ Efecto Hipercrómico: Valores elevados de absortividad provocan un aumento de la
pendiente y por tanto un aumento de la sensibilidad.
♦ Efecto Hipocrómico: Valores bajos de absortividad provocan una disminución de la
pendiente y por tanto una disminución de la sensibilidad.

En los errores químicos son los que en la medida de lo posible, puede actuar el analista para
evitarlos.

3. INSTRUMENTACIÓN EN ESPECTROSCOPÍA DE ABSORCIÓN.

Los aparatos comerciales utilizados en espectrofotometría pueden llegar a ser muy

complejos, pero todos son variantes del equipo básico que se representa en el siguiente diagrama.

Rendija de
Rendija de Salida
Entrada
Detector

Lectura

Registro

Analógica
Celda de
Muestra Digital
Fuente de Monocromador
Iluminación Ordenador

Amplificador
Componentes básicos de un espectrofotómetro.

3.1. Fuente de energía radiante. Se compone de sustancias que se excitan a una elevada energía
por calentamiento eléctrico, o bien por descargas de alto voltaje y cuando vuelven a estados
de energía menores o a su estado fundamental emiten fotones de energías determinadas, que
son los que se utilizan para excitar la muestra.

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3.2. Filtros y monocromadores. Se utilizan para seleccionar las bandas de longitud de onda
adecuadas que van a pasar a través de la muestra y será aquella longitud de onda en la que el
compuesto presente su máxima absorción. Con ello se mejora la sensibilidad del aparato de
medida a las variaciones de concentración de la sustancia a analizar.
Para llevar a cabo la reducción de la radiación policromática a una estrecha banda de
longitudes de onda (luz monocromática), se suelen utilizar filtros y monocromadores.

ƒ Filtros. Los filtros permiten la transmisión de longitudes de onda λ1

determinadas, absorbiendo la mayor parte de la radiación de otras λ2
λ3 λ1
longitudes de onda. Normalmente transmiten bandas de unas 20 a λ4
50 mμ. Suelen utilizarse dos tipos de filtros: λ5
λ6
9 Filtros de absorción. Absorben selectivamente las longitudes λ7
de onda no deseadas y aunque los hay de varios tipos los más Filtros
comunes son los de vidrio entintado.
λ1
9 Filtros de interferencia. Utilizan los fenómenos de λ2
interferencia de las ondas. λ3 λ5
λ4
λ5
λ6
ƒ Monocromadores. Reducen la radiación policromática a anchos λ7
de banda que varían entre 25 y 0,1 mμ. Los monocromadores están
constituidos por las siguientes partes:
9 Rendija de entrada de la radiación.
9 Colimador, lente o espejo.
9 Dispersor de la radiación, prisma o red de difracción (reflexión).
9 Lente de enfoque o espejo.
9 Rendija de salida.

Todas las partes del monocromador deben estar fabricadas con materiales transparentes a la
luz dentro del margen de longitudes de onda con las que trabaja y están montadas dentro de una caja
hermética a la luz externa. El monocromador es la parte más importante de un espectrofotómetro.
El elemento básico del monocromador es el “dispersor de la radiación”. Éstos suelen ser
de dos tipos:

¾ Prisma de dispersión (b). El prisma

desdobla la radiación policromática en
pequeñas bandas de longitudes de onda
que emergen del mismo a ángulos
ligeramente diferentes. Para seleccionar
una banda o una longitud de onda
deseada, se hace coincidir ésta con una
rendija de salida para que pueda pasar a
través de ella la banda (o longitud de
onda) seleccionada. Para ello se hace
girar el prisma hasta lograr el enfoque
correspondiente con la rendija.
El material de los prismas que se usa
en los monocromadores, debe elegirse
cuidadosamente para obtener un
funcionamiento óptimo. Debe tenerse en
cuenta tanto la transparencia como la
dispersión de la luz.

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¾ Redes o rejillas de difracción (a). Una red consiste en un gran número de líneas paralelas
(estrías) a intervalos muy próximos (de 5.000 a 20.000 por cm) sobre una superficie metálica
o transparente. Una de las ventajas de las redes de
difracción sobre los prismas es que las redes no
dependen de las propiedades dispersivas del material,
sino solamente de la geometría de la red. Suelen
emplearse dos tipos de redes de difracción:
9 Red de difracción por reflexión. En este tipo de redes las
estrías se graban sobre una superficie metálica altamente
pulida, como por ejemplo aluminio. Al incidir la luz de
diversas longitudes de onda, éstas producen máximos de
difracción a ángulos diferentes desdoblando el espectro
en sus diferentes longitudes de onda.
9 Red de difracción por transmisión. En este tipo de redes,
las estrías se graban sobre una película transparente. Las
líneas paralelas hacen entonces las veces de los espacios Detalle de red de difracción
opacos entre las rejillas, transmitiéndose por difracción la
luz a través de ellas.

¾ Lentes y espejos. La radiación a la entrada y salida del sistema de dispersión se colima

mediante lentes y espejos. El material empleado para las lentes debe ser transparente a la
radiación que se va a utilizar. En el infrarrojo se usan espejos, porque la mayoría de los
materiales no son lo suficientemente transparentes a esta radiación.

3.3. Recipiente para contener la muestra.

Las celdas o cubetas que van a contener la muestra, deben ser de material transparente a la
radiación en la región espectral que interesa trabajar. Entre los materiales
más utilizados para las distintas aplicaciones se encuentran los siguientes:

ƒ Celdas para ultravioleta. Materiales de “CUARZO” o “sílice

fundida”.

ƒ Celdas para visible. Materiales de “VIDRIO” o “cuarzo”.

ƒ Celdas para infrarrojo. Ventanas de sales, como “NaCl” o

“KBr”

3.4. Detección de la radiación.

Cualquier aparato fotosensible puede emplearse como detector de las radiaciones. Entre los
más utilizados se encuentran:
- Célula fotoeléctrica de vacío o fototubo.
- Célula fotovoltaica.
- Tubos fotomultiplicadores.
- Celda fotoconductora.
- Termopar.
- Termómetros.

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3.5. Amplificación y lectura.

Una vez que la señal eléctrica sale del detector, es recogida por el amplificador que la
convierte en otra señal mucho mayor que la de entrada.

Entre los sistemas de lectura más empleados están los siguientes:

- Registro gráfico.

- Lectura analógica.

- Lectura digital

- Ordenador.

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Resumen de los componentes ópticos de un espectrofotómetro

Componente Región ultravioleta Región visible Región infrarroja

Lámpara de descarga de Lámpara de filamento de Globar, filamento de

Fuente de radiación
hidrógeno o deuterio. wolframio. Nernst.

Dispersión de Prisma de cuarzo o red de Prisma de vidrio, red de Prisma de NaCl, KBr, CaF2,
longitudes de onda difracción. difracción o filtros. según la longitud de onda.

Ventanas de las células del

Lentes y celdas de cuarzo, Lentes y celdas de vidrio, mismo material que el
Lentes, celdas, espejos
espejos de aluminio. espejos de aluminio o plata. prisma, espejos de
aluminio.

Fotomultiplicador, Fotomultiplicador, célula Termopila,bolómetro

Detector
fotoconductor. fotoemisiva. fotoconductor.

4. VENTAJAS EN LA APLICACIÓN DE LOS MÉTODOS ESPECTROSCÓPICOS.

Los métodos espectroscópicos más empleados en análisis, son los basados en la absorción y
emisión de la energía radiante. La gran difusión de estas técnicas es consecuencia de los siguientes
factores:

ƒ El amplio intervalo de frecuencias de la energía radiante y sus diferentes formas de

interacción con la materia.

ƒ La existencia en el mercado de instrumentos cada vez más precisos.

ƒ Las ventajas inherentes a estos métodos. Entre ellas pueden destacarse las siguientes:
- El análisis suele ser muy rápido una vez establecido el método, excepto cuando se requiere
un tratamiento previo para eliminar interferencias.
- Es un método cómodo para medidas repetidas de un mismo constituyente. Lo que sucede
en la mayoría de los análisis de control.
- Es aplicable a cantidades muy pequeñas de constituyente, mucho menores que en los
métodos gravimétricos y volumétricos, y por tanto, adecuado al análisis de trazas.
- En general son métodos no destructivos, lo cuál es importante cuando el constituyente es
valioso.

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5. NOMENCLATURA ESPECTROSCÓPICA.

En el desarrollo de esta ciencia han surgido confusiones en los términos utilizados, de tal
forma que para un concepto o propiedad existen diferentes nombres. Para evitar esta confusión se
estableció una nomenclatura.

Esta nomenclatura establece que los conceptos relacionados entre sí deben tener nombres
similares. Esto se consigue añadiendo sufijos a la raíz de la palabra que expresa el concepto básico.
Entre los sufijos más utilizados se encuentran los siguientes:

Sufijo Significado Ejemplos

-OR Referido a un aparato o mecanismo Reflector, transistor, etc.

Indica una propiedad de un aparato o Transmitancia, absorbancia,

-ANCIA cuerpo. capacitancia, etc.

Densidad, solubilidad,
Indica una propiedad constante de la
-IDAD sustancia.
absortividad, emisividad,
conductividad, etc.
Potenciómetro, polarímetro,
- METRO Indica un aparato de medida.
espectrofotómetro, etc.

- SCOPIO Indica un aparato óptico o de visión. Microscopio, espectroscopio, etc.

-SCOPÍA Significa observación. Microscopía, espectroscopía, etc.

- GRAFO Indica un aparato de registro. Espectrógrafo, cromatógrafo, etc.

Indica un registro producido por un Cromatograma, espectrograma,

- GRAMA aparato. etc.

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