Universidad Nacional de Luján

Departamento de Tecnología
Microbiología de los Alimentos

TABLA PARA LA DETERMINACION DEL NUMERO MAS PROBABLE (NMP) DE

MICROORGANISMOS

Fuente: FIL – IDF Standard 179 (1994)

1. SELECCIÓN DE DILUCIONES

Para cada muestra examinada seleccionar tres diluciones consecutivas de acuerdo a:

a. Si se realizaron sólo tres diluciones se deberán tomar estas tres diluciones para obtener el
índice.
b. Si se realizaron más de 3 diluciones, la selección de 3 diluciones dará combinaciones con distinto
rango de probabilidad. Esto puede ser expresado en categorías de acuerdo a lo explicado en la
tabla A2.
c. Seleccionar la combinación de 3 diluciones consecutivas con categoría 1 para obtener el índice.
Si se obtiene más de una combinación con categoría 1, usar aquella combinación con mayor
número de tubos positivos.
Si no se obtiene ninguna combinación con categoría 1, usar alguna con categoría 2. En caso de
tener más de una combinación con categoría 2, usar la de mayor cantidad de tubos positivos.
(ver ejemplos en tabla 1).
Cuando la decisión a ser tomada, a partir del resultado, es de gran importancia sólo la categoría
1, o la 1 y la 2, debería ser usada. Las categorías 3 y 0 pueden ser utilizadas asumiendo la baja
confiabilidad del resultado.

1. CÁLCULO

Determinar el número índice, para el recuento presuntivo, de acuerdo a los tubos positivos en las
diluciones seleccionadas (utilizar el criterio explicado en 1).
Obtener el recuento presuntivo multiplicando el número índice por la inversa de la dilución más
baja seleccionada (es decir la dilución que contiene la mayor cantidad de muestra). En
productos líquidos (leche, bebidas, agua, etc) cuando la menor dilución corresponde a 10 ml de
muestra, inoculada en tubos con doble concentración del caldo, para obtener el NMP dividir el
número índice obtenido por 10.

2. EXPRESIÓN DEL RESULTADO

Expresar el resultado como el número presuntivo de coliformes, coliformes fecales, E. Coli, etc. Por
gramo o mililitro de producto.

Si el NMP es menor de 0,3 coliformes por gramo o por mililitro, y si se utilizó el procedimiento
apropiado para un número bajo de coliformes, se expresa el resultado como “menos de 0,3
coliformes en 1 g o en 1 ml del producto” o “ausencia de coliformes en 1 g o en 1 ml del producto”.

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Tabla 1 - Ejemplos de la selección de resultados positivos para el cálculo de NMP

Número de tubos positivos obtenidos de tres tubos incubados para NMP

2)
las cantidades siguientes de muestra inoculada por tubo1)
Ejemplo
Productos líquidos 10 ml 1 ml 10-1 ml 10-2 ml 10-3 ml Productos Otros
-1 -2 -3 -4
líquidos productos
Otros productos 1g 10 g 10 g 10 g 10 g -1
(ml ) (g-1)
1 3 3 2 1 0 1,1 · 101 1,1 · 102
2 3 3 3 0 – 2,4 · 101 2,4 · 102
3 2 2 1 1 0 7,4 7,4 · 101
4 3 3 0 0 0 2,4 2,4 · 101
5 2 2 0 1 0 2,1 · 10-1 2,1

1- En negrita: combinación seleccionada 2- Calculado usando el NMP (Tabla A.1)

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Tabla A.1 - Indices NMP y límites de confianza

Límites de confianza
Número de (95%)1) 3)
Índice
resultados Categoría 2)
NMP 1)
positivos Menor Mayor

0 0 0 < 0,30 0,00 0,94

0 0 1 0,30 3 0,01 0,95
0 1 0 0,30 2 0,01 1,00
0 1 1 0,61 0 0,12 1,70
0 2 0 0,62 3 0,12 1,70
0 3 0 0,94 0 0,35 3,50
1 0 0 0,36 1 0,02 1,70
1 0 1 0,72 2 0,12 1,70
1 0 2 1,1 0 0,4 3,5
1 1 0 0,74 1 0,13 2,00
1 1 1 1,1 3 0,4 3,5
1 2 0 1,1 2 0,4 3,5
1 2 1 1,5 3 0,5 3,8
1 3 0 1,6 3 0,5 3,8
2 0 0 0,92 1 0,15 3,50
2 0 1 1,4 2 0,4 3,5
2 0 2 2,0 0 0,5 3,8
2 1 0 1,5 1 0,4 3,8
2 1 1 2,0 2 0,5 3,8
2 1 2 2,7 0 0,9 9,4
2 2 0 2,1 1 0,5 4,0
2 2 1 2,8 3 0,9 9,4
2 2 2 3,5 0 0,9 9,4
2 3 0 2,9 3 0,9 9,4
2 3 1 3,6 0 0,9 9,4
3 0 0 2,3 1 0,5 9,4
3 0 1 3,8 1 0,9 10,4
3 0 2 6,4 3 1,6 18,1
3 1 0 4,3 1 0,9 18,1
3 1 1 7,5 1 1,7 19,9
3 1 2 12 3 3 36
3 1 3 16 0 3 38
3 2 0 9,3 1 1,8 36,0
3 2 1 15 1 3 38
3 2 2 21 2 3 40
3 2 3 29 3 9 99
3 3 0 24 1 4 99
3 3 1 46 1 9 198
3 3 2 110 1 20 400
3 3 3 > 110

1) De Man, J. C. Eur. J. Appl. Biotechnol. 17:301-305 (1983).

2) Ver tabla A.2.
3) Los límites de confianza dados en esta tabla se mencionan solamente para brindar
alguna idea de la influencia de las variaciones estadísticas en los resultados. Podrán
haber, siempre, otras causas de variación que pueden ser, algunas veces, más
importantes.

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Tabla A.2 - Explicación de categorías para los resultados

Categoría 1) Definición

Cuando el número de bacterias en la muestra es igual al

NMP encontrado, el resultado es aquél que tiene la
probabilidad mayor de ser obtenido. Hay solamente, 5 %
1
como máximo, de probabilidad de obtener un resultado
que es menos probable que el menos probable en esta
categoría.

Cuando el número de bacterias en la muestra es igual al

NMP encontrado, el resultado es aquél que tiene menos
probabilidad de ser obtenido, que ni siquiera el menos
2 probable en la categoría 1, pero hay, solamente, 1 %,
como máximo, de probabilidad para obtener un resultado
que es menos probable que el menos probable en esta
categoría

Cuando el número de bacterias en la muestra es igual al

NMP encontrado, el resultado es aquél que tiene menos
probabilidad de ser obtenido, que ni siquiera el menos
3 probable en la categoría 2, pero hay, solamente, 0,1 %,
como máximo, de probabilidad para obtener un resultado
que es menos probable que el menos probable en esta
categoría

Cuando el número de bacterias en la muestra es igual al

NMP encontrado, el resultado es aquél que tiene menos
probabilidad de ser obtenido, que ni siquiera el menos
0
probable en la categoría 3. Hay, solamente, una
probabilidad de 0,1 % para obtener un resultado en esta
categoría, sin que nada sea erróneo.

1)
Antes de comenzar el ensayo, se debe decidir qué categoría será la
aceptable, por ejemplo, solamente la 1; 1 y 2 ó inclusive 1,2 y 3. Cuando se
haya tomado la decisión (sobre la base del resultado) es de gran
importancia, que solamente sean aceptados los resultados de la categoría
1 ó como máximo 1 y 2.

Los resultados de la categoría 0 se deben tomar en cuenta con un alto

grado de desconfianza.

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