CURVA DE TITULACION DE AMINOACIDOS Y SEPARACIÓN DE

CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA.

CURVE OF TITULATION OF AMINOACIDOS AND SEPARATION OF CHROMATOGRAPHY
IN FINE COAT.
Angélica Lozano (06142134), Betsy Amaya (06142164), Johanna Cuberos (06131055)
Corporación Tecnológica de Bogotá, Tecnología de Regencia en Farmacia

RESUMEN

La Glicina es el aminoácido más pequeño y el único no quiral de los 20 aminoácidos

presentes en la célula. En el desarrollo de la práctica se realizó una curva de titulación
utilizando como aminoácido la Glicina y titulando con una base fuerte (NaOH), leyendo
el pH constantemente, para poder identificar las zonas buffer que están entre el pH 2,4
y 9,8 respectivamente y el valor del PI de la Glicina el cual es 6,095 muy cercano
comparado con el reportado en la bibliografía.
Para realizar la separación en Cromatografía en capa fina, se preparó una fase móvil
con (Butanol, Ácido Acético: agua). Utilizando un capilar se sembraron 6 aminoácidos
sobre la placa de sílica. El conocimiento de las propiedades ácido-base de los
aminoácidos fue importante para comprender las propiedades físicas y biológicas de las
proteínas. Además, las tecnologías de separación, identificación y cuantificación de los
diferentes aminoácidos se basan en estas propiedades.

ABSTRACT
Glycine is the smallest amino acid and chiral not only the 20 amino acids present in the
cell. In practice developing a titration curve using as amino acid Glycine and titrating
with a strong base (NaOH), the pH constantly reading, to identify the buffer areas that
are between pH 2.4 and 9.8 was conducted respectively and the value of IP Glycine
which is very close 6,095 compared with that reported in the literature.
To perform the separation thin layer chromatography, with a mobile phase (: water
Butanol, Acetic Acid) was prepared. Using a capillary 6 amino acids on the silica plate
were seeded. Knowledge of the acid-base properties of amino acids was important to
understand the physical and biological properties of proteins. In addition, technologies of
separation, identification and quantification of the different amino acids are based on
these properties.

Palabras claves: Cromatografía, aminoácidos, titulación, pH, carboxilo, equivalencia.

INTRODUCCIÓN

Un aminoácido puede existir en varias formas iónicas, dependiendo del pH del medio
en donde se encuentre disuelto. Esta propiedad se describe mejor utilizando la
ecuación de Henderson – Hasselbach. Los aminoácidos tienen al menos dos grupos
disociables, el amino y el carboxilo; pueden tener más si el grupo R tiene a su vez
grupos que se pueden ionizar. Para cada uno de estos grupos existe un pK, el del
carboxilo se le llamará PKa (COOH) y PKa (NH2) al del amino. (Martínez, J 2014).

La representación gráfica de la variación del pH de una solución por la adición de

equivalentes de ácido o de base se denomina curva de titulación. En el caso de los
aminoácidos, las curvas de titulación proporcionan la siguiente información:

● Medida del pKa de los grupos ionizables: se localizan en el punto medio de la

zona tampón.
● Regiones de capacidad tampón: mesetas donde se localizan los pKs; dichas
regiones se encuentran en el intervalo pK ± 1 unidad de pH.
● PI: se localiza en el intervalo de viraje.
● Formas ionizables del aminoácido en cada rango de pH.
● Carga eléctrica del aminoácido en cada rango del pH.
● Solubilidad relativa del aminoácido en cada rango de pH. (González 2014).

La técnica de separación de cromatografía de capa de fina consta de un sistema de dos

fases una sólida (fase estacionaria) que se aplica en forma de capa delgada,
absorbente, usualmente entre 0.10 a 0.25 mm de grueso para fines analíticos y en los
casos que se desee aislar un compuesto se desee aislar un compuesto el grosor puede
variar entre 0,5 mm - 2.00 mm. Esta capa es fijada a una placa o lámina firme de vidrio,
aluminio o plástico que actúa como soporte. A través de la fase estacionaria circula un
líquido o solvente (fase móvil o eluyente). De los tres materiales usados como soporte,
el vidrio es el más popular, aunque el plástico o aluminio son más flexibles sin provocar
disrupción de la fase estacionaria.

La fase estacionaria es un sólido fijo al soporte. El solvente debe ser inerte, poroso, e
insoluble en los solventes usados en la fase móvil. Existen diferentes materiales inertes
pero los más comunes son la Sílica gel y el óxido de aluminio. (Guarnizo, A 2009).
MATERIALES Y MÉTODOS

CURVA DE TITULACIÓN

Se preparó 100 mL de solución del aminoácido de la glicina 0.1 M, se calcula la masa,

por lo tanto se debe pesar para preparar esta solución:

0.1mol * 0.1 L = 0.01mol * 132 g = 1.32 g de glicina

L 1mol
Se tomó 25 mL de la solución anterior y se llevó a un Erlenmeyer donde se ajustó a un
pH de 1.5 utilizando HCL 3M el cual se confirma con el pHmetro, paso seguido se llena
la bureta con hidróxido de sodio (NaOH) 0.25 M previamente purgada, se inicia la
titulación, se adiciona 0,5 mL de NaOH a la solución de la glicina se agita y se lee el pH
esto se realizó hasta llegar a un pH 12 (Básico).

SEPARACIÓN DE CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA

En la placa de Sílica se deja una línea a 1 cm desde la base. Sobre esta línea se
siembran las muestras de aminoácidos y de análisis. Para los aminoácidos de
Aspartame se toman 50 mg y se disuelven uno previamente en 5 mL de HCL 3M y el
otro en 5 ml de agua, los siguiente aminoácidos se disolvieron 20 mg de cada uno en 5
mL de agua, Se deja que esta recorra hasta llegar al 1 cm de la parte superior de las
placas, este proceso se demoró casi 30 min. Se dejó secar por 5 minutos en estufa
luego se adiciona un agente de revelado (solución de ninhidrina 0,2 %), se seca
nuevamente.

RESULTADOS

RESULTADOS Y ANÁLISIS DE AMINOÁCIDOS POR CROMATOGRAFÍA EN CAPA

FINA

Se cogen dos placas de Sílica y cuidadosamente con lápiz se le traza una línea desde
la base a 1.5 cm, sobre esta misma línea trazamos cuatro puntos, los cuales serán la
guía para la siembra de la muestra de aminoácidos:
En una cámara cromatográfica se añaden 5 ml de fase móvil (Butanol, Ácido Acético:
agua), se tapa y se deja saturar la cámara por 15 min. Luego se añadió la Placa 1 y 2
con los respectivos A.A ya sembrados con un capilar en cada punto señalado. Se deja
que esta recorra hasta llegar al 1 cm de la parte superior de las placas, este proceso se
demoró casi 30 min.
Se retiran las placa y se secan completamente en la plancha, una vez secas las placas
se les añade el revelador (Ninhidrina 0.2%),
Terminado este proceso se lograron observar que las manchas reveladas tanto en la
Placa 1 (Fig.1) como en la Placa 2 (Fig.2), tuvieron diferentes recorridos y son de
diferente color.

PLACA N°1 PLACA N°2

Fig. 1 Fig.2

La figura muestra de forma esquemática un proceso cromatográfico en capa fina. La

altura máxima que alcanza el disolvente en la placa recibe el nombre de frente de
disolvente, y se utiliza como referencia para calcular las distancias relativas recorridas
por los componentes de la mezcla en el cronograma. ( BAUER, 1991)

Se denomina factor de retardo (Rf) a la relación existente entre la distancia recorrida

por un compuesto y la recorrida por el disolvente en el mismo tiempo:
CROMATOGRAFÍA CAPA FINA
La cromatografía por capa fina es un procedimiento analítico que permite la separación
de los diferentes componentes de una muestra problema por la distribución de las dos
fases, una estacionaria y la otra móvil; basándose en la preparación de una capa
uniforme de un absorbente que se mantiene sobre una placa (vidrio, aluminio, Sílica
gel). La fase móvil está constituida por un disolvente en el que los componentes de la
mezcla deben ser al menos parcialmente solubles; esta fase móvil suele estar formada
por una mezcla de un solvente orgánico con agua y algunas sustancias adicionales
tales como bases, alcoholes, agentes complejantes cuya finalidad es aumentar o
disminuir la solubilidad de algunos compuestos y/o muestras, en esta fase ocurre un
efecto de desplazamiento ejercido por los componentes de la mezcla, esta puede ser
líquida, gaseosa o un fluido supercrítico esta fase móvil se hace pasar a través de una
fase estacionaria gracias a la capilaridad o gravedad la cual consiste en un sólido, el
cual será un componente polar; donde el eluyente será menos polar que la fase
estacionaria para permitir que los componentes que se desplacen sean los menos
polares o apolares.
La cromatografía es para el estudio y caracterización de las distintas biomoleculas
como: azúcares, lípidos, proteínas, ácidos nucleicos, etc., para determinar este tipo de
moléculas dentro de la cromatografía por capa fina se estudian aspectos tales como la
solubilidad y la polaridad.
Para realizar una caracterización de aminoácidos se debe tener en cuenta que estos
compuestos cuya cadena lateral R mientras más apolar sea tendrán tendencia a
desplazarse junto con la fase móvil mientras que los aminoácidos que sea más polares
ya sean con carga o sin ella no migran debido a la fase estacionaria es por ello que la
fase móvil está compuesta por disolventes que son más apolares que el agua y esta a
su vez es la fase estacionaria, teniendo en cuenta los aspectos anteriores tenemos a
continuación:

PLACA A
En la placa A, se observa que fueron sembrados los siguientes aminoácidos:

Por lo tanto los aminoácidos que poseen cadenas laterales largas no polares como la
Glicina y la Fenilalanina tienden a migrar más que aquellas cadenas polares como el
Glutamato y la Lisina, este aspecto indica la mayor solubilidad de las moléculas polares
de la fase estacionaria hidrofílica y de las moléculas no polares en solventes orgánicos;
los aminoácidos que presentan estas diferentes solubilidades como la Glicina y
Fenilalanina se separaran entre la fase móvil líquida debido a la baja polaridad que está
poseen.
A medida que el eluyente pasa por el punto de sembrado de las muestras, las disuelve
y las arrastra a lo largo de la placa, distribuyéndose entre el disolvente que se desplaza
a la fase estacionaria dando como resultado la migración de aminoácidos apolares y
quedando en el sembrado los aminoácidos polares, luego que el eluyente pasa a las
dos terceras partes de la longitud de la placa esta se retira y se seca, luego de esto se
aplica Ninhidrina revelador utilizado para visualizar y detectar aminas primarias y
secundarias de los aminoácidos, con lo cual se identifican los aminoácidos al observar
una tinción de color morado o magenta.
La relación entre distancia recorrida por un aminoácido con la distancia que viaja del
solvente, al medir las placas desde el sitio marcado para la aplicación de la mezcla de
los aminoácidos se designa como valor Rf (Movilidad relativa con el solvente) de este
aminoácido, se debe tener en cuenta que este valor para los aminoácidos puede variar
de acuerdo con las condiciones experimentales como son el solvente, las
características de cada aminoácido (polar o apolar), afinidad del compuesto con el
disolvente; A continuación los Rf de cada aminoácido en cada placa:
Tabla N°4

· PLACA N°2
En la Placa B, se observa que fueron sembrados los siguientes aminoácidos:

Por lo tanto, los aminoácidos como la fenilalanina de la cual ya se habló anteriormente

donde se indica que es apolar, su ascenso es normal dentro de la cromatografía de
capa fina; dentro de los componentes apolares también se encuentra el Aspartame, el
cual es una combinación de ácido aspártico, fenilalanina y enlazado con un éster
metílico, esta molécula es la unión de dos aminoácidos polares, cuando se unen los
dos aminoácidos anteriores con el éster metílico las carga se anulan, por lo tanto la
molécula formada de aspartame queda totalmente apolar; otra característica es que el
aspartame en su estructura contiene fenilalanina que es hidrofóbica la cual no permite
los puentes de hidrógeno haciendo que la molécula sea poco soluble en agua y en HCl
(sustancias polares), para poder disolver el aspartame en estas sustancias se debe
calentar la solución para así mejorar su solubilidad, luego de haber realizado el
procedimiento anterior se seca la placa de Sílica gel y se le adiciona el revelador en
este caso Ninhidrina, la cual deja observar los aminoácidos anteriormente nombrados
donde nuevamente el más apolar es el que tiene una distancia de migración más alta
que los demás en este caso el aspartame con HCl, seguido de aspartame con agua,
fenilalanina y por último la Coca-Cola que su migración es muy mínima; una
característica sobresaliente del aspartame en HCl es que su coloración es amarilla y no
púrpura como las anteriores esto se debe a que la unión de estos dos aminoácidos
forman una proteína y esta tiene activado su grupo aromático lo que hace que
reacciones con la Ninhidrina, donde su pH es ácido y el Rf se encuentra calculado en la
tabla anteriormente mencionada, según lo anterior en el jugo de mora las moléculas
que lo conforman son polares por lo tanto esta sustancia no es arrastrada por la fase
móvil puesto que es totalmente polar y es retenida en el punto de siembra del
aminoácido.
A continuación se mostraran las estructuras con sus respectivas polaridades partiendo
de la más polar a menos polar mostrando así el porqué de su comportamiento dentro
del proceso de la Cromatografía:

POLARIDAD
NOMBRE Estructura (De la más polar a la menos polar)

GLUTAMATO POLAR

LISINA POLAR
 GLICINA APOLAR

FENILALANINA APOLAR

ASPARTAME APOLAR

REACCIÓN DE LA NINHIDRINA
CURVA DE TITULACIÓN DE AMINOÁCIDOS

1. LISINA
Ph mmol NaOH 2,10 4,50 8,91 9,00
1,52 0,25 2,12 4,75 9,13 9,25
1,54 0,50 2,20 5,00 9,28 9,50
1,53 0,75 2,24 5,25 9,43 9,75
1,55 1,00 2,30 5,55 9,60 10,00
1,50 1,25 2,38 5,75 9,73 10,25
1,65 1,50 2,45 6,00 9,88 10,50
1,66 1,75 2,53 6,25 10,01 10,75
1,72 2,00 2,61 6,50 10,16 11,00
1,74 2,25 2,70 6,75 10,33 11,25
1,77 2,50 2,85 7,00 10,47 11,50
1,83 2,75 2,95 7,25 10,61 11,75
1,83 3,00 3,09 7,50 10,74 12,00
1,87 3,25 3,32 7,75 10,88 12,25
1,90 3,50 3,54 8,00 11,03 12,50
1,93 3,75 4,14 8,25

2,00 4,00 8,07 8,50

2,04 4,25 8,67 8,75

pH VS concentracion NaOH
12.00
Punto Isoeléctrico 9.73; 10.25
10.00 pK3 10.50; 9.88
pK2 8.91; 9.00
8.00
PH

6.00

4.00

2.00 pK1 2.25; 1.74

0.00
0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00
MMOL NAOH

GRÁFICA LISINA

El aminoácido lisina posee tres grupos ionizables, el pK1 corresponde con el grupo a-carboxilo,
el pK2 al a-amino y el pK3 con el grupo amino presente en su cadena lateral (e-amino). En
valores de pH < pK1 ningún grupo estará disociado y por tanto la especie iónica será la especie
(a) y la carga neta del aminoácido sería igual a +2, por lo que se desplazaría al cátodo en un
campo eléctrico. Si se aumenta el valor del pH del medio, de manera que sea mayor que pK1 y
menor que pK2 (pK1 < pH < pK2), la especie iónica sería la (b), la carga eléctrica de +1 y
también se desplazaría hacia el cátodo, pero a menor velocidad que la especie anterior. Al
incrementar aún más el pH del medio hasta lograr que este sea mayor que el pK2, pero menor
que el pK3 (pK2 < pH < pK3), estarían disociados los grupos carboxilo y el a-amino especie (c),
esta presenta carga neta cero (-1 por el grupo carboxilo y +1 por el e-amino), sería el ion dipolar
y no se desplazaría en un campo eléctrico. Por último, al continuar aumentando el pH hasta que
sea mayor que el pK3, todos los grupos se disociarían, especie (d), esta con carga eléctrica
neta de -1 se comportaría como un anión y por tanto se desplazaría hacia el polo positivo o
ánodo.
TITULACIÓN DE GLUTAMATO

NaOH mL mmol pH 21,5 10,75 2,57

0,5 0,25 1,55 22 11,00 2,62

1 0,50 1,55 22,5 11,25 2,65

1,5 0,75 1,61 23 11,50 2,68

2 1,00 1,57 23,5 11,75 2,73

2,5 1,25 1,58 24 12,00 2,77

3 1,50 1,60 24,5 12,25 2,82

3,5 1,75 1,62 25 12,50 2,86
4 2,00 1,64 25,5 12,75 2,93
4,5 2,25 1,65 26 13,00 2,97
5 2,50 1,67 26,5 13,25 3,02
5,5 2,75 1,70 27 13,50 3,08
6 3,00 1,72 27,5 13,75 3,13
6,5 3,25 1,74 28 14,00 3,21
7 3,50 1,76 28,5 14,25 3,30
7,5 3,75 1,78
29 14,50 3,38
8 4,00 1,81
29,5 14,75 3,46
8,5 4,25 1,83
30 15,00 3,56
9 4,50 1,85
30,5 15,25 3,62
9,5 4,75 1,87
31 15,50 3,70
10 5,00 1,90
31,5 15,75 3,77
10,5 5,25 1,92
32 16,00 3,87
11 5,50 1,94
32,5 16,25 3,92
11,5 5,75 1,97
33 16,50 4,00
12 6,00 2,00
33,5 16,75 4,07
12,5 6,25 2,02
34 17,00 4,12
13 6,50 2,04
34,5 17,25 4,19
13,5 6,75 2,07
35 17,50 4,25
14 7,00 2,10
35,5 17,75 4,31
14,5 7,25 2,13
36 18,00 4,36
15 7,50 2,16
36,5 18,25 4,43
15,5 7,75 2,18
37 18,50 4,48
16 8,00 2,21
37,5 18,75 4,55
16,5 8,25 2,25
38 19,00 4,61
17 8,50 2,27
38,5 19,25 4,68
17,5 8,75 2,31
39 19,50 4,74
18 9,00 2,33
39,5 19,75 4,81
18,5 9,25 2,36
40 20,00 4,90
19 9,50 2,39
40,5 20,25 5,02
19,5 9,75 2,43
41 20,50 5,06
20 10,00 2,46
41,5 20,75 5,19
20,5 10,25 2,50
42 21,00 5,35
21 10,50 2,54
42,5 21,25 5,52 63,5 31,75 11,57
43 21,50 5,86
64 32,00 11,60
43,5 21,75 6,88
64,5 32,25 11,63
44 22,00 8,18
65 32,50 11,67
44,5 22,25 8,57
65,5 32,75 11,70
45 22,50 8,77

45,5 22,75 8,94 66 33,00 11,73

46 23,00 9,04 66,5 33,25 11,75

46,5 23,25 9,12 67 33,50 11,77

47 23,50 9,21
67,5 33,75 11,79
47,5 23,75 9,28
68 34,00 11,80
48 24,00 9,36
68,5 34,25 11,82
48,5 24,25 9,42
69 34,50 11,84
49 24,50 9,48

49,5 24,75 9,54 69,5 34,75 11,85

50 25,00 9,60 70 35,00 11,87

50,5 25,25 9,65 70,5 35,25 11,88

51 25,50 9,70
71 35,50 11,89
51,5 25,75 9,75
71,5 35,75 11,91
52 26,00 9,81
72 36,00 11,92
52,5 26,25 9,87
72,5 36,25 11,93
53 26,50 9,92

53,5 26,75 9,96 73 36,50 11,95

54 27,00 10,02 73,5 36,75 11,96

54,5 27,25 10,08 74 37,00 11,97

55 27,50 10,15 74,5 37,25 11,98

55,5 27,75 10,21
75 37,50 11,99
56 28,00 10,27
75,5 37,75 11,99
56,5 28,25 10,35
76 38,00 12,00
57 28,50 10,44

57,5 28,75 10,53

58 29,00 10,62

58,5 29,25 10,75

59 29,50 10,87

59,5 29,75 10,98

60 30,00 11,11

60,5 30,25 11,21

61 30,50 11,30

61,5 30,75 11,36

62 31,00 11,43

62,5 31,25 11,48

63 31,50 11,52
 Curva de titulacion del Glutamato
14.00

12.00

10.00

8.00
pH

6.00 pK-NH2 9.75; 2.43

4.00 pKa 2.25; 1.65

2.00
pKR 4.25; 1.83
0.00
0.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00
milimoles de NaOH

El ácido glutámico, presenta un grupo ionizable adicional en la cadena lateral. En este caso se trata
de otro grupo carboxilo, -COOH, como se puede ver en la estructura química de dicho aminoácido:

Esto hace que la valoración permita determinar tres valores de pKa, 2,25 para el grupo carboxilo
principal, 4,25 para el de la cadena lateral (rotulado como pKR en el gráfico) y de 9,75 para el
grupo amino, -NH2. Por lo tanto, la adición de equivalentes de base produce la liberación
secuencial de protones al medio, y estos equilibrios están determinados por sus
correspondientes constantes: el grupo α- carboxilo (pKa), el grupo carboxilo de la cadena lateral
(pKR) y el grupo amino (pKb). En este caso, existen tres regiones de capacidad tamponante, y el
pI se calcula como el promedio del pKa y del pKR.
La cercanía de los dos valores hace que en la curva de valoración no estén tan claros los puntos
medios para su cálculo. En este caso el punto Isoeléctrico será de 3.25, lo que es un valor bastante
cercano al reportado por la literatura (Aprox. 3).
TITULACIÓN GLICINA

pH mmol NaOH ml NaOH 0.25 M 9,63 51,25 20,5

1,52 1,25 0,5
9,73 52,5 21
1,52 2,5 1
9,79 53,75 21,5
1,59 3,75 1,5

1,62 5 2 9,87 55 22

1,64 6,25 2,5 9,93 56,25 22,5

1,64 7,5 3 10,03 57,5 23

1,69 8,75 3,5
10,12 58,75 23,5
1,73 10 4
10,23 60 24
1,82 11,25 4,5
10,34 61,25 24,5
1,83 12,5 5

1,93 13,75 5,5 10,43 62,5 25

1,97 15 6 10,45 63,75 25,5

2,04 16,25 6,5
10,56 65 26
2,07 17,5 7
10,73 66,25 26,5
2,13 18,75 7,5
10,92 67,5 27
2,18 20 8

2,19 21,25 8,5 11,23 68,75 27,5

2,26 22,5 9 11,39 70 28

2,36 23,75 9,5
11,5 71,25 28,5
2,37 25 10
11,6 72,5 29
2,44 26,25 10,5
11,64 73,75 29,5
2,54 27,5 11

2,62 28,75 11,5 11,68 75 30

2,7 30 12 11,74 76,25 30,5

2,73 31,25 12,5
11,86 77,5 31
2,74 32,5 13
11,87 78,75 31,5
2,98 33,75 13,5
11,92 80 32
3,16 35 14

3,2 36,25 14,5 11,95 81,25 32,5

3,24 37,5 15 12,01 82,5 33

3,47 38,75 15,5

7,65 40 16

8,74 41,25 16,5

9,08 42,5 17

9,25 43,75 17,5

9,27 45 18

9,3 46,25 18,5

9,37 47,5 19

9,45 48,75 19,5

9,53 50 20
GRÁFICA GLICINA

Curva de Titulacion Glicina

14

12

10
pK2 9.63; 51.25

8
pH

6 PI 6.06

2
1.25,
pK1 1.52
2.5; 1.52
0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
mmol NaOH

A pH ácido la Glicina se encuentra como un ácido diprótico, ya que tanto el grupo amino como
el carboxilo se encuentran protonados, es decir, a pH = 1, el 100% de las moléculas de
aminoácidos se encuentran en forma de catión.2.

Al ir añadiendo equivalentes de base, el grupo α-carboxilo (-COOH) se disocia, cediendo

protones al medio y transformándose en un grupo carboxilato; este equilibrio viene descrito por
el pKc. Cuando pH = pKc, la glicina se encuentra como 50% en forma de catión + 50%
zwitterion. Por lo tanto, el par -COOH/-COO- puede servir como un tampón amortiguador en la
región de pH cerca del valor pKc.

Para nuestro caso el punto Isoeléctrico obtenido corresponde a 6.06. Según la literatura el
punto isoeléctrico de la glicina corresponde a 5.97. La precisión de los valores varía
dependiendo de la forma de preparación de las soluciones usadas para la titulación.

CONCLUSIONES

1. La realización de la práctica nos permitió identificar que la cromatografía de capa fina

es un método útil, fácil y económico que nos permitió obtener una medida
semicuantitativa de los componentes, definido que en cuanto mayor sea la mancha
obtenida en el cromatograma mayor será la concentración de la sustancia.

2. El factor de retención depende de la afinidad de los aminoácidos con el disolvente o

el diluyente utilizado y esto mismo depende del tipo de aminoácido que se utilice, es
decir si son polares, apolares, neutros, etc. por lo cual es importante esta técnica ya
que de esta manera se nos facilitaran saber las características del aminoácido que se
esté utilizando.
3. Todos los aminoácidos poseen un punto en el que se comportan como una sal neutra. En
este punto la carga neta del aminoácido es nula ya que los dos grupos disociables tienen su
carga de signo contrario y compensada. Este punto recibe el nombre de punto isoeléctrico

4. Los aminoácidos por tener al menos un grupo ácido y un grupo amino pueden considerarse
como anfolitos, es decir, sustancias que pueden comportarse como ácidos o como bases.

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