MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN

Creada por Ley Nº 29304
Autorizada por Resolución Nº 647-2011 - CONAFU

PRÁCTICA Nº 01:
“MATERIAL Y EQUIPOS DE LABORATORIO”

I. OBJETIVOS:

El propósito de la presente práctica es la de reconocer el material y equipos que

conforman un Laboratorio de Microbiología, así como su uso y acondicionamiento.

A. Material de Vidrio:

 Tubos de Ensayo: Son tubos de vidrio neutro, de paredes gruesas, resistentes ~- a

altas temperaturas. Son de diferentes tamaños y capacidad. Para utilizarlos, estos
deben estar taponados con algodón no absorbente y esterilizado.

 Tubo de Smith: Es un tubo especial que se utiliza para observar la producción de

gas en procesos de fermentación.

 Tubo o Campana de Durham: Es un tubo pequeño, con un extremo abombado, se

fabrican a partir de varillas de vidrio hueco, sirven para observar la producción de
gas en procesos de fermentación. Para utilizarlos es necesario colocarlos en forma
invertida dentro de un tubo de ensayo.

 Placas Petri: Son cajas cilíndricas, constituidas por una tapa y una base, de paredes
gruesas. Son de diversos tamaños y se emplean para colocar en la base los medios
de cultivo sólidos.

 Pipetas: Son tubos cilíndricos largos, constituidos por la boquilla y el cuerpo de la

pipeta. Son de dos tipos:

a. Graduadas: Se caracterizan por presentar un número fracción, donde el

numerador representa el volumen total de la pipeta y el numerador las veces en
que está dividida (mi). las pipetas graduadas pueden ser: - Terminales' cuando el
vaciado del líquido a medir se realiza hasta la punta de la pipeta; y las - No
Terminales cuando el vaciado del líquido se realiza hasta la última línea de
graduación.
b. No Graduadas: llamadas también pipetas Pasteur, son fabricadas con varillas de
vidrio de diámetro de 4 mm x 30 ó 40 cm de longitud. Las pipetas para ser
utilizadas, deben ser taponadas con algodón no absorbente en la zona de la
boquilla y luego envueltas en papel para ser esterilizadas.
c. Probetas: Son recipientes cilíndricos graduados, de diferente tamaño y capacidad,
presentan una base plana. Se les emplea para medir volúmenes grandes de
líquidos.

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d. Matraz Erlenmeyer: Son frascos de vidrio de forma cónica de cuello corto y base
plana, son de diferentes tamaños y capacidad, pueden estar o no graduadas. Para
su empleo se taponan con algodón no absorbente; en él se preparan soluciones y
medios de cultivo.
e. Balones: Son frascos de vidrio de forma redonda, de cuello largo y base plana.
Cumplen la misma finalidad que el matraz.
f. Kitasato: son frascos de forma cónica de paredes gruesas y de cuello corto, en
cuya base presenta un pequeño tubo lateral, que sirve de conexión a la bomba de
vacío. Forma parte del equipo de esterilización por filtración; en el se recepciona
el material esterilizado.
g. Espátula de Drigalsky: Son varillas de vidrio compacto que tiene la forma de un
triángulo en uno de sus extremos. La zona recta y horizontal facilita la siembra de
bacterias por diseminación.
h. Baguetas o Agitadores: Son varillas de vidrio compacto, de extremos romos, se
emplean para disolver sustancias en una solución.
i. Láminas porta y cubre objetos: Los portaobjetos son láminas de vidrio
transparente de forma rectangular y pequeño grosor. Los cubreobjetos son finas
laminillas de menor tamaño que la lámina portaobjetos, de forma rectangular o
cuadrada. Ambos son importantes en la observación microscópica de los
microorganismos.
j. Frascos goteros: Son frascos de vidrio de paredes gruesas, transparentes o de
color ámbar; algunos con tapas especiales para facilitar el vaciado del colorante.
k. Mortero y Pilón: Es un recipiente cóncavo de porcelana de paredes gruesas; se
emplea para triturar colorantes, tejidos u otros especímenes, para lo cual es
necesario formar un ángulo de 600 en relación con la mesa y de esta manera
ejerce una mayor presión.
l. Jarra de Brewer: Llamada también Campana de Anaerobios. Está constituida por
una tapa de baquelita en cuya parte inferior presenta una canastilla conteniendo
granos de paladio; el cuerpo de la jarra que es cuba cilíndrica de paredes gruesas
en cuyo interior se colocan los tubos o placas de petri a incubar. La jarra se cierra
herméticamente mediante una abrazadera.
m. Entre otros materiales de vidrio tenemos embudos, viales, bujías, etc.

B. Material de Metal:

a. Asas Bacteriológicas: Constituidas por un vástago de metal con cubierta de

ebonita aislante del calor y en el extremo proximal, una tuerca para insertar, el
alambre de platino o nicrom. Que puede terminaren anillo (asa de kolle), en punta
o aguja y en ángulo recto (asa micológica).
b. Canastillas: Se utiliza para el transporte de los tubos u otro material.
c. Gradillas: Sirven para colocar los tubos durante la sesión de trabajo.
d. Espátulas: Es de material inoxidable. Se utiliza para coger el material a pesar.

C. Equipos de Laboratorio:

 Autoclave: Equipo destinado para la esterilización de material contaminado; de los

medios de cultivo y otros. Consta de una caldera de cobre batido estaño
interiormente, protegido por una camisa metálica también de cobre, formando
paredes dobles. En su base está instalada la fuente calorífica, constituida por una

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resistencia que va conectada a un termostato. A una distancia del fondo del

recipiente, está la placa cribosa para apoyo del material y para la salida del vapor;
en la parte superior se halla la tapa, que es pesada (de bronce fundido) en cuyo
borde interno está adaptado un arandel de caucho para el cierre hermético del
equipo. Los tornillos o bulones en el margen superior refuerzan el cierre, evitándose
el escape del vapor. Posee además un manómetro (que marca las libras de presión
interno del equipo); una válvula de seguridad, (para escape del vapor cuando la
presión excede a la contención del aparato), un termómetro y una llave o espita para
la salida del aire y vapor cuando empieza a hervir el agua.
El vapor de agua .se aplica en una cámara cerrada en la que existe un generador de
vapor; cuando este se produce, desplaza al aire, que sale por una válvula o espita
que se cierra en el momento en ya sale vapor durante 15 minutos. Posteriormente se
consigue la presión deseada teniendo en cuente que el vapor a 1 a.m. de presión
corresponde a 1210 °C de temperatura, que aplicada durante 15 ó 20 minutos.
Destruye todas las formas vegetativas y esporuladas de los microorganismos.

 Baño de Agua: Es un recipiente de forma rectangular, que está constituido en su

parte inferior por una resistencia que va conectado a un termostato, que permite
regular la temperatura; por encima se encuentra una cubeta en la que se coloca el
agua a calentar. Se emplea para disolver medios de cultivo, inactivación de sueros,
pruebas de reductasa, etc.

 Horno Pasteur: Es un aparato muy utilizado en la esterilización por calor seco.

Tiene variadas formas, pero básicamente está constituido por una resistencia y un
termostato que regula altas temperaturas.

 Incubadoras o Estufas bacteriológicas: Son utilizadas para la incubación de los

microorganismos facilitando su desarrollo. Tiene la misma estructura de un horno
pero la temperatura está calibrada en 35 - 37°C.

 Centrífugas: Son aparatos diseñados para acelerar la separación de partículas

sólidas suspendidas en líquidos. La velocidad a la cual sedimentan las partículas en
un líquido depende de varios factores como el tamaño de la partícl1la, el peso, la
viscosidad del líquido y la fuerza gravitacional.

 Potenciómetro: Se les utiliza para medir el pH de las soluciones buffer y medios de

cultivo. Constituido por dos electrodos sensibles a concentraciones de
hidrogeniones. Los potenciómetros emplean un electrodo de vidrio, unido a un
electrodo de calomel como estándar.
Debe tenerse extremo cuidado con el manejo de electrodos, especialmente con la
membrana del electrodo vidrio que es muy delicada y se rompe al primer contacto
con elementos punzocortantes. El electrodo de calomel debe estar siempre lleno con
una solución adecuada sal (usualmente Cloruro potásico saturado). Luego de cada
medición deben lavarse los electrodos y sumergirlos en agua cuando no se use el
aparato.

 Refrigeradoras y Congeladoras: Son aparatos que proporcionan temperaturas

muy bajas. Se emplean para almacenar medios de cultivo, sueros, reactivos y
soluciones perecederas.

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Las congeladoras se requieren para almacenamientos más prolongados de sueros,

enzimas, aminoácidos, etc.

 Balanza: Se utiliza para pesar diferentes ingredientes para la preparación de medios

de cultivo, colorantes y otros.

 Microscopio: Son aparatos que permiten aumentar el tamaño de los

microorganismos cientos o miles de veces.
Muchas enfermedades son transmisibles y se propagan por gérmenes que a menudo
se pueden observar por medio del microscopio en muestras obtenidas de pacientes.
Por lo tanto, la microscopia directa es indispensable en los laboratorios.
Un laboratorio sin microscopio, o con un microscopio que no se conserva de manera
adecuada, no se puede considerar equipado con propiedad.

a. COMPONENTES DEL MICROSCOPIO

Los diversos componentes del microscopio se pueden agrupar en cuatro sistemas:

A. El sistema de soporte.
B. El sistema de aumento.
C. El sistema de iluminación.
D. El sistema de ajuste.

A. EL sistema de soporte
Consiste en:
1. El pie.
2. El bastidor.
3. Portaobjetivos o revólver (cambia objetivos).
4. La platina.
5. La platina mecánica, que imprime un movimiento lento y regulado al porta
objetos.

B. El sistema de aumento.
Consiste en un conjunto de lentes.
Las lentes del microscopio se encuentran montadas en dos grupos, uno en cada
extremo de un tubo relativamente largo, o tubo del microscopio:
 El primer grupo de lentes se halla en el extremo inferior del tubo,
inmediatamente arriba de la preparación que se va a examinar (el objeto), y
se denomina objetivo.
 El segundo grupo se encuentra en el extremo superior del tubo, por donde
mira el microscopista, y se llama ocular.

Los Objetivos
(a) Aumento
 El poder de aumento de cada objetivo se indica por un número grabado en la manga
de la lente:
 El objetivo x 10 aumenta 10 veces
 El objetivo x 40 aumenta 40 veces

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 El objetivo x 100 aumenta 100 veces (el objetivo x 100 generalmente se encuentra
marcado con un anillo rojo para indicar que se debe usar con aceite de inmersión).

(b) La abertura numérica (AN)

La AN también se halla grabada en la manga de la lente, junto a la indicación del poder
de aumento; v.g.:
 0,30 en el objetivo x 10
 0,65 en el objetivo x 40
 1,30 en el objetivo x 100

A medida que aumenta la AN es mayor el poder de resolución (capacidad de hacer

perceptibles detalles adyacentes muy cercanos, separándolos y aclarándolos) (Además,
a medida que aumenta la AN disminuyen las dimensiones de la lente frontal montada en
la base del objetivo. La lente frontal del objetivo x 100 tiene el tamaño de una cabeza de
alfiler, por lo que se debe manejar con cuidado.)

(c) En la manga del objetivo puede haber otros números:

La longitud recomendada en mm para el tubo del microscopio (entre el objetivo y el
ocular), es generalmente de 160 mm. el grosor recomendado en mm para el
cubreobjetos utilizado para tapar el portaobjetos, v.g., 0,17.
Las roscas para atornillar todos los objetivos son uniformes, de manera que estos se
pueden intercambiar en el revólver.

(d) Distancia de operación del objetivo:

Esta es la distancia que hay entre la lente frontal del objetivo y el portaobjetos cuando la
imagen se encuentra enfocada.
A medida que el poder de aumento del objeto es mayor disminuye la distancia de
operación.
 objetivo x 10: la distancia de operación es de 5 - 6 mm.
 objetivo x 40: la distancia de operación es de 0,5 - 1,5 mm.
 objetivo x 100: la distancia de operación es de 0,15 - 0,20 mm.

(e) Poder de resolución:

Cuando mayor sea el poder de resolución del objetivo será más clara la imagen y
aumentará la capacidad de poner de manifiesto detalles adyacentes muy cercanos,
separándolos y aclarándolos.
El poder de resolución máximo de un buen microscopio de laboratorio médico es,
aproximadamente, de 0,25 µm (el poder de resolución del ojo humano normal es de
0,25 mm).
El aceite de inmersión aumenta el poder de resolución al hacer que se conserven
muchos rayos luminosos que se perderían por refracción al usar un objetivo seco.

El Ocular
Aumento
El poder de aumento se encuentra marcado en el ocular:
 Un ocular x 4 aumenta 4 veces la imagen que produce el objetivo.
 Un ocular x 6 aumenta la imagen 6 veces.
 Un ocular x 10 aumenta la imagen 10 veces.
 Si la imagen del objeto se hace aumentar 40 veces mediante el objetivo x 40 y en
seguida 6 veces mediante el ocular x 6, el aumento total será de 6 x 40 = 240.

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 Para calcular el aumento total de la imagen del objeto que se observa, multiplíquese
el poder de aumento del objetivo por el del ocular.
 El poder de aumento de los microscopios utilizados en los laboratorios médicos
oscila entre 50 y 1000.

Microscopios monoculares y binoculares

Los microscopios monoculares (que solo poseen un ocular) proporcionan mejor
iluminación y se recomienda emplearlos con objetivos x 100 de inmersión en aceite
cuando la fuente luminosa sea la luz del día.
Los microscopios binoculares (que poseen dos oculares, pero solo se usa un objetivo en
cada ocasión) fatigan menos los ojos cuando se deben realizar exámenes prolongados.
Sin embargo, la iluminación eléctrica es esencial para el objetivo x 100.

D. El sistema de iluminación

1. La fuente luminosa:
De preferencia se empleará luz eléctrica, pues es más fácil de ajustar.
Puede proporcionarla un bombillo contenido en el microscopio por debajo de la
platina o mediante un bombillo exterior colocado frente al microscopio.
De lo contrario se podrá utilizar la luz del día. El microscopio nunca se debe utilizar ni
debe permanecer bajo la luz directa del sol. Deberá estar bien iluminado, pero se usará
una luz amortiguada. Si la luz del sol es excesivamente brillante se colocará frente al
microscopio, una botella o redoma de vidrio claro, llena de agua, a fin de reducir la
intensidad de la luz.

2. El espejo:
El espejo refleja los rayos de la fuente luminosa sobre el objeto. Por un lado su
superficie es plana y cóncava por el otro. El lado cóncavo constituye un condensador
de escaso poder y no se debe usar si ya se cuenta con un condensador propiamente
dicho.

3. El condensador:
El condensador lleva los rayos luminosos a un foco común sobre el objeto que se
habrá de examinar.
Se encuentra colocado entre el espejo y la platina. Se puede elevar (iluminación
máxima) y bajar (iluminación mínima). Se debe centrar y ajustar adecuadamente.

4. El diafragma:
El diafragma, que se encuentra dentro del condensador, se utiliza para reducir o
ampliar el ángulo, y, por lo tanto, también la cantidad de luz que entra en el
condensador.
Cuanto más se abre el diafragma más se amplía el ángulo y en consecuencia aumenta
la AN y se pueden observar detalles más pequeños. Sin embargo, al mismo tiempo se
reduce el contraste.

5. Filtros:

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En algunos microscopios se ajustan filtros de colores (principalmente azules) debajo

del condensador. Se pueden dejar en su sitio o quitarlos, según el tipo de preparación
que se vaya a observar.

E. El sistema de ajuste
Este sistema comprende:
 La cremallera de avance rápido. Es el tornillo mayor. Se utiliza primero para lograr
la aproximación del enfoque.
 El tornillo micrométrico de avance lento. Hace que el objetivo se desplace más
lentamente. Se emplea para conseguir un enfoque perfecto del objeto 3. El tornillo
de ajuste del condensador Se utiliza para elevar el condensador y aumentar la
iluminación o descenderlo y reducir la iluminación.
 Los tornillos para centrar el condensador Puede haber tres tornillos colocados
alrededor del condensador: uno al frente, uno a la izquierda y uno a la derecha. Se
usan para centrar el condensador exactamente en relación con el objetivo.
 El elevador del diafragma iris. Este es un pequeño elevador que se encuentra fijo al
condensador. Se puede mover para cerrar o abrir el diafragma, reduciendo o
aumentando así él ángulo y la intensidad de la luz.
 Reguladores de la platina mecánica:
o Se utilizan para desplazar el portaobjetos sobre la platina.
o 1 tornillo lo desplaza hacia atrás y hacia delante.
o 1 tornillo lo desplaza a la izquierda o a la derecha.

II. MEDIDAS GENERALES DE CONSERV ACION DEL MICROSCOPIO

El microscopio necesita cuidados para conservarlo en buenas condiciones de trabajo y

asegurar resultados confiables en el laboratorio. En los climas cálidos y húmedos se
requieren cuidados especiales.

1. Equipo:

 Piezas de trapos viejos y un pañuelo fino, de lino, que estén limpios.

 Papel de seda especial para lentes o, en su defecto, papel blanco absorbente (papel
de tocador).
 Si es posible, una pieza de piel de gamuza (de lo contrario, un trapo que no
desprenda pelusa).
 Un frasco pequeño de xilol (o tolueno).
 Una cubierta de material plástico.
 Una pequeña pera de goma y, si es posible, un pincel fino (o una brocha especial
para limpiar lentes).
 En los climas cálidos y húmedos En laboratorios que cuentan con electricidad:
 Un armario que esté templado, se calienta mediante uno o dos bombillos
incandescentes de 40 vatios.
En los laboratorios que no cuentan con electricidad:

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 Si es posible, un secador de 15 - 20 cm. de diámetro, con no menos de 250 g de

gel de sílice azul (que indica la existencia de humedad al tomar un color rojizo).

2. Limpieza de los objetivos

 Objetivos secos.
 Exhale sobre la lente y limpieza con un trapo suave, moviéndola de un lado a otro y
no en círculos.
 Objetivos de inmersión en aceite.
 Quite el aceite con papel especial para lentes o papel absorbente. Si quedan
vestigios del aceite de inmersión viejo o se ha empleado aceite de madera de cedro,
humedezca el papel muy ligeramente con xilol o tolueno y limpie la lente otra vez
con papel seco.
 Todas las noches, antes de guardar el microscopio, quite el polvo de los objetivos
arrojándose aire con la pera de goma. Si es necesario, limpie el polvo remanente
usando el pincel fino.

3. Limpieza de los oculares

 Limpie la superficie superior de la lente más alta (en la que se aplica el ojo) con un
trapo suave o papel de seda.
 Limpie la superficie inferior de la lente más baja, dentro del tubo del microscopio,
con el pincel fino.
 Si hay polvo en el interior del ocular desatornille la lente más alta y limpie las
lentes interiores empleando solo aire aplicado con la pera de goma y el pincel fino.

4. Limpieza del condensador y el espejo

 El condensador se limpia de la misma manera que los objetivos, con un trapo suave
o papel de seda humedecido con xilol.
 El espejo se limpia con un trapo suave humedecido con alcohol.

5. Limpieza del bastidor y la platina.

 Limpie con una pieza de piel de gamuza o un trapo suave, que no desprenda pelusa.
 Nunca se debe usar xilol ya que puede arrancar la pintura negra del microscopio @
La platina se puede limpiar completamente usando papel absorbente impregnado
de vaselina.

COSAS QUE NUNCA SE DEBEN HACER CON EL MICROSCOPIO

1. Nunca limpie las lentes de los objetivos o los oculares con etanol.
2. Nunca sumerja los objetivos en xilol o etanol (se aflojarían).
3. Nunca emplee papel ordinario o algodón para limpiar las lentes.
4. Nunca toque los objetivos con los dedos.
5. Nunca limpie los soportes o la platina con xilol.
6. Nunca limpie las lentes internas de los oculares o los objetivos con trapo o papel
(esto desprendería la antirreflejante); utilice solamente un pincel fino.
7. Nunca deje el microscopio sin los oculares, a menos que los orificios se taponeen.

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8. Nunca guarde el microscopio en estuches de madera cerrados si la región es cálida y

húmeda.
9. Nunca deje el microscopio con aceite de inmersión en el objetivo.
10. Nunca lleve el microscopio cogiéndolo por el bastidor con una mano; utilice
ambas manos, una en el pie y la otra en el bastidor.

Limpieza del Material y su Esterilización:

El material usado en el laboratorio de microbiología debe ser previamente limpiado,

antes de ser esterilizado, tratamiento previo que va a depender del tipo de material.

1°. El material sucio se sumerge en solución detergente y se cepilla cada pieza bajo
abundante chorro de agua. Es preferible dejar en la solución detergente por 24 horas
a temperatura ambiente.
2°. Se enjuaga como mínimo 3 veces cada pieza con agua corriente en caliente.
3°. Se enjuaga 5 veces con agua destilada.
4°. Se deja escurrir y se secan en estufa.
5°. Finalmente se prepara el material para su esterilización.

Los utensilios de vidrio que nunca se utilizaron son ligeramente alcalinos. Con objeto
de neutralizarlos deben seguirse los procedimientos siguientes:
 Ponga en una cubeta 3 litros de agua con 60 mi de ácido clorhídrico (es decir, una
solución de este ácido al 2%).
 Sumerja completamente en esta solución durante 24 horas los utensilios de vidrio
sin usar.
 Después enjuáguelos dos veces con agua corriente y una vez con agua
desmineralizada.
 Séquelos.

A continuación se va a detallar la metodología de limpieza y esterilización para cada

tipo de material de laboratorio.

a. Pipetas:
 Se colocan en frascos de vidrio de base ancha que contenga una solución de
desinfectantes o detergente. El recipiente se autoclava a 1210 C x 15 libras de
presión durante 15 a 20 minutos.
 Al enfriarse se eliminan los tapones de algodón, se colocan con la punta hacia
arriba en el lavador de pipetas o canastillas altas se limpian completamente con
agua caliente, se escurren en otras canastillas y se dejan secar.
 El extremo oral de la pipeta debe taparse con algodón.
 Se envuelven en papel kraft una por una o en grupos, se marcan y son colocadas
en tubos especiales con la punta sobre la base, en donde deberá colocarse algodón.
Se procede a esterilizar en el horno a 1500 C durante 30 minutos.

b. Tubos de Ensayo:

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 Los tubos de ensayo conteniendo medios de cultivo contaminados con

microorganismos, deben ser autoclavados a 1210 C x 15 libras de presión durante
15 a 20 minutos.
 Luego se lavan con abundante agua y detergente, se dejan escurrir; luego se
taponan y se envuelven en papel kraft en paquetes de 10 tubos y se colocan a
esterilizar al horno.

c. Placas de Petri:
 Las placas conteniendo cultivos microbianos, se llevan al autoclave para ser
esterilizadas, colocándose con la tapa hacia arriba.
 Luego se lavan con abundante agua y detergente. Se dejan escurrir, se empaquetan
individualmente o en paquetes con papel kraft para luego esterilizarlas en el horno.

d. Portaobjetos nuevos:
 Remojo en solución detergente. En una palangana prepare agua con detergente
para lavar en polvo o en líquido, empleando la cantidad que recomienda el
fabricante. Coloque en la palangana los portaobjeto uno a uno y déjelos en remojo
toda la noche.
 Enjuague en agua. Enjuague cada portaobjetos con agua del grifo y a
continuación con agua limpia durante 15 minutos.
 Limpieza y secado. Limpie los portaobjetos, uno a uno, con un trapo suave, que
no desprenda pelusa. Colóquelos separados, sobre una hoja de filtro de papel, uno
a uno. Déjelos secar. Posteriormente, examine cada portaobjetos. Descarte los que
se encuentren teñidos o raspados y los que tengan un color amarillento o porciones
opacas.
 Envoltura. Junte los portaobjetos en montoncitos de 10 ó 20 y envuélvalos con
hojas de papel.
 Numeración. En algunos laboratorios se acostumbra numerar los portaobjetos por
anticipado en grupos de cinco paquetes, de 1 a 100, con un lápiz de diamante (de
esta manera los paquetes contiene portaobjetos del 1 al 20, del 21 al 40, del 41 al
60, del 61 al 80 y del 81 al1 00).

e. Portaobjetos sucios:
 Portaobjetos con residuos de aceite de inmersión. Tome los portaobjetos uno a
uno y frótelos con papel de periódico para limpiarlos del aceite hasta donde sea
posible.
 Portaobjetos con cubreobjetos. Separe los cubreobjetos de los portaobjetos con
la punta de una aguja o el extremo de una pinza y colóquense en un recipiente con
solución detergente.
 Remojo en solución concentrada de detergente. Prepare una palangana con:
- agua fría o tibia
- detergente (en la cantidad que recomiende el fabricante).
Déjense en remojo los portaobjetos durante 24 horas.
Los detergentes que contienen enzimas son excelentes para limpiar los residuos de
sangre.
Nota: Si los portaobjetos se han usado con muestras infectadas (orina, heces
fecales) se deben colocar en una solución desinfectante.
 Limpieza de los portaobjetos. Prepare otra palangana, que contenga una solución
débil de detergente (15 mi de detergente de uso doméstico por cada litro de agua)
Saque los portaobjetos, uno a uno, de la solución detergente fuerte.

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Frote cada porta objetos con algodón humedecido en la solución detergente fuerte
y colóquense en la palangana que contiene la solución detergente débil.
Déjense en remojo durante 1 ó 2 horas en la palangana con solución detergente
débil.
 Enjuague de los portaobjetos. Tome los portaobjetos uno a uno usando de
preferencia una pinza. Si se utilizan los dedos cójalos por los bordes. Enjuáguelos
por separado bajo el chorro de agua y a continuación póngase en remojo durante
30 minutos en una palangana llena de agua. Este es el mejor procedimiento.
 Limpieza, secado y envoltura. Síganse las instrucciones que se han dado para los
portaobjetos nuevos.
f. Cubreobjetos:
Después de usarlos, los cubreobjetos se pueden recobrar, limpiar y usar nuevamente.
Para limpiarlos:
 Remójense en una solución débil de detergente a la que se haya agregado un
desinfectante preparado en un vaso grande de precipitado como se indica a
continuación:
- 200 ml de agua.
- 5 g de detergente.
- 15 ml de lejía o 5 mi de un desinfectante cuaternario derivado del amonio.
Déjense en remojo durante 2 - 3 horas, moviéndolos suavemente de vez en
cuando.
 Enjuáguese cuatro veces el vaso donde estaban con agua del grifo, agitándolo
suavemente.
 Lávese por último con agua desmineralizada.
 Escúrrase los cubreobjetos colocándolos cuidadosamente de punta sobre una pieza
de gasa doblada.
 Si es posible, séquense en el horno de aire caliente a 60 °C. Consérvense en una
placa de Petri pequeña. Para sacarlos utilice una pinza especial para portaobjetos si
se dispone de ella.

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