Cromatografía en Fase Gaseosa
Cromatografía en Fase Gaseosa
Cromatografía en Fase Gaseosa
GASES
CURSO TEORICO-
PRACTICO
CAPACITAR A LOS
PARTICIPANTES EN LA
TECNICA
INSTRUMENTAL
“CROMATOGRAFIA DE
GAS”, ACTUALIZAR
CONOCIMIENTOS SOBRE
LA TECNICA Y
PROPORCIONAL IDEA
GENERAL DE SU
APLICACIÓN.
AUTOR
RITA I. BOADA T.
08/07/2008
08 Y 09/07/2008
CONTENIDO
PARTE I TEORIA.....................................................................................................1
DEFINICION........................................................................................................3
INSTRUMENTACION
_ Gas Portador
Columnas de separación
Detectores
_ Integrador
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IMPORTANCIA Y APLICACIONES DE LAS TECNICAS
CROMATOGRAFICAS
PARTE II PRACTICA
VISITA AL LABORATORIO
Cromatografos en línea.
CONCLUSIONES
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INTRODUCCION A LA CROMATOGRAFIA DE GAS
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térmica de la sustancia, la resistencia de los materiales a la corrosión,
temperatura, etc.
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c.3..- Un Gas Portador o Eluyente: que actué como fase móvil y se desplace a
lo largo de la columna desde el puerto de inyección (inicio de la columna) hasta el
detector( final de la columna). para transportar la muestra en estudio y permitir la
separación de sus componentes.
A principios del siglo XX, en 1906, El Botánico Ruso Mikhail Tswett, (1872-
1913), presento la utilización de columnas empacadas para separar extractos
de vegetales coloreados.
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El trabajo de Tswett, consistió en el uso de una columna de vidrio empacada o
rellena de Carbonato de Calcio; finamente dividido para mayor porosidad; el
cual interaccionaba de manera diferentes con los compuestos de la mezcla de
pigmentos vegetales(clorofilas), de manera tal, que estos se separaban en
distintas bandas a lo largo de la columna. A este procedimiento se le llamo “
Cromatografía de Tintas”.
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de conductividad térmica. En 1955, hicieron su aparición comercial los primeros
cromatografos de gas.
DEFINICION
Las técnicas cromatografías son muy variadas, pero en todas ellas hay una fase
móvil que consiste en un fluido (gas , liquido o fluido supercritico) que arrastra a la
muestra a través de una fase estacionaria que se trata de un solido o un liquido
fijado en un solido.
1.-La adsorción, que es la retención de una especie química por parte de los
puntos activos de la superficie de un sólido quedando delimitado el fenómeno a la
superficie que separa las fases o superficie interfacial.
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2.- La absorción, que es la retención de una especie química por parte de una
masa, y debido a la tendencia que esta tiene a formar mezcla con la primera,
absorción pura, o a reaccionar químicamente con la misma, absorción con
reacción química, considerando ambas como un fenómeno másico y no
superficial.
a.- Acorde A La Fase Móvil: Puede Ser Gaseosa, Líquida Ó Fluido Supercrítico .
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Fig. 2 Ejemplo de cromatografía liquida de alta Resolución.
Cromatografía plana
Cromatografía en capa fina
Cromatografía en papel
Cromatografía en columna
Técnica Fase móvil Fase estacionaria
Cromatografía de gases Gas Sólido o líquido
Cromatografía líquida Sólido o líquido
Líquido (polar)
en fase inversa (menos polar)
Cromatografía líquida Líquido Sólido o líquido
en fase normal (menos polar) (polar)
Cromatografía líquida
Líquido (polar) Sólido
de intercambio iónico
Cromatografía líquida
Líquido Sólido
de exclusión
10 Cromatografía líquida
Líquido Sólido
de adsorción
Cromatografía de
Líquido Sólido
fluidos supercríticos
Fig.1 . Una Muestra de una Cromatografia en papel
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(Adsorción) Líquido
Columna Líquida
C.L / H.P.L.C
Capa Fina
En Papel y/o
Capa Fina
T.L.C
Análisis frontal.
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Desarrollo por elución
La fase móvil es adsorbida débilmente por la fase sólida estacionaria. Este ideal
teórico de desarrollo por elución no siempre se consigue en la práctica. Es un
método analítico esencial.
Análisis frontal
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a.- Teorías Del Proceso Cromatográfico
Hasta la fecha se han propuesto muchas teorías, que incluyen complejos modelos
matemáticos para poder explicar el comportamiento de los solutos en las
columnas cromatográficas. Las más estudiadas son: La Teoría de los Platos
Teóricos (Martin y Synge), la Teoría Cinética (Van Deemter, Zuiderweg,
Klinkenberg y Sjenitzer) y la Teoría Desarrollada (Golay) para Columnas
Capilares.
Según la Teoría de los Platos, una columna cromatográfica está constituída por
una serie de platos que contiene una fase estacionaria. Supone que el volúmen de
fase estacionaria en cada plato es constante; que el volúmen de fase móvil es
constante de plato a plato; que en cada plato las dos fases están en equilibrio, y
que el valor del Coeficiente de Distribución es constante e independiente de la
concentración del soluto.
N = 16(tr/w)2
HETP ó H = A + B/u + Cu
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Las dos teorías coinciden en que la cromatografía es un sistema de separación
dinámica, porque contínuamente se producen equilibrios entre los componentes
de la mezcla a separar y las fases móvil y estacionaria.
Linea de Base
Pico de Aire
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Base del Pico
Área del Pico
Altura del Pico
Ancho del Pico
Ancho del Pico a la mitad de la Altura
Es la parte del registro que corresponde a la fase móvil pura (gas portador, ...).
o Insuficiente Resolución
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5.- Ancho del pico en la semialtura (ah/2).
Es la distancia paralela a la línea de base, entre las dos laderas del pico, tomada a
la mitad de la altura del pico.
Métodos Geométricos
Triangulación: En esta técnica se trazan líneas
tangentes a cada lado del pico. La altura se mide desde
la línea base hasta la intersección de las dos
tangentes. El ancho se mide tomando la intersección
de las dos líneas tangentes con la línea base. Luego se
utiliza la fórmula A=1/2*Altura del Pico* Base del Pico.
Las limitaciones de esta técnica estan en el trazado de
las líneas tangentes, un pequeño error al trazar las
tangentes puede afectar la medida de la altura.
Altura por ancho a la mitad de la Altura:
Métodos Mecánicos
Planimétricos
Corte y Pesada: Esta técnica requiere recortar el pico
del cromatograma, luego pesarlo en una balanza
analítica. El recorte y pesada depende mucho de la
habilidad del operador. Pueden introducirse errores por
cambios en la humedad del papel, la grasa de las
manos del operador, homogeneidad del papel.
Generalmente se recomienda utilizar una fotocopia del
cromatograma para no destruir el original.
o Integración Automática
Electromecánica
Electrónica
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c.-Principales parámetros cromatográficos.
t'i = ti - t0
VR = tR-Fm
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donde d es el diámetro interior del soporte utilizado y ε es la porosidad de la fase
estacionaria, que suele tener un valor de 0,4 para empaquetamientos sólidos.
Vm = tm ⋅ Fm
V'R = VR - Vm
o lo que es lo mismo:
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9.- Velocidad lineal media a lo largo de una columna (u).
donde α es el factor de selectividad, tRy y tRx son los tiempos de retención de los
componentes x e y , y Kx y Ky son los coeficientes de distribución de los
componentes. Dependiendo del valor de α se tiene una idea aproximada de como
será la separación cromatográfica:
α > 2 se obtiene una mala separación ya que son necesarios periodos muy largos
para realizarla.
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11.- Factor de capacidad (K').
12.- Eficiencia
Para definir la eficacia se utiliza el concepto de piso teórico, y se define éste como
la sección teórico-transversal en la cual se realiza el equilibrio de partición durante
el flujo de fase móvil. Cuanto mayor se el número de platos teórico ( N) mayor será
la eficiencia de la columna.
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Si H tiene un valor pequeño, la distancia entre platos es menor y por tanto la
eficiencia será mayor. Por el contrario, si H es grande la columna es poco eficiente
para separar ese componente ya que sus moléculas estarán muy difundidas.
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d.- Procedimientos Para La Interpretación De Cromatogramas
Identificación Cromatográfica
o
Identificación No Cromatográfica
o
o Análisis Clásicos
o Identificación por:
Adición de Estándar
Formación de Derivados
Sustracción de un Componente
o Identificación por Técnicas Auxiliares: UV, IR, MS, RMN
b.-Análisis Cuantitativo
Normalización de Área
Normalización de Área con Factores de Respuesta
Estandarización Externa
Estandarización Interna
INSTRUMENTACION
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Elementos que intervienen en la técnica análisis cromatografico de gas:
.- gas portador
.- Cromatografo de gas
.- integrador
Debe ser inerte para evitar interacciones (tanto con la muestra como con la
fase estacionaria)
Debe ser capaz de minimizar la difusión gaseosa
Fácilmente disponible y puro
Económico
Adecuado al detector a utilizar
Los gases portadores, mas comúnmente usados son Nitrógeno, y Helio
pues reúnen las mejores condiciones de estabilidad e inercia Química.
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b.1.-Columna
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Empacadas
o Analítica
o Preparativas
Capilares
o W.C.O.T. (Wall Coated Open Tubular)
Longitud de la Columna
Diámetro de la Columna (1/4", 1/8", 1/16" de diámetro externo)
Tamaño de las partículas del relleno
Naturaleza de las fases
Cantidad de fase estacionaria
Temperatura de la columna
Velocidad del gas portador
Cantidad de muestra inyectada
Material del cual está elaborada la columna.
Enrollado de la columna
En la Cromatografia Gas Solido, la fase estacionaria es un solido, que
simplemente esta rellenando la columna . El solido de relleno es activo,
con propiedades adsorbente y con una superficie normalmente uniforme.
Se utilizan para estos fines: Tamices Moleculares, Carbón Activo, Alúmina,
etc.
Los soportes para las columnas deben cumplir la funcion básica, "mantener"
(sostener, retener) la fase estacionaria. Idealmente debería ser un material inerte
que "mantiene" la fase estacionaria sobre su superficie como una película
delgada.
La mayoría de los soportes cromatográficos están hechos de diatomita.
Químicamente es casi todo sílice, con algunas impurezas. También se conoce
como Tierras Diatomáceas ó Kiselguhr (palabra alemana). Domina el campo de
los soportes debido a su estructura, superficie y disponibilidad.
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La Estructura, ó Características Físicas (contribuye a la eficiencia de la
columna cromatográfica):
o Tamaño de partícula
o Densidad
o Área Superficial
la naturaleza de la muestra
la naturaleza de la Fase Líquida
o el uso que se le va a dar a la columna
General o Específico
El Precio
Podemos resumir que un buen soporte debe reunir las siguientes características:
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Constante de Rohrchneider
Constante de McReynolds
Existen muchas discusiones sobre este tema para poder definir y describir el
parámetro polaridad en cromatografía, podemos decir que la polaridad de una fase
estacionaria líquida se refiere a las interacciones intermoleculares que involucra
dipolos permanentes.
Selectividad es definida como las diferentes atracciones intermoleculares
Varias cualidades ha de reunir un líquido para servir como fase estacionaria:
Viscosidad
Tensión Superficial
Tensión de Vapor
Selectividad respecto a los componentes de la fase móvil
Reversibilidad del Reparto
Estabilidad Térmica
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b.2.- Sistema de Detección de gases (Detector)
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Detector de Fotometría a la Llama. (PFD) Basada en la medida de la
intensidad de la emisión molecular de la fluorescencia de heteroátomos en
las moléculas orgánicas. empleado en compuestos como pesticidas e
hidrocarburos que contengan fósforo o azufre.
Detector de emisión atómica (AED, Atomic Emission Detector)
Detector termoiónico (TID, ThermoIonic Detector)
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Inyector de muestra para un GC
Según las curvas de Van Demter (HEPT vs. Velocidad Lineal), el mejor gas a usar
en la columna cromatográfica como portador de la muestra es el hidrógeno, sin
embargo dada su peligrosidad, es más usado como gas de encendido en el
detector FID, junto con el aire.
b.4.- Hornos
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C.- INTEGRADOR O REGISTRADOR GRAFICO
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IMPORTANCIA Y APLICACIONES DE LAS TECNICAS CROMATOGRAFI
CAS.
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Dado que cada dia se avanza en el desarrollo de nuevas tecnologías y
sofistificacion de las existentes, el futuro y aplicación de las técnicas
cromatografías pareciera infinito. Actualmente, el acople o aplicación
simultanea con otras técnicas de análisis tales como la espectroscopia de
masas(MS), Infrarrojo(IR), resonancia magnética nuclear (RMN), etc.
Contribuyen de una manera mas eficiente al desarrollo de la ciencia, la medicina,
así como también a la implantación y manejo de procesos industriales
complejos.
La SFC se aplica a una gran variedad de compuestos, entre los que podemos citar
drogas, alimentos, herbicidas, tensioactivos, polímeros, explosivos, polímeros y
aditivos para éstos, impelentes, explosivos o combustibles fósiles.
Los cromatografos en línea como todo equipo, debe ser debidamente mantenidos,
así como dar cumplimiento a los programas de calibración establecidos. El cual,
debe realizarse con patrones o standares de composición conocida. También
deben cumplir con un adecuado programa de validación con el Laboratorio de
Control de Calidad, a fin de comprobar la veracidad de los resultados emitidos.
El cumplimiento de todos estos programa le permitirá al Operador la
confiabilidad en los equipos y garantizar la calidad del proceso.
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tiempo. En la cromatografía plana, "cromatógrama" puede referirse al papel o capa
con las zonas separadas.
Fase Ligada. Una fase estacionaria que está unida de forma covalente a las
partículas de soporte o a la pared interior de la columna.
Fase Inmovilizada. Una fase estacionaria que está inmovilizada sobre las
partículas del soporte o sobre la pared interior de la columna, por ejemplo por
polimerización in situ (entrecruzamiento químico) tras un recubrimiento.
Fase Móvil. Fluido que se filtra a través o a lo largo del lecho estacionario, en una
dirección definida. Puede ser un líquido (Cromatografía Líquida), un gas
(Cromatografía de Gases) o un fluido supercrítico (Cromatografía con Fluido
Supercrítico). En la cromatografía de gases se puede usar la expresión Gas
Portador para la fase móvil. En la cromatografía de elución se usa también para la
fase móvil la expresión Eluyente.
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