Universidad Nacional de Cajamarca: PRACTICA # 0fjas7

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL DE ENFERMERÍA
´´PRACTICA # 0fjas7
´´
TEMA: Demostración de los factores que modifican la actividad de

una enzima
ALUMNO : Me la chupas
ASIGNATURA: Bio-Quimica
AÑO : 2018
CICLO : 2° Segundo Ciclo
DOCENTE : Q. F. Nelson Ursia Yengle

DEMOSTRACIÓN DE LOS FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD DE UNA ENZIMA
I.- JUSTIFICACIÓN
Las enzimas son compuestos de naturaleza proteica que tienen la propiedad de acelerar las
reacciones químicas sin modificar la constante de equilibrio del sistema. Su actividad es
afectada por diversos factores:
• Concentración de sustrato • Inhibidores

• PH • Fuerza iónica, constante dieléctrica,
• Concentración de enzima etc.
• Temperatura
II.- OBJETIVOS
Al término de la práctica estaré en condiciones de:
 Demostrar el efecto de los factores en una acción enzimática: concentración de sustrato,

concentración de enzima, concentración de pH y temperatura sobre la actividad
enzimática de la amilasa salival sobre el almidón.
III.- MATERIAL Y REACTIVOS:
 Solución de almidón 1%  Solucion salival

 Solucion de Na al 2%  Alcohol etílico
 Tubos de ensayo  Gradillas
 Buffer fosfato pH = 6,6  Agua destilada
 Buffer fosfato pH = 8,0  Frasco lavador
 Pipetas  Solucion de lugol
 Hielo  Solucion de HCL 0,05 N
IV. - PROCEDIMIENTO:
COMPONENTES I II III IV V VI
Solución de almidón 1% 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL
Buffer fosfato pH = 6,6 5 mL 5 mL 5 mL ----- 5 mL 5 mL
Buffer fosfato pH = 8,0 ----- ----- ----- 5 mL ----- -----
Solucion de Na al 2% 1,4mL ----- 1,4mL 1,4mL 1,4mL 1,4mL
Agua Destilada 2,6mL 3,4mL 2,4mL 2,0mL 2,0mL 2,0mL
Pre incubar a 37° C por 5 min del tubo I al tubo V y el tubo VI se coloca en hielo
Solucion salival 10% ------ 0,6mL 0,2mL 0,6mL 0,6mL 0,6mL
Volver a colocar a baño maria a 37°c, durante 20 min. Desde el tubo I hasta el tubo V. El tubo VI
colocarlo en hielo.
ACTIVIDAD ENZIMATICA
COMPONENTES IA IIA IIIA IVA VA VIA
Alicuota del sist. anterior 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL
Soluc. HCL 0,05 N 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL
Soluc. Lugol 0,5 mL 0,5 mL 0,5 mL 0,5 mL 0,5 mL 0,5 mL
V.- RESULTADOS
 Antes de agregar la amilasa salival:

Todos los tubos (I, II, III, V y VI) eran incoloros, excepto el tubo IV que poseía una
coloración ligeramente amarilla debido al buffer fosfato pH 8
 Luego de agregar la amilasa salival y el lugol:
Se observa que en el tubo I se encuentra de un color azul oscuro, y el resto de tubos (I, II,
III, V y VI) eran de color amarillo y algunos poseían pequeños trocitos de color azul
VI.- DISCUSIÓN
 En el tubo I :
Al no poseer enzima no se degrado al almidón, dando la color correspondiente con el
lugol (azul oscuro)
 En el tubo II:
Hubo una degradación del almidón dando el color amarillo por presencia de la enzima
(amilasa salival), pero al no poseer NaCl no hubo una degradación completa dándose a
sobrar pequeños grupitos de color azul (almidón)
 En el tubo III, IV, V, VI:
Hubo una degradación del almidón dando el color amarillo por presencia de la enzima
(amilasa salival) y con mayor eficiencia al poseer NaCl.
VII.- CONCLUSIÓN
Concluyo que los:
 Diferentes factores ambientales como la variación de pH, temperatura o presencia de algún

cofactor pueden afectar a la actividad enzimática.
 Variando los distintos factores que modifican la actividad enzimática de la alfa amilasa salival
pudimos determinar las condiciones óptimas a las que trabaja de mejor manera.
 La presencia del NaCl hace más eficiente el trabajo de catalizacion de la enzima sobre el
almidón.
VIII.- BIBLIOGRAFÍA
https://www.youtube.com/watch?v=Kz7u1AB0kzk
ps://es.slideshare.net/WilmerPea2/determinacin-de-actividad-de-peroxidasa
J. Luque, y A. Herráez (2001) Biología Molecular e Ingeniería Genética. Ediciones Harcourt.
C.K. Mathews, K.E. Van Holde y K.G. Ahern (2002) Bioquímica. 3ª Edición. Pearson Educación.
P. Roca, J. Oliver y A.M. Rodríguez (2003) Bioquímica. Técnicas y Métodos. Editorial Hélice.
XI.- ANEXOS

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TEMA: Demostración de los factores que modifican la actividad de

CICLO : 2° Segundo Ciclo

DOCENTE : Q. F. Nelson Ursia Yengle

• Concentración de sustrato • Inhibidores

Al término de la práctica estaré en condiciones de:

 Demostrar el efecto de los factores en una acción enzimática: concentración de sustrato,

 Solución de almidón 1%  Solucion salival

Buffer fosfato pH = 6,6 5 mL 5 mL 5 mL ----- 5 mL 5 mL

Buffer fosfato pH = 8,0 ----- ----- ----- 5 mL ----- -----

Solucion de Na al 2% 1,4mL ----- 1,4mL 1,4mL 1,4mL 1,4mL

Agua Destilada 2,6mL 3,4mL 2,4mL 2,0mL 2,0mL 2,0mL

COMPONENTES IA IIA IIIA IVA VA VIA

Alicuota del sist. anterior 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL

Soluc. HCL 0,05 N 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL

Soluc. Lugol 0,5 mL 0,5 mL 0,5 mL 0,5 mL 0,5 mL 0,5 mL

 Antes de agregar la amilasa salival:

Concluyo que los:

 Diferentes factores ambientales como la variación de pH, temperatura o presencia de algún

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