Informe II
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UNMSM FARMACIA Y BIOQUÍMICA – GRUPO VOLÁTIL – EXTRACCIÓN DE LÍPIDOS CEREBRALES
Bioquímica II
EXTRACCIÓN DE LÍPIDOS CEREBRALES
I. MODELO EXPERIMENTAL
Pregunta/propósito
Proporcionar un modelo experimental para la extracción e identificación de lípidos cerebrales
Hipótesis experimental
Hay presencia de esteroles (colesterol)
Análisis
Una característica de los lípidos es su insolubilidad en agua, por ello, en algunos casos para su
extracción se utilizan compuestos orgánicos como alcohol, acetona, etc.
Reporte - Conceptos científicos
Los lípidos son un grupo heterogéneo de compuestos de moléculas hidrófobas que pueden
originarse completamente o en parte a través de condensaciones de tioésteres o unidades de
isopreno. Son aportadores de energía, estructuradores de la membrana celular protectores de
órganos, mediadores hormonales. En las membranas neurales participan en el mantenimiento,
estabilidad y en la estructura de la vaina de mielina, entre otros. (1)
El cerebro: es un tejido rico en colesterol, fosfolípidos y glucolípidos.
a. El colesterol está ampliamente distribuido en todas las células del organismo, pero especialmente
en las del tejido nervioso. Es el constituyente de mayor importancia en las membranas celulares y
de las lipoproteínas plasmáticas. Existen en las grasas animales, pero no es las vegetales.
Aproximadamente la mitad del colesterol del organismo se origina de su síntesis y el resto es
proporcionado por una alimentación promedio.
b. Los fosfolípidos son lípidos complejos, que contienen ácidos grasos y un alcohol, un residuo de
ácido fosfórico, con frecuencia tiene bases nitrogenadas y otros sustituyentes.
• Glicerofosfolípidos: el alcohol es el glicerol
lecitinas: uno de los grupos oh del fosfato lleva unido el amino alcohol colina.
• Esfingofosfolípidos: el alcohol es la esfingosina. Los fosfolípidos son los principales constituyentes
lipídicos de las membranas.
c. Los glucolípidos, son lípidos complejos, que contienen un ácido graso, esfingosina y carbohidratos.
Los glucolípidos están distribuidos ampliamente en todo el tejido del cuerpo, en particular en el
tejido nervioso (como el cerebro). En especial se encuentran en la capa externa de la membrana
plasmática donde forman parte de los carbohidratos de la superficie celular. (2)
Solubilidad de los lípidos en solventes orgánicos permite la obtención de fracciones que contienen
esteroles, glicerofosfolípidos y esfingolípidos.
• Los esteroles son solubles en acetona, al contrario de lo que sucede con otros lípidos complejos.
• Algunos glicerofosfolípidos, como las lecitinas, la fosfatidiletanolamina y la fosfatidilserina, son
solubles el éter e insolubles en acetona.
• Los glucósidos de esfingosina se disuelven en alcohol caliente y son insolubles en acetona y éter.
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Bioquímica II
Reporte – Diagramas/Dibujos
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Procedimiento
EXTRACCIÓN DE LÍPIDOS CEREBRALES (4)
1. Triturar aproximadamente 5 g de cerebro de pollo en un mortero con pilón, posteriormente
pesar aprox. 2.5 g y colocarlo en un beaker
2. Colocar en un tubo de ensayo y añadir Acetona (1 mL por cada 0.5 g de cerebro), homogenizar
con una bagueta y filtrar con ayuda de una gasa o papel filtro.
3. Decantar en SN en el tubo de Fracción I, esto contiene principalmente colesterol, pero también
tiene menor cantidad de grasas neutras
4. Adicionar 3 mL de éter al residuo, agitar cuidadosamente y filtrar, posteriormente decantar el SN
al tubo de Fracción II, esta Fracción II contiene fosfolípidos
5. Adicionar 3 mL de etanol, calentar cuidadosamente aproximadamente hasta 70 °C y luego
homogeneizar con una bagueta, filtrar y luego colocar SN al tubo de Fracción III. La Fracción II
contiene principalmente glucolípidos
IDENTIFICACIÓN
1. En el envase de vidrio agregar la Fracción I, añadir 20 mL de solución de sosa cáustica y 20 mL de
alcohol 96°.
2. Calentar, en baño María durante 30 min aproximadamente con agitación suave y constante.
3. Posteriormente, retirar el envase de vidrio y añadir 150 mL de solución saturada de agua y sal.
4. Agitar vigorosamente y sumergir el envase en un baño con hielo. Separar el jabón formado de la
solución mediante filtración y lavarlo 3 veces con porciones de agua fría. Por último, retirar el
jabón con una espátula y colocarlo en un recipiente.
II. CUESTIONARIO
1- Detalle la interpretación química de las reacciones de reconocimiento de los distintos tipos de
lípidos vistos en práctica.
Reconocimiento del colesterol
-Test de Lieberman – Burchard: Esta reacción consiste en realizarse en un medio ácido fuerte
(ácido sulfúrico, ácido acético y anhidrido acético. El colesterol sufre una oxidación gradual y
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forma una molécula de colestapolieno que posee un doble enlace adicional al colesterol; la
primera etapa consiste en la protonación del grupo hidroxilo del colesterol, desprendiendo
agua y obteniendo el ion carbonio 3,5-colestadieno (reacción de color). La oxidación
secuencial de este ion carbonio alìtico por el SO2- genera un ácido colesta-hexano-sulfónico
cromóforo. (5)
Reconocimiento de cerebrósidos
-Reacción de Molisch: es una prueba de carácter cualitativo para cualquier carbohidrato,
donde se deshidrata (las pentosas turtural o hexosas a hidroximetilfurfural) e hidroliza (el
enlace glucosídico) por medio de ácido sulfúrico los grupos funcionales, apareciendo un anillo
morado debido a que en la preparación el ácido es un catalizador para la hidrolisis de los
enlaces glucosídicos presentes en los carbohidratos, donde los polisacáridos y disacáridos los
reduce a monosacáridos. (6)
Reconocimiento de fosfolípidos
-Prueba de fósforo: Esta prueba consiste en que el fosfato inorgánico en medio ácido al
reaccionar con el molibdato va a dar fosfomolibdato (coloración amarilla); luego al agregar
ácido ascórbico, será reducido a azul de molibdeno (coloración azul verdoso). (7)
2- Escribir las estructuras químicas del colesterol y de los fosfolípidos señalando en cada caso las
diferencias en la solubilidad en los solventes orgánicos.
Esteroles
Colesterol: Son insolubles en agua, pero solubles en éter, cloroformo y acetona. (8)
Fosfolípidos:
- Son anfipáticos, es decir, son hidrofílicos e hidrofóbicos a la vez. Solubles en éter, cloroformo
y etanol e insolubles en acetona. (3)
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Glicerofosfolìpidos
Lecitina: Insoluble en agua. Soluble en disolventes orgánicos, como el éter, benceno o alcanos
de bajo peso molecular. (5)
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