CALIBRACIÓN DE MICROPIPETAS

Atencio, Carlos. CIP: 4-764-1823

Curso de Bioquímica (QM 380), Escuela de Química, Facultad de Ciencias Naturales y Exactas,
Universidad Autónoma de Chiriquí, David, Chiriquí, Republica de Panamá.
Email: [email protected]

RESUMEN:
La finalidad de este experimento fue conocer las partes y el funcionamiento de las micro pipetas;
adquiriendo destreza en la utilización de las pipetas para la medición de volúmenes entre 1 y 1000μL,
determinando tanto la exactitud como la precisión de la misma. Esta experiencia se realizó usando el
manejo correcto de las micro pipetas de tipo, P20 en μL en agua destilada. Por último, los datos
recaudados en cada volumen se utilizaron para el calculo del porcentaje de exactitud y coeficiente de
variación para la micropipeta P20 de los cuales nos presentó resultados favorables en la precisión X2 =
0.163, sin embargo, en la exactitud no lo fue T = 7.04. Podemos concluir que el uso de las micropipetas
permite emplear diferentes líquidos sin tener que preocuparnos por la contaminación de la misma ya que
se emplean puntas desechables de plástico además de la facilidad para la medición exacta de pequeñas
cantidades de líquidos.

OBJETIVOS:
 Practicar el uso adecuado de las aparato: para ello, se emplean puntas desechables,
micropipetas empleadas en el laboratorio de plástico, que habitualmente son estériles.
de química.

 Realizar procedimientos y cálculos Existen varios tipos de puntas: por ejemplo, las
estadísticos que permiten evaluar la amarillas para pipetear volúmenes pequeños (por
calibración de las micropipetas. ejemplo, 10 μl), y las azules para pipetear
volúmenes grandes (por ejemplo, 800 μl).
 Analizar resultados obtenidos, Existen micropipetas manuales, en las que el
concluyendo sobre la exactitud y la volumen a aspirar se fija girando un botón en su
precisión de los instrumentos utilizados. parte superior que está conectado a un sistema
analógico de confirmación de volumen, y
automáticas, en las cuales dicho sistema es digital.
INTRODUCCIÓN: Según Martin, R. (1985). “Hay micropipetas
La micropipeta es un instrumento de laboratorio simples, que sólo acogen una punta cada vez, y
empleado para absorber y transferir pequeños multicanales, que permiten incorporar múltiples
volúmenes de líquidos y permitir su manejo en las puntas (por
distintas técnicas científicas. ejemplo, ocho),
“Los volúmenes captables por estos instrumentos absorbiendo el
varían según el modelo: los más habituales, mismo volumen
denominados p20, p200 y p1000, admiten un en todas ellas”.
máximo de 20, 200 y 1000 μl, respectivamente”,
(Gray, C., 2009).
Es de destacar que el uso de micropipetas permite
emplear distintos líquidos sin tener que lavar el Imagen # 1; Micropipetas P20,
P200, P1000 μl.
MATERIALES Y REACTIVOS: V= 19.8684 μl
Materiales:
Vasos químicos; 50,100 mL, kimax. Plato Petri; Tabla 2; Calculo del T. critico:
plástico. Micropipeta P20; 1-20 μl, Balanza T calculado 7.04
Analítica; 0.0001g -220g, error + 0.0002, Aes T critico 1.833
200.

Reactivos:
Agua; PM= 18g/mol, D= 1.00g/mL, T= 28°C.

(19.479−20)
METODOLOGIA: T= √10
0.2339
Seleccionar una micropipeta y su respectiva
puntilla desechable, luego marcar la escala del
0.521
volumen deseado y remojar en agua destilada T=
0.074
varias veces. Colocar un vaso químico con agua
destilada y tomar la temperatura de la misma. En
una balanza analítica colocar un Plato Petri y T = 7.04
medir 20 de agua, anotar el peso. Realizar este
procedimiento 9 veces más. Con los datos Tabla 3; determinación del X2:
obtenidos calcular la exactitud y la precisión de la X2 calculado 0.163
2
micropipeta utilizada. X 16.919

RESULTADOS:
Tabla 1; Trasformación de masa a volumen,
promedio y desviación estándar:
(𝟏𝟗.𝟖𝟔𝟖𝟒−𝟐𝟎)𝟐 (𝟏𝟗.𝟕𝟔𝟖𝟓−𝟐𝟎)𝟐
Medida Masa Volumen X2= + +
0.0199g 19.8684 μl 𝟐𝟎 𝟐𝟎
1
(𝟏𝟗.𝟒𝟔𝟗𝟎−𝟐𝟎)𝟐 (𝟏𝟗.𝟑𝟔𝟗𝟐−𝟐𝟎)𝟐
2 0.0198g 19.7685 μl + +
𝟐𝟎 𝟐𝟎
3 0.0195g 19.4690 μl (𝟏𝟗.𝟕𝟔𝟖𝟓−𝟐𝟎)𝟐 (𝟏𝟗.𝟏𝟔𝟗𝟓−𝟐𝟎)𝟐
19.3692 μl
+ +
4 0.0194g 𝟐𝟎 𝟐𝟎
0.0198g 19.7685 μl (𝟏𝟗.𝟑𝟔𝟗𝟐−𝟐𝟎)𝟐 (𝟏𝟗.𝟏𝟔𝟗𝟓−𝟐𝟎)𝟐
5 + +
0.0192g 19.1695 μl 𝟐𝟎 𝟐𝟎
6
(𝟏𝟗.𝟒𝟔𝟗𝟎−𝟐𝟎)𝟐 (𝟏𝟗.𝟑𝟔𝟗𝟐−𝟐𝟎)𝟐
7 0.0194g 19.3692 μl +
𝟐𝟎 𝟐𝟎
8 0.0192g 19.1695 μl

9 0.0195g 19.4690 μl
0.0194g 19.3692 μl X2 = 0.163
10
Promedio 19.479 μl
SX +0.2339
(SX)2 +0.2466 DISCUSION:
Temperatura 28°C En esta experiencia se realizaron 10 repeticiones,
con respecto a 10 volúmenes con micropipeta, de
acuerdo con la (Tabla 1), la P20, tiene una
V= ((n1 + 2X10-6) X 0.99831 X 10000)
exactitud mucho mayor que la establecida en la contaminaciones).” (Silva, García, Del Castillo,
(Tabla 2) de distribución ya que el valor calculado Ania, & Goméz, 2006).
es mucho mayor al esperado. Mientras que la
precisión que obtuvimos fue muy precisa ya que el
valor fue muy pequeño comparado al CONCLUSIONES:
esperado.(Tabla 3) Esto nos indica grandemente  Consideramos que las micropipetas son
que los equipos utilizados para los cálculos utilizas para absorber y transferir
pudieron tener algunos errores sistemáticos los volúmenes pequeños lo cual nos favorece
cuales causaron un gran error en la exactitud de las ya que tendremos una mayor precisión en
mediciones o simplemente la manipulación no fue los trabajos y resultados obtenidos.
adecuada ya que el valor teórico no concuerda con
el experimental.  Destacar que los usos de las micropipetas
“Los errores sistemáticos tienen un valor permiten emplear diferentes líquidos sin
definitivo, una causa asignable, y son de la misma tener que lavar la misma ya que se
magnitud para un conjunto de mediciones de las emplean puntas desechables de plástico.
réplicas analizadas”,(Skoog, 2015). Sin embargo,
los errores aleatorios obtenidos es esta experiencia  El buen uso de las micropipetas permitirá
fueron bajas, pero no quiere decir que no afecte, obtener resultados precisos y coherentes
“Los errores aleatorios suelen ser la mayor fuente en el laboratorio.
de incertidumbre en una determinación según
Skoog”, (2015). Por lo general los principales
contribuyentes a estos errores aleatorios pueden
ser identificados, pero es muy difícil medirlos ya BIBLIOGRAFÍA:
 Harris, D. C. (2003). Análisis químico
que son demasiado pequeños, de tal manera es
cuantitativo. México: Reverté.
evidente siempre tener un rango aceptable en la
precisión de determinadas mediciones como
 Silva, M. D., García, M. J., Del Castillo,
observamos en el cálculo de X2 en la (Tabla 3).
L., Ania, J. M., & Goméz, D. (2006).
Técnico Especialista en Laboratorio.
“El volumen de líquido tomado en una punta
España: MAD
depende del ángulo con el que se sujete la pipeta
y la profundidad a la que se sumerja al tomar el
 Gray, C. (2009). Química Analítica.
tomar el líquido. Cada persona consigue una
México: McGraw Hill.
precisión y exactitud algo diferentes al utilizar
una misma micropipeta.” (Harris, 2003).
 Rubinson, J., & Rubinson, K. (2000).
Debido a esto las repeticiones realizadas con el
Química contemporánea. México:
agua o cualquier otra sustancia liquida generaron
Pearson Educacion.
un porcentaje de error por encima del límite
porque en la puntilla de la micro pipeta solo
 Martin H, Rafael. 1985. Matemática
extraía una pequeña gota, manifestando así una
química, Panamá.
variación que se mantenía a lo largo de las
mediciones. (Tabla 3).
“El uso de estas pipetas constituye una gran  Skoog, W. D. (2015). Fundamentos de la
ventaja, ya que proporciona una mayor precisión Quimica Analitica. Mexico: Cengage
en los trabajos y disminuye la fatiga de Ias Learning.
repetidas tareas de muestreo y dilución. Estas
pipetas funcionan mediante un pistón y llevan
puntas desechables de plástico (para evitar