MANUAL DE PARASITOLOGÍA

10.1.3 MÉTODOS DE CONCENTRACIÓN

FERREIRA 1:10 (MÉTODO POR FLOTACIÓN)
PRINCIPIO DEL ANÁLISIS
El método fue descrito por Biagi y Cols. En 1959 y fue puesto en práctica por Ferreira y Abreu.
Reúne característica de un coproparasitoscópico y de un método cuantitativo es útil para el
recuento de huevos y larvas de todos los parásitos considerados metazoarios y además hace una
buena concentración de los protozoarios: quistes y ooquistes. Debido a la utilización del tamiz y a
los lavados aplicados, se logra una materia fecal fina que facilita su estudio microscópico. Esta
técnica se basa en la utilización del
formol como preservador y
desinfectante y de la diferencia de
densidades con el empleo del sulfato de
zinc con una densidad de 1.192, que
hará que los parásitos existentes en las
muestras floten. Además, el empleo de
un dispositivo (campana de Ferreira)
hace posible la cuantificación de huevos
Figura 1: Campana de Ferreira (figura 1). Tiene como limitante que el
material a utilizar no se consigue fácilmente.

PROCEDIMIENTO

1. Homogeneizar 5g de materia
fecal con 45mL de solución de
formaldehído al 5%.

2. Tamizar la muestra a través de una

malla de alambre a un tubo de
polietileno de 30x100mm.

3. Centrifugar a 2000rpm (600g)

durante 1 minuto.

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4. Decantar el sobrenadante y resuspender

el sedimento con 45mL de agua de la llave
y centrifugar, repetir el procedimiento dos
a tres veces hasta observar un
sobrenadante claro.

5, 6 y 7. Agregar 10mL de Sulfato de Zinc δ

1.19° Baumé y resuspender el sedimento.
Introducir la campana de Ferreira y llenar el tubo
con sulfato hasta el borde de la rondana.
Centrifugar a 2000rpm (600g) durante 1 minuto.

8. Comprimir la banda elástica de la

campana y sin dejar de presionar,
retirarla del tubo cuidadosamente.

9. Limpiar con una gasa la parte

exterior de la campana.

10. Invertir la campana y agregar una

gota de lugol al tubo.

11 y 12. Mezclar perfectamente el

contenido de la campana. Depositar la
gota sobre el portaobjetos (25x75mm)

13. Homogeneizar la suspensión con un

ángulo del cubreobjetos (22x40mm)

14. Cubrir la preparación y observar al

microscopio con objetivos de 10x y 40x.

15. Reportar la presencia de quistes de

protozoarios. Cuantificar el total de huevos de
helmintos, multiplicar por cinco y reportar el
número de huevos por gramo de heces (hgh).
Reportar el nombre completo del parásito.

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FAUST (MÉTODO POR FLOTACIÓN)

PRINCIPIO DEL ANÁLISIS
Faust es el método más usado y efectivo, en este se precipitan los parásitos por centrifugación
después de haber filtrado la muestra. Es parecido al descrito por Lane en 1924, hace una buena
concentración de quistes, huevos y larvas; es la técnica preferida por la generalidad de los
laboratorios. No es efectivo para la búsqueda de huevos pesados como los de Tremátodos o como
los huevos no-fértiles de Áscaris.
El principio consiste en usar una solución de ZnSO4 δ 1.1.80° Baumé, siendo de más alta densidad
que los elementos buscados, ya que hace que los parásitos floten en la superficie del tubo; además
con el tamiz empleado se obtienen muestras libres de material burdo, por lo que las formas
parasitarias son encontradas con facilidad pues las preparaciones quedan con pocos artefactos.
Los elementos parasitarios son recuperados de la capa superficial y los residuos se mantienen en
el fondo del tubo. Con estas técnicas los preparados son más limpios que los obtenidos por
sedimentación. La frecuencia de las distintas parasitosis es alta, sobre todo en países en vías de
desarrollo; es importante por ello que los laboratorios clínicos manejen de forma rutinaria varios
métodos coproparasitoscópicos alternativos que apoyen el diagnóstico parasitológico.

PROCEDIMIENTO

8. Depositar una gota de lugol en el portaobjetos

y colocar sobre él un cubreobjeto con la muestra.
1. Homogeneizar 2g de materia Observar al microscopio con objetivos de 10x y
fecal con 10mL de formol al 5%. 40x. Reportar resultados

7. Recoger la película del menisco con un

2. Tamizar a través de una malla de
cubreobjeto de 22x22mm, o con un
alambre a un tubo de vidrio de
portaobjeto de 25x75mm.
13x100mm.

6. Agregar con cuidado, resbalando por las

paredes del tubo más ZnSO4 hasta formar el
3. Centrifugar a 1500rpm (500g) menisco
durante 10 minutos.

5. Agregar 2 a 3mL de ZnSO4 δ1.1.80°

Baumé y resuspender el sedimento.
4. Decantar el sobrenadante y Llenar hasta 3.0mm antes del borde del
resuspender el sedimento con agua de tubo con sulfato y centrifugar a
la llave y repetir el lavado. 1500rpm (500g) durante un minuto.

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RITCHIE (MÉTODO POR SEDIMENTACIÓN)

PRINCIPIO DEL ANÁLISIS
La prevalencia del parasitismo intestinal es alta en muchos países del mundo y la presencia de
parásitos puede estar asociada a diferentes causas entre ellas factores higiénicos sanitarios que
son los de mayor incidencia. El diagnóstico de los parásitos intestinales presentes en la población
es cada día más necesario y más aún en los países subdesarrollados.
En 1917 Carles y Barthelemy describieron el primer método de concentración por sedimentación
utilizando solución salina, éter y formaldehido, años más tarde, en 1948 Ritchie describió un método
semejante, el cual hasta la fecha se sigue utilizando. En evaluaciones comparativas con este
método, se ha demostrado su utilidad para el diagnóstico de parasitosis intestinales leves o
moderadas. El empleo de éter y formaldehido permite con el primero, liberar las formas parasitarias
de las grasas, por disolución de estas y con el formol se fijan y conservan. La concentración se
hace por centrifugaciones sucesivas. El diagnóstico de las infecciones parasitarias puede
establecerse de dos maneras fundamentales por métodos directos e indirectos. Dentro de los
métodos directos se encuentro el método de concentración por sedimentación. La concentración
de huevos, larvas y quistes en heces ha llegado a ser un procedimiento de rutina como parte de un
examen completo para la detección de los parásitos intestinales y se puede realizar como
complemento del examen directo. Los procedimientos de concentración permiten la detección de
protozoos y/o helmintos. Los parásitos se concentran por acción de la gravedad, suspendiendo las
heces en agua corriente, agua destilada o solución salina y dejando que sedimenten naturalmente
o por centrifugación. Estos métodos son principalmente útiles para la concentración de quistes,
ooquistes y huevos. Unas ventajas que tiene este método es concentrar y no deformar las formas
parasitarias, permite el transporte y almacenamiento de la materia fecal procesada antes de ser
examinada, se usa cuando se necesita una técnica para evaluación de tratamiento y determinación
de frecuencia.

PROCEDIMIENTO

1. Homogeneizar 2g de materia
fecal con 10mL de formol al 5%.

2. Tamizar la suspensión a través

de una malla de alambre a un tubo
cónico de 15mL

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3. Centrifugar a 2000rpm (600g) durante 1

minuto.

4. Decantar el sobrenadante y lavar. Resuspender

el sedimento con 15mL de solución salina.
Centrifugar, repetir el procedimiento 2 – 3 veces
hasta observar un sobrenadante claro.

5. Agregar 10mL de formol al 5%,

mezclar y dejar reposar 10 minutos.

6. Añadir 5mL de éter etílico anhidro, puede

sustituirse con acetato de etilo δ 0.7° Baumé.

7. Tapar el tubo y agitar vigorosamente durante 30

segundos, destapar con cuidado y centrifugar a
1500rpm (500g) durante 2 minutos.

8. Retirar el tubo de la centrifuga y

observar las cuatro interfases.

9. introducir un aplicador en el tubo y liberar

el borde de las capas, decantar y extraer una
gota del sedimento.

10. Colocar la gota sobre un portaobjeto

de 25x75mm.

11. Añadir una gota de lugol y cubrir la

muestra. Reportar la presencia o ausencia de
quistes de protozoarios y/o huevo de
helmintos. Anotar el nombre completo de los
parásitos.

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