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    Reporte Transaminacion

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    Axel jair Garcia sanchez
    Este documento presenta los objetivos, materiales, métodos y resultados de un experimento de laboratorio sobre la reacción de transaminación y su detección mediante cromatografía de papel. El resumen incluye: 1) Cuantificar la actividad de la transaminasa en un extracto de hígado y calcular la actividad enzimática. 2) Llevar a cabo una reacción de transaminación entre alanina y ácido alfa-cetoglutárico catalizada por la enzima transaminasa. 3) Detectar los productos de la reacción,

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    Reporte Transaminacion

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    Axel jair Garcia sanchez
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    Este documento presenta los objetivos, materiales, métodos y resultados de un experimento de laboratorio sobre la reacción de transaminación y su detección mediante cromatografía de papel. El resumen incluye: 1) Cuantificar la actividad de la transaminasa en un extracto de hígado y calcular la actividad enzimática. 2) Llevar a cabo una reacción de transaminación entre alanina y ácido alfa-cetoglutárico catalizada por la enzima transaminasa. 3) Detectar los productos de la reacción,

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    reporte transaminacion

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    Este documento presenta los objetivos, materiales, métodos y resultados de un experimento de laboratorio sobre la reacción de transaminación y su detección mediante cromatografía de papel. El resumen incluye: 1) Cuantificar la actividad de la transaminasa en un extracto de hígado y calcular la actividad enzimática. 2) Llevar a cabo una reacción de transaminación entre alanina y ácido alfa-cetoglutárico catalizada por la enzima transaminasa. 3) Detectar los productos de la reacción,

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    Reporte Transaminacion

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    Axel jair Garcia sanchez
    Este documento presenta los objetivos, materiales, métodos y resultados de un experimento de laboratorio sobre la reacción de transaminación y su detección mediante cromatografía de papel. El resumen incluye: 1) Cuantificar la actividad de la transaminasa en un extracto de hígado y calcular la actividad enzimática. 2) Llevar a cabo una reacción de transaminación entre alanina y ácido alfa-cetoglutárico catalizada por la enzima transaminasa. 3) Detectar los productos de la reacción,

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    Instituto Politécnico Nacional

    Escuela Nacional De Ciencias Biológicas


    Laboratorio De Bioquímica
    PRÁCTICA REACCIÓN DE TRANSAMINACIÓN Y SU
    REACONOCIMIENTO POR MEDIO CROMATOGRÁFIA
    EN PAPEL
    Axel Jair García Sánchez
    Ariel Emanuel Flores Escoto
    3IM1 Sección II

    Objetivos

    • Cuantificar la actividad de la transaminasa


    presente en un extracto crudo de hígado. Reactivo Función
    • Calcular la actividad de la enzima en
    unidades de transaminasa. Regulador de Provee el pH a la
    fosfatos solución porque esta
    ocurre en un medio
    alcalino
    Tablas
    Alanina Es el donador del
    grupo alfa amino

    Ácido alfa - Es el receptor del


    Tubo Frente del Frente de Rf cetoglutarato grupo alfa amino
    solvente muestra
    Alcohol Detiene la reacción
    1 42.5 18 0.4235 porque cambia la
    constante dieléctrica
    2 42.7 17 0.3981
    Ninhidrina Hace aparecer las
    3 42.3 17.5 0.4137 manchas en la
    cromatografía
    4 42.2 17.2 0.4075

    5 41.9 17.2 0.4105


    Micromoles acido glutámico
    Alanina 39 25.2 0.6461

    Testigo 39.8 25.3 0.6356

    Problema 40.9 18.7 0.4572


    Concentración acido glutámico problema y
    testigo

    Curva tipo
    Discusiones
    Cálculos para obtener los valores en el
    testigo y el problema Se llevo a cabo una reacción de transaminación
    donde se comprobó la reacción de la alanina α-
    glutarato bajo la acción de la enzima alanina
    a transaminasa, de esta forma de obteniendo
    0.14 como productor glutámico y piruvato.
    0.12 y = 0.2197x + 0.0021
    R² = 0.9882
    0.1 Para comprobar la presencia de estos se realizo
    0.08 la cromatografía en la cual pudimos comprobar
    0.06
    Para revelar el cromatograma se utilizó como
    0.04
    0.02
    revelador el solvente ninhidrina en etanol, el
    0 cual arrojo unas manchas de color morado y asi
    0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 pudimos observar la presencia de glutámico
    debido a que el corrimiento se encontraba a la
    misma altura y en el caso del problema
    podemos observar la separación de la alanina
    debido a la altura del corrimiento de las
    manchas que se comparan con las del
    glutámico en diferentes concentraciones; en el
    caso del testigo se observó una mancha de
    glutámico muy débil o tenue esto se debe a su
    baja concentración que se le aplico.

    Con la elaboración de la curva tipo, con este


    podemos llevar a cabo el cálculo de la actividad de
    la enzima transaminasa en UAT para corroborar que
    nuestra reacción se llevó a cabo correctamente.
    También pudimos observar que la concentración de
    glutámico presente en el problema es casi menor a
    la del tubo que contiene 25 µL de glutámico,
    mientras que el tubo testigo contiene la misma
    cantidad en µmoles de glutámico que el tubo con 10
    µL de glutámico.

    Conclusiones
    • Estas reacciones requieren la coenzima
    piridoxal-s´ fosfato que procede de la
    piridoxina.
    • El mecanismo de la reacción consiste en
    que el primer sustrato debe abandonar el
    sitio activo antes de que el segundo pueda
    entrar.
    • El glutamato toma la función del donador
    del grupo amino
    • Los grupo alfa amino se transfieres a un
    alfaaminoacido lo cual es la base de todo lo
    que sucede en la practica

    Bibliografía

    • E. Conn Eric, “Bioquímica fundamental”


    Universidad de California, Editorial
    Limusa, 2001, México D.F.
    • Mathews C. 1992. Bioquímica, 2da edición,
    Ed. McGraw-Hill

    • Nelson D.L., Cox M.M., “Lehninger.


    Principios de Bioquímica” 3a. Ed.
    Omega

    • Donald Voet, Judith g. Voet


    fundamentos de Bioquimica, ed. medica
    panamericana

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