Curva de Crecimiento

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Curva de Crecimiento

Bacteriano

Roa-Angulo, Virginia, 2020


Crecimiento Microbiano

En microbiología el crecimiento se
define como el incremento en el
número de células.

La bipartición (fisión binaria) es el


proceso por el cual una célula se
divide para formar dos células
iguales.

El intervalo que transcurre en la


formación de dos células a partir de
una célula se llama generación y el
tiempo requerido para esto es el
tiempo de generación, tiempo de
regeneración o tiempo de
duplicación: tg, tr o td
Recuperado de:
https://es.slideshare.net/microbiologia.dad/crecimiento-
microbiano
Parámetros relacionados con el desarrollo
microbiano
Temperatura

Probablemente sea la
temperatura el más importante
de los factores ambientales que
afectan la viabilidad y el
desarrollo microbiano.

Cualquier temperatura por


encima de la máxima de
crecimiento de un determinado
microorganismo resulta letal
para el mismo, pero esto
depende de la
termorresistencia. Recuperado de: https://www.researchgate.net/figure/Figura-6-Curva-de-
crecimiento-en-funcion-de-la-temperatura-Se-observan-las-
temperaturas_fig2_324495501
Parámetros relacionados con el desarrollo
microbiano

Psicrófilos: Crecen 0° C a 15 ºC.


Los más comúnmente encontrados
en los alimentos. Alcaligenes sp.,
Pseudomonas sp. y Streptococcus
sp.
Mesófilos: Crecen en intervalos de
20 a 45° C. Temperaturas óptimas
entre 30 y 40º C.
Termófilos: 50 a 75° C. Rango
óptimo entre 55 y 65ºC. Bacillus sp.
y Clostridium sp.
Termófilos Extremos o Extremófilos:
Condiciones fuera de las normales.
Recuperado de: https://docplayer.es/78493769-Capitulo-6-
crecimiento-microbiano-prof-carlos-montelara-tirado.html
Parámetros relacionados con el desarrollo
microbiano

Psicrótrofos: 0° a 7º C.
Temperatura optima entre 20 y
30º C.

Bacterias: Aeromonas sp.,


Enterobacter sp., Citrobacter sp.,
Proteus sp., Pseudomonas sp.

Levaduras: Candida sp. y


Torulopsis sp.

Mohos: Penicillium sp.,


Cladosporium sp. y Aspergillus
sp.

Recuperado de:
https://www.researchgate.net/figure/Pseudomycelium-of-
Torulopsis-apis-BKM-Y-1538-slide-culture-on-morphology-
agar-2OQC-I0_fig2_237116118
Parámetros relacionados con el desarrollo
microbiano
pH

El pH el logaritmo negativo de la concentración de protones o iones hidrógeno.

Recuperado de:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U4a_CrecimientoMicrobiano_19836.pdf
Parámetros relacionados con el
desarrollo microbiano
Oxígeno

Aerobios

Obligados: Necesario para el


crecimiento. Respiración aerobia.
Micrococcus luteus y Pseudomonas
aeruginosa.

Facultativos: Crecen mejor en presencia


de oxígeno. Respiración aerobia,
anaerobia y fermentación.
Enterobacter sp. y Saccharomyces
cerevisiae.
Recuperado de:
Microaerófilos: Requieren baja http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U4a_Crecimie
ntoMicrobiano_19836.pdf
concentración de O2. Respiración
aerobia.
Parámetros relacionados con el desarrollo
microbiano

Anaerobios

Aerotolerantes: No requieren O2, pero


crecen en su presencia.
Fermentación.
Streptococcus pyogenes y
Clostridium sp.

Obligados: El O2 es letal, no contiene


enzimas destoxificantes.
Fermentación o respiración
anaerobia.
Recuperado de:
Metanobacterium formicicum http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/
U4a_CrecimientoMicrobiano_19836.pdf
Parámetros relacionados con el desarrollo
microbiano
Concentración de Solutos

Recuperado de: http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U4a_CrecimientoMicrobiano_19836.pdf


Parámetros relacionados con el desarrollo
microbiano
Actividad del Agua, Aw

El crecimiento de la mayoría de bacterias y hongos ocurre a Aw superiores


a 0,90.

Recuperado de: http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U4a_CrecimientoMicrobiano_19836.pdf


Fases Curva de Crecimiento

A (Fase Lag): Periodo de latencia o


adaptación: no hay aumento
significativo de la densidad celular.

B (Fase Log): Periodo de crecimiento


exponencial, el crecimiento es
sincrónico y se alcanza la máxima
velocidad
de crecimiento.

C (Fase pre-estacionaria): Periodo de


retardo desaparece el crecimiento
Recuperado de: exponencial, los microorganismos
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U4a_Crecimiento entran en estrés.
Microbiano_19836.pdf
Fases Curva de Crecimiento

D (Fase estacionaria): Periodo


estacionario: no hay cambios
significativos de la densidad
celular con respecto al tiempo,
existe un equilibrio entre los
microorganismos vivos y muertos.

E (Fase de muerte): Fase en la


que el equilibro desaparece y
predominan los microorganismos
muertos. No hay nutrientes para el
recambio y las condiciones del
Recuperado de: medio de cultivo son adversas
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U4a_Crecimiento para el crecimiento.
Microbiano_19836.pdf
Labotatorio Curva de Crecimiento

Preparación del Inóculo

Se inocula Escherichia coli en un


matraz con medio líquido con una
concentración correspondiente al tubo
0.5 de la Escala de McFarland, (1.5 X
108 UFC/ml.

Estimar parámetros cinéticos: %T, A,


UFC/ml, tasa de crecimiento promedio,
(k) y tasa de crecimiento específica, (µ).
Recuperado de:
Longitud de onda, λ: 530 a 560 nm. http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U4b_Medicion
Crecimiento_19837.pdf
tr: 15 a 30min

Recuperado de: https://www.monografias.com/trabajos105/ciclo-celular-y-crecimiento-


poblaciones-microbianas/ciclo-celular-y-crecimiento-poblaciones-microbianas.shtml
Labotatorio Curva de Crecimiento

Transferir a tubos 10 ml del


inoculo preparado

Homogenizar

Inmediatamente realizar la
cuantificación indirecta y directa
correspondiente al tiempo cero,
t0.

Fuente. Autor, 2020


Labotatorio Curva de Crecimiento

Llevar a incubar a 37° C por el tiempo de


regeneración escogido por cada grupo.

Homogenizar

Tomar una muestra para realizar la cuantificación


indirecta y directa correspondiente al tiempo cero,
t1.

Repetir pasos: Incubar y lectura por 18 horas


Fuente. Autor, 2020
mínimo.
Labotatorio Curva de Crecimiento
Lectura
Recuperado de:
http://www.indemicsas.com/medios-de-
cultivo-preparados-2/plate-count-agar
Recuperado de:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/
U4b_MedicionCrecimiento_19837.pdf

Recuento Directo: Recuento Recuento Indirecto:


en Placa para cada tr Espectrofotometría para cada
A las 24 de Incubación tr
In Situ
Labotatorio Curva de Crecimiento
Lectura
Recuperado de: Determinar tasa de crecimiento promedio,
http://www.indemicsas.com/medios-de- (k),
cultivo-preparados-2/plate-count-agar

k= (log N – log N0)/ log 2 (t)

N0= Número de UFC al tr0


N= Número de UFC al trf (tiempo final)

Calcular tasa de crecimiento específica, (µ)

µ= In2(k)
Con los valores de Recuento
para cada tr Determinar el tiempo de generación de
Escherichia coli
td= In2/µ
Labotatorio Curva de Crecimiento
Lectura
1. Se registran los resultados de
cuantificación del crecimiento de
Escherichia coli en la tabla .

Tiempo de %T A UFC/ml
2. Graficar Curva de Crecimiento: muestreo
Eje X: tiempo (min)
Eje Y: %T, A, UFC/ml
0
3. Determinar tasa de crecimiento 1
promedio, (k),
2
4. Calcular tasa de crecimiento 3
específica, (µ)

5. Determinar el tiempo de generación


de Escherichia coli

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