FORMATO PRÁCTICA DE LABORATORIO

Ejecución de la Formación Profesional

Desarrollo Curricular

TALLER No. 3
MICROSCOPIA

1. OBJETIVOS:

Adquirir habilidad en el uso y manejo correcto del microscopio, identificando sus partes y funciones
de cada una de ellas.
Adquirir destreza en la preparación de muestras sencillas.
Manejar las unidades de medida y utilizarlas en mediciones y conteos aproximados de objetos y
células.

2. MARCO TEORICO
El microscopio es un instrumento óptico que produce una imagen aumentada de los objetos.
En los últimos tres siglos ha permitido ampliar el campo de las investigaciones biológicas y se han
convertido en el instrumento básico para establecer nuevas fronteras en la biología.
La lupa es el microscopio más simple y fue utilizada inicialmente por algunos investigadores para
adquirir os primeros conocimientos del mundo microscópico. Posteriormente se perfecciono y en la
actualidad hay varios tipos de microscopios algunos de ellos altamente específicos, para una gran
variedad de usos, tales como: microscopio simple, compuesto (invertido, de fluorescencia, de luz
ultravioleta, de luz polarizada, de contraste de fase, de campo oscuro) y electrónico (de transmisión
y de barrido).

3. DESCRIPCION Y FUNCIONES DE LAS PARTES DEL MICROSCOPIO.

En general, todos los microscopios tienen las mismas partes, con funciones análogas en cada uno.
Las formas y ubicación de tales partes, así como su diseño, pueden cambiar de acuerdo con el
modelo del microscopio considerado, pero no su función. Las principales partes del microscopio
son:
 Ocular: lente situado cerca del ojo del observador. Capta y amplía la imagen
formada en los objetivos.
 Objetivo: lente situado en el revólver. Amplía la imagen, es un elemento vital que
permite ver a través de los oculares.
 Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.
 Diafragma: regula la cantidad de luz que llega al condensador.
 Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
 Tubo: es la cámara oscura que porta el ocular y los objetivos. Puede estar unida al
brazo mediante una cremallera para permitir el enfoque.
 Revólver: Es el sistema que porta los objetivos de diferentes aumentos, y que rota
para poder utilizar uno u otro, alineándolos con el ocular.
 Tornillos macro y micrométrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina o el
tubo hacia arriba y hacia abajo. El macrométrico permite desplazamientos amplios
para un enfoque inicial y los micrométricos desplazamientos muy cortos, para el
enfoque más preciso. Pueden llevar incorporado un mando de bloqueo que fija la
platina o el tubo a una determinada altura.
 Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca
la preparación, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de
iluminación situada por debajo. Dos pinzas sirven para retener el portaobjetos
sobre la platina y un sistema de cremallera que permite mover la preparación.
Puede estar fija o unida al brazo por una cremallera para permitir el enfoque.
 Brazo: Es la estructura que sujeta el tubo, la platina y los tornillos de enfoque
asociados al tubo o a la platina. La unión con la base puede ser articulada o fija.
 Base o pie: Es la parte inferior del microscopio que permite que éste se mantenga
de pie.

4. LOS CUIDADOS QUE SE DEBEN TENER CON EL MICROSCOPIO.

Además de lo ya anotados, es indispensable observar las siguientes precauciones al transportar o

utilizar el microscopio:
 Al tomar el microscopio para transportarlo, debe tomarse con las dos manos, por la base y
por la columna
 Al colocar el microscopio sobre la mesa de trabajo, por ningún motivo debe haga los dedos
de la bases del aparato sino hasta cuando estos tocan la mesa y luego retirarlos
cuidadosamente
 Jamás arrastre el microscopio sobre el mesón de trabajo.
 Al instalar el microscopio:
 Asegúrese de que está apagado y con el voltaje al mínimo.
 Conéctelo a la toma corriente.

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 Enciéndalo. El bombillo tendrá una mayor duración cuanto menor sea el voltaje con que se
lo utilice cotidianamente.
 No haga girar el revolver empujando o tirando de los objetivos, sino de las yemas de los
dedos aplicada sobre la base circular con borde estriado situada en la parte superior del
mismo
 Al manipular el sistema de sujeción de gancho o de pinza que sujeta al portaobjetos,
hágalo con sumo cuidado.
 Al terminar la practica-salvo indicación contraria-retire la placa que haya observado en
último término y limpie la platina con una servilleta de papel
 Apague el interruptor (posición “O”), coloque en 0 la perilla del voltaje y después
desconecte el cable del tomacorriente.
 Permita que pasen 2 o 3 minutos para que el bombillo se enfrié lentamente.
 Mientras espera, haga descender totalmente la platina, deje en posición de enfoque el
objetivo de menor aumento y centre el carro.
 Deje el microscopio sobre el mesón de trabajo para que el auxiliar lo revise.

ANALISIS DE ALGUNOS CONCEPTOS BASICOS DEL MICROSCOPIO

PODER DE AUMENTO DEL MICROSCOPIO

El poder de aumento la capacidad que posee el microscopio de multiplicar el tamaño del objeto que
se observa. Así, si un objeto mide 1 mm de longitud y al observarlo en el microscopio se ve de
10mm de longitud, ello quiere decir que el poder de aumento de los lentes utilizados es de 10
veces. El poder de aumento está dado por el producto entre los aumentos proporcionados por el
ocular y el objetivo que se utilice.
Si se utiliza un ocular 10X con un objetivo 10X, el poder de aumento obtenido será de 100 veces;
mientras que si se utiliza el mismo ocular (10X) un objetivo 40X, el poder de aumento obtenido será
de 400 veces. “X” quiere decir “veces”. Así, 100X quiere decir que estamos viendo el objeto
observado 100 veces más grandes que su tamaño real.

 DIAMETRO DEL CAMPO VISUAL

El campo visual es el área circular que se observa al mirar por lo oculares. Aunque siempre el
campo visual se vea del mismo tamaño, en realidad este cambia según el objetivo que se utilice.
EL diámetro del campo visual (Φd) se calcula dividiendo el valor del número de campo que
aparece en el ocular (18) entre el aumento del objetivo que se está utilizando. Así, a mayor
aumento del objetivo, el divisor de la operación será mayor y por lo tanto el resultado (diámetro del
campo) será menor. En consecuencias, el área real del campo que se observa será igualmente
menor.
Conociendo el diámetro del campo visual se puede calcularse muy fácilmente el tamaño de, por
ejemplo: un cristal de sal o de una célula, el grosor de un cabello, o la longitud de un protozoario,
utilizando la Φd=(número de campo ocular(18)/(aumento del objetivo) tamaño de
células=(∅d)/(Numero de células observadas)
Calcule los diámetros (mm) y las correspondientes áreas (mm2) de los campos visuales, así como
las dimensiones (mm) de algunas de las letras que observo y consigne los resultados de la
siguiente tabla.
OBJETIVOS AUMENTO DEL OBJETIVO DIAMETRO DEL CAMPO AREA DEL CAMPO
VISUAL
A=〖π.d〗^2/2 DIMENSIONES
DE LA LETRA
4X
10X
40X
100X

PODER DE RESOLUCION DEL MICROSCOPIO

El poder del microscopio la capacidad que tiene el instrumento para permitir al observador
diferenciar dos puntos que a simple viste parecen uno solo, debido a la escala de estancia que los
separa. El poder de resolución del ojo humano es de unos 72µm, el de un microscopio corriente de
0.2µm, y el del microscopio electrónico de hasta 0.001µm. Asi, por ejemplo, para que el ojo
humano (sin ninguna ayuda óptica) pueda ver dos punto como tales, estos deben estar separados
por al menos 72µm; mientras que al usar un microscopio electrónico los dos puntos podrán
observarse separados incluso si están a solo 0.001µm.
El poder de resolución (R) depende de la longitud de la onda de la luz (λ) y que en el espectro de
radiación solar (o luz visible diurna) está entre 400 y 700 nm; del tipo de filtro que se utilice en cada
observación y de la abertura numérica del objetivo (AN). Todo lo anterior se condensa en la
formula.
R=λ/2AN
Si no se utilizan filtros que modifiquen sustancialmente la longitud de onda que incide sobre la
muestra que se observa y teniendo en cuenta que la luz del bombillo del microscopio tiene una

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longitud de onda de aproximadamente 640 nm entonces, para un objetivo 40X el poder de

resolución será:
R=640/(2xo.65)
R= 492.3
Cuáles serán los poderes de resolución de los objetivos 4X y 10X
______________________________________________________________

UNIDADES DE MEDIDA UTILIZADAS EN MICROSCOPIO SIMPLE

De acuerdo con el poder de aumento y de resolución que posee su microscopio, las unidades de
medida que se utilizaran normalmente son el milímetro (mm), el micrómetro (µm)y el nanómetro
(nm)
EQUIVALENCIAS:
1mm=1.000 µm 1µm=1000mm
1 µm=0,001mm 1nm=0.001µm; 1X 1O^(-6)mm
RESPONDA:
¿Cuántos µm caben en 20 mm?______________________________________
¿Cuántas veces es menor 1 µm que 1 mm? ________________________________
¿Cuántos µm hay en 0.1 mm? ______________________________________
¿Cuántos veces mayor es 0.674 mm que 1 µm?___________________
¿De acuerdo con el grosor encontrado del cabello, cuantos µm tienes Este de grueso?
__________________________________
¿Si se supone que el diámetro de un grano de polen es de 0, 05 mm; cuantos cabrán en 2600µm,
en 10 mm y en 150nm?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________
¿Ordene los microorganismos A, B y C en orden ascendente según su tamaño:
A: 130µm B: 0,006mm; C: 54.000nm.
Para facilitar el cálculo, convierta todos los valores a una misma unidad y luego
ordénelos.____________________________________________________________

MATERIALES EQUIPOS E INSUMOS.

MATERIALES Y REACTIVOS
1 microscopio
portaobjetos
cubreobjetos (laminillas)
*servilletas de papel
*hilos de color
*goteros
*tijeras
*cabellos humanos
*granos de polen (flores con anteras madura)
*papel periódico
.0.5 ml Aceite de inmersión
*LOS MATERIALES QUE APARECEN CON UNA ASTERISCO DEBEN SER APORTADOS POR
LOS APRENDICES

5. PROCEDIMIENTO

5.1 PREPARACION DE UNA MUESTRA EN FRRESCO (PLACA HÙMEDA)

a) Lave el portaobjetos con jabón y abundantes agua y séquelo, preferiblemente, con una
servilleta de papel.
b) con un gotero coloque una gota de agua en el centro del portaobjetos y después ponga en
ella un pedazo de hilo de color aproximadamente 0.5 centímetros de largo. Cubra con una laminilla
o cubreobjetos
c) apoye el cubreobjetos en un ángulo de 45 grados con relación al portaobjetos y déjelo
caer lentamente. De esta manera se evita la formación de burbujas que podrían dificultar la
observación. Si queda agua por fuera del cubreobjetos, séquela con papel absorbente. Igualmente,
seque el portaobjetos si esta queda por debajo, ya que la humedad lo pega a la platina y le impide
desplazarse cuando el carro se mueve
NOTA: No siempre las muestras en fresco se preparan con agua. En algunos casos es necesario
utilizar otras sustancias, como colorantes o soluciones adecuadas, según el tipo de materiales que
se quiera observar.

5.2 OSERVACION DE UNA MUESTRA

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De la forma como usted utilice el microscopio de pende el éxito de sus observaciones se

recomienda seguir siempre el procedimiento que acontecimiento se explica.
Colocación de la muestra: coloque sobre la platina la placa de hilo que acaba de preparar y fíjela a
ella utilizando la pinza que para el efecto tiene el microscopio centre la muestra en el orificio de la
platina con las perillas del carro.

 ILUMINACION DEL CAMPO VISUAL: Coloque en posición de observación el objetivo

4Xy abra lentamente el diafragma haciendo coincidir la abertura numérica del objetivo, que para el
caso de 4X es 0.10, con el mismo valor (0.10) en la escala de abertura de diafragma. Suba hasta
el tope la platina, sin forzar el sistema, con la perilla micrométrica. Luego, mirando por los oculares,
obtenga una iluminación homogénea del campo visual con la perilla del voltaje.
 USO DEL OBJETIVO: Una preparación siempre se observa primero, con el objetivo de
menor aumento, 4X en este caso, para obtener un buen enfoque. La parte que se desea observar
con objetivos de mayor aumento (10X, 40X Y 100X) debe centrarse en el campo visual. Siempre
que vaya a cambiar de objetivo, ajuste de iluminación con la escala de abertura del diafragma, tal
como se explicó antes. Si es necesario, utilice también la perilla reguladora del voltaje. Gire
lentamente el revolver por medio de la rosca estriada de su parte superior, con el fin de poner el
objetivo de 10X en la posición adecuada, sin mirar por lo oculares. A continuación mire por ellos y
si requiere nitidez la imagen, gire la perilla micrométrica.

Realice un esquema de lo observado y repita el procedimiento, pero utilizando el objetivo de 4x.

Compare estas imágenes entre si ¿qué relación encuentra entre sus tamaños? ¿ a qué se deben
esas?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
Utilice el mismo procedimiento con materiales como materiales como: caballeros grados de
polen y una letra asimétrica (no utilizando las letras O,X,S ni las mayúsculas I,H,N y Z). Póngala
en la platina en posición normal de la lectura y enfoque.
Realice el esquema correspondiente. ¿Cómo se ve la imagen con relación a la poción de la lectura
en el portaobjetos?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
__
¿Qué proporción aproximada de ella puede ver con relación a la obtenida con el objetivo de 4X?
_____________________________________________________________________________
Empleando cualquieras de las muestras anteriores enfoque en 10X. Desplace el carro hacia la
derecha, sin dejar de mirar por los oculares. ¿En qué dirección se mueve la imagen?
_______________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
Desplácelo luego hacia la izquierda y fije de nuevo en la dirección que se mueva la imagen. Tome
ahora la otra perilla del carro y muévalo hacia delante y hacia atrás. Al hacer cada uno de estos
movimientos. ¿En qué dirección se desplaza la imagen?
_______________________________________________________________
Para entender en forma práctica lo que es el poder de resolución. Tome un papel delgado con
letras impresa haga un montaje en fresco y enfoque cualquier letra en 4X, en 10X y en 40X.
¿Cómo puede relacionar los valores numéricos de los poderes de resolución obtenidos para cada
objetivo y la observación de las letras que acaba de hacer en 4X, 10X y 40X? ¿Cómo explicas lo
anterior?
_______________________________________________________________________
d. obtención de la imagen: mirando por lo oculares, aleje o acerque lentamente la platina con la
perilla macro métrica hasta que aparezca la imagen. Si en este momento lo consideras necesario,
mejore la iluminación con la perilla reguladora del voltaje o la de la reguladora de voltaje o con la
del condensador de abertura. Moviendo los oculares, ajuste la visión a su distancia interpupilar.
Igualmente, ajuste la visión binocular con el anillo de dioptrías, de la siguiente manera: mire con el
ojo derecho por el ocular respectivo (derecho), manteniendo cubierto el ocular izquierdo con una
hoja de papel o con algo similar, y enfoque con la perilla micrométrica lo mejor posible. Ahora
proceda a ajustar el izquierdo así: cubra el ocular derecho, mire con el ojo izquierdo por el
respectivo ocular y enfoque con el anillo de dioptrías
e. resultado de la observación. Haga un esquema de lo observado, enmarcándolo con un circulo e
indicado a un lado el aumento con el que trabajo. Siempre que dibuje un objeto que este viendo
con un microscópico, cumpla esta instrucción. Además, indique con flechas y nombres las
estructuras que pueda distinguir en él.
NOTA: deseche los portaobjetos y cubreobjetos rotos en el guardián. Las servilletas, el papel
periódico, los hilos, los cabellos y flores en el recipiente Nº 19 con bolsa verde de desechos
biológicos no patógenos.

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