UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Perú, DECANA DE AMERICA)

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
Departamento Académico de Farmacología, Bromatología y Toxicología

Cátedra de Toxicología

INFORME N° 19 “Determinación de alcaloides”

ASIGNATURA: Toxicología y Química Legal

DOCENTE: Q.F. José Antonio Llahuilla Quea

INTEGRANTES:

Arando Hilasaca, Lírio Irene

Irkñampa Gallardo, Sandra Ivonne
Limay De la Cruz, Edwin Carlos
López Chagua, Ayrlton Jhonny
Grupo: Lunes “Migatte”

Fecha de realización de la práctica: 04 de junio del 2018

SEMESTRE: 2018 – I
 I. INTRODUCCIÓN

Un gran número de medicamentos se han obtenido de plantas que contienen alcaloides,

estos se han aislado principalmente en plantas superiores y se han encontrado en más
de 100 familias de Fanerógamas (aquellas que se reproducen por semillas producidas
en sus inflorescencias), en menor proporción en la criptógamas (plantas que tienen sus
órganos reproductores ocultos) del tipo licopodios, también en microorganismos (ergot)
y animales como peces y ranas del género Phyllobates cuyos alcaloides constituyen
algunas de las sustancias más venenosas para el hombre. 1

Su actividad biológica a nivel del sistema nervioso, dio pie a las primeras investigaciones,
siendo los alcaloides las primeras sustancias naturales estudiadas. 2

II. MARCO TEÓRICO

No existe una definición exacta para los alcaloides, pero se puede considerar como: “Un
compuesto orgánico de origen natural (generalmente vegetal), nitrogenado (el
nitrógeno se encuentra generalmente intracíclico), derivados generalmente de
aminoácidos, de carácter más o menos básico, de distribución restringida, con
propiedades farmacológicas importantes a dosis bajas y que responden a reacciones
comunes de precipitación”.2

Los alcaloides se pueden clasificar de la siguiente forma:

Figura N°1. Aspectos biogenéticos para la clasificación de los alcaloides

 En cuanto a su estado natural, los alcaloides son esencialmente sustancias presentes en
todos los órganos de la planta, pueden encontrarse mayoritariamente en hojas (cocaina,
nicotina, pilocarpina), en flores (escopolamina, atropina), en frutos (alcaloides del opio,
peletiarina, coniina), en semilla (piperina, arecolina), en corteza (quinina, tubocurarina),
en la raiz (emetina y cefalina).3

Los métodos de extracción son muy variados, entre ellos tenemos purificación por
medio de fluídos supercríticos con dióxido de carbono. Su extracción se da con agua si
están en forma de sales (solubles) o con ácidos clorhídricos diluidos cuando están no
son solubles en agua.4

Su detección entre ellos tenemos a los métodos cromatográficos, reacciones coloreadas

(Rxn de Mayer, Dragendorff, Froehde o Sánchez), si bien no son específicas, pueden
orientar para su identificación específica final. 4

III. PARTE EXPERIMENTAL

a) OBJETIVOS
 Identificar y determinar la presencia de alcaloides en el residuo de tóxicos
alcalinos
 Interpretar toxicológicamente las concentraciones en líquidos biológicos,
alimentos y medio ambiente.
b) Método de identificación para cada alcaloide en R4

A. BRUCINA

Es un alcaloide de la nuez vómica y de las habas de san Ignacio. La exposición es

peligrosa no sólo por deglución, sino también por inhalación y contacto con la piel.

1. Fundamento: Cuando la brucina esta en contacto con el acido nítrico se desprende

ácido carbónico y vapores de nitrito de oxido de metilo, quedando de residuo acido
oxálico y una sustancia cristalizada en laminillas, llamada cacotelina.Se fundamenta
en la formación de un compuesto coloreado de color rojo denominado cacothelina.

Reacción química

C46 H36 N2 O8 + 5 NO 5, HO C40H22 (NO4)2 N2 O10

Brucina Cacothelina
 NO2, C2 H3 O3 ------> 2 C2 O3, HO + 2 NO2 + 4 HO
Nitrito de metilo Ácido oxálico
B. ESTRICNINA
 1. Reacción de Marchand Otto:
Reactivos
Ácido sulfúrico
Cristales de bicromato de potasio

Fundamento

Se basa en una reacción de óxido reducción en medio ácido, donde bicromato de

potasio que actúa como agente oxidante se reduce, dando un compuesto de
coloración azul.

Técnica operatoria
 En un crisol o una placa de toques colocar gotas de la muestra problema.
 Evaporar y adicionar 0,5 ml de ácido sulfúrico concentrado.
 Adicionar un cristal de bicromato de potasio.
 Observar la reacción positiva evidenciada pro una coloración azul.
2. Reacción de Mandelín

Reactivos

Vanadato de amonio al 1% en ácido sulfúrico concentrado

Técnica operatoria

 En un crisol o una placa de toques colocar gotas de la muestra problema.

 Evaporar y adicionar 3 gotas del reactivo
 Observar la reacción positiva que se evidencia por la aparición de una
coloración violeta, la cual al adicionar una gota de agua se torna roja violácea
C. ATROPINA

La atropina es una droga anticolinérgica natural compuesta por ácido trópico y

tropina, una base orgánica compleja con un enlace éster.
1. Reacción de Vitali
Fundamento
Se fundamenta en la formación de un compuesto coloreado de color azul
violáceo fugaz.
Técnica Operatoria
 Reacción Química

2. Reacción de Wasicky
Fundamento: Se fundamenta en la formación de un compuesto coloreado de
color rojo violáceo.
Técnica Operatoria
Reacción química

D. MORFINA

Presenta acción analgésica sobre el sistema nervioso central que se manifiesta

a dosis bajas produciendo depresión de la percepción dolorosa; paralelamente,
desarrolla una sedación seguida de euforia que pasa progresivamente a sueño,
el despertar es particularmente desagradable. Así mismo actúa como un
depresor respiratorio.
1. Reacción de Fröehde:
Materiales y reactivos
molibdato de amonio 1% en H2SO4
Capsula de porcelana
Fundamento:
Reducción del molibdato de amonio con formación de una coloración lila –
violáceo virando poco a poco a azul, verde y amarillo hasta llegar al rosado;
por acción del OH fenólico en posición 3 y del OH alcohólico en posición.

Técnica operatoria
 Verter gotas de la muestra problema
 Evaporar
 Añadir II – III gotas del reactivo
 a. Reacción de Marquis
Materiales y reactivos
Reactivo: formol 1% en H2SO4
Capsula de porcelana
Fundamento
Reducción del acido sulfúrico (H2SO4) por acción del grupo fenolico formando un
complejo coloreado violeta; revelado por la alcalinización del medio con formol.

Técnica operatoria
 Verter gotas de la muestra problema
 Evaporar
 Añadir II – III gotas del reactivo
3. Reacción de Sánchez
Materiales y reactivos
vainillina 0,3% en HCl
Capsula de porcelana
Fundamento
La vainillina es protonada en una solución ácida dando como resultado un
carbocatión electrofílico débil que reacciona con el anillo, el compuesto formado
es deshidratado para dar como resultado un compuesto con color rosa ligero a un
intenso rojo cereza.
 Técnica operatoria
 Verter gotas de la muestra problema
 Evaporar
 Añadir II – III gotas del reactivo
E. CODEINA
Usado en terapéutica pues la metilación del hidroxilo fenólico de la morfina
produce modificaciones de la actividad farmacológica, tales como: disminución de
la acción analgésica, del efecto depresor respiratorio y la toxicomanía. Además de
ser un excelente antitusígeno. Produce acción sedativa a dosis fuertes y
prolongadas
1. Reacción de Fröehde
Materiales y reactivos
Reactivo: molibdato de amonio 1% en H2SO4
Capsula de porcelana
Fundamento
Reducción del molibdato de amonio con formación de una coloración verde que
luego vira a azul; por acción del OH en posición 3. Sin embargo debido al bajo
poder reductor en esta posición se considera negativa para este compuesto una
reacción que la caracteriza.

Técnica operatoria
 Verter gotas de la muestra problema
 Evaporar
 Añadir II – III gotas del reactivo
2. Reacción de Marquis
Materiales y reactivos
Reactivo: formol 1% en H2SO4
Capsula de porcelana
 Fundamento Reducción del acido sulfúrico (H2SO4) por acción del grupo fenólico
formando un complejo coloreado violeta; revelado por la alcalinización del medio
con formol.

Técnica operatoria
 Verter gotas de la muestra problema
 Evaporar
 Añadir II – III gotas del reactivo
3. Reacción de Sánchez
Materiales y reactivos
Reactivo: vainillina 0,3% en HCl
Capsula de porcelana
Fundamento
La vainillina es protonada en una solución ácida dando como resultado un
carbocatión electrofílico débil que reacciona con el anillo, el compuesto formado es
deshidratado para dar como resultado un compuesto con color rosa ligero a un
intenso rojo cereza.
 F. PAPAVERINA
1. Reacción con H2SO4 (T.O.)
Fundamento
El ácido sulfúrico concentrado colorea de azul la papaverina (Reacción de
deshidratación).
La papaverina posee reacción alcalina y forma sales cristalizables.
La papaverina disuelta en alcohol se deposita bajo la forma de cristales confusos,
acumulados, aciculares y blanquecinos; si se rocían los cristales con ácido sulfúrico
concentrado, se vuelven azules. El calentamiento favorece la cristalización.

Procedimiento
 En una cápsula de porcelana colocar gotas del residuo 4 (alcaloides) y
evaporar.
 Agregar 4 a 5 gotas de ácido sulfúrico concentrado y calentar. (Se obtendrá
una coloración azul).
 Enfriar y agregar gotas de agua (coloración naranja).
 Agregar gotas de NH4OH (Coloración azul).
 Agregar gotas de H2SO4 (coloración naranja).
G. CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA
Fundamento
El proceso de cromatografía de adsorción se basa en la separación de un soluto entre
una fase sólida adsorbente y una fase móvil. El fenómeno de adsorción ocurre en la
superficie del granulo de fase fija, y se fundamenta entre la atracción entre el soluto y
el adsorbente por formación de uniones dipolo y formación de puentes de hidrógeno.
Los alcaloides a partir de soluciones orgánicas en soportes inertes pueden ser revelados
gracias a coloraciones que dan con ciertos reactivos. Esto es debido a la propiedad de
los alcaloides de dar reacciones coloreadas de precipitación cuando reaccionan con
ciertos metales. Es así que usando el reactivo de Dragendorff como revelador se
obtendrán manchas que van del rojo anaranjado al violeta (según la naturaleza del
alcaloide) y con el reactivo yodoplatinato de potasio manchas que van del café al gris
azulado (sobretodo para los alcaloides derivados del opio).
Procedimiento

 Sembrar en la placa la muestra a analizar.

 Sembrar los estándares.
 Llevar a la cuba cromatográfica previamente saturada con el sistema de
solventes.
 Esperar que corran la muestra y los estándares.
 Secar la placa
 Revelar
 Medir los Rf.

Revelador

Iodoplatinato de potasio
Dragendorff
 IV. RESULTADOS
a. Reacciones específicas de reconocimiento

BRUCINA Resultado de reacción

Reacciones de reconocimiento Negativo (-)

 Con gotas de ácido nítrico

concentrado

ESTRICNINA Resultado de reacción

 Reacción con dicromato de Negativo (-)

potasio
 1. Reacción de Negativo (-)
sulfavanadato de
amonio 1% en ácido
sulfúrico concentrado

ATROPINA Resultado de reacción

 Reacción de Vitaly Negativo (-)

 Reacción de Wasicky Negativo (-)

MORFINA Resultado de reacción

  Reacción de Froehde Negativo (-)

 Reacción de Marquis Negativo (-)

 Reacción de Sánchez Negativo (-)

CODEINA Resultado de reacción

 Reacción de Froehde Negativo (-)

  Reacción de Marquis Negativo (-)

 Reacción de Sánchez Negativo (-)

PAPAVERINA Resultado de reacción

2. Con H2SO4 Negativo (-)

Reacciones de reconocimiento con: Negativo (-)

3. Con NH4OH

b. Cromatografía en capa fina

Revelador: Rvo. Draggendorff
 Brucina (B)
𝟕
𝑹𝒇(𝒔𝒕) = = 𝟎. 𝟕
𝟏𝟎
No hay presencia de MP
Estricnina (E)
𝟏.𝟕
𝑹𝒇(𝒔𝒕) = = 𝟎. 𝟏𝟔 No
𝟏𝟎.𝟓
hay presencia de MP
Atropina (A)
𝟏.𝟓
𝑹𝒇(𝒔𝒕) = = 𝟎. 𝟏𝟓
𝟏𝟎
No hay presencia de MP
Codeína (C)
𝟑.𝟖
𝑹𝒇(𝒔𝒕) = = 𝟎. 𝟒𝟎𝟒
𝟗.𝟒
No hay presencia de MP
Morfina (M): -
Papaverina (P)
𝟏. 𝟒
𝑹𝒇(𝒔𝒕) = = 𝟎. 𝟏𝟒𝟕
𝟗. 𝟓
No hay presencia de MP

Revelador: Rvo. de Yoduro platinado

Brucina (B)
𝟐
𝑹𝒇(𝒔𝒕) = = 𝟎. 𝟐
𝟏𝟎
No hay presencia de MP
Estricnina (E)
𝟐
𝑹𝒇(𝒔𝒕) = = 𝟎. 𝟐𝟒
𝟖. 𝟓
No hay presencia de MP
Atropina (A)
𝟐
𝑹𝒇(𝒔𝒕) = = 𝟎. 𝟐𝟐
𝟗
No hay presencia de MP
Codeína (C)
𝟒
𝑹𝒇(𝒔𝒕) = = 𝟎. 𝟒𝟒
𝟗
Morfina (M): -
Papaverina (P)
𝟐
𝑹𝒇(𝒔𝒕) = = 𝟎. 𝟐𝟐
𝟗
No hay presencia de MP

V. DISCUSIÓN
 En el ensayo realizado para el reconocimiento de la atropina por la reacción de
Vitaly, se observó un resultado negativo, así también como el segundo ensayo
correspondiente a Wasicky, estos ensayos complementarios llevan presuntivamente
a la presencia de atropina en la muestra; pero es también apreciable para
hiosciamina y escopolamina, lo cual se pone a discusión debido al resultado negativo
en el ensayo de Wasicky.

En las marchas analíticas cromáticas para estricnina se obtuvo negativo en el ensayo

de Marchand Otto (Dicromato de potasio) y también para Mandelín (sulfavanadato
de amonio), cabe recalcar que la prueba de Marchand Otto es positiva también para
presencia de Yohimbina, curare, gelsemina, cotarnina e hidrastina y que mediante
el ensayo de Frohede (resultado negativo) se descartan la gran mayoría quedándose
con dos alternativas de estudio: estricnina y gelsemina.

En los ensayos para morfina y codeína se obtuvieron resultados negativos para las
pruebas de Froehde, Marquis y Sánchez, sin embargo, en esta última reacción puede
darse un resultado positivo en presencia de nicotina que también es un posible
componente del residuo 4 (R4), pero que no es producto a discusión en la presente
práctica, de acuerdo a esto descartamos la presencia de Morfina y Codeína. 5

La reacción del ácido sulfúrico permite el reconocimiento del núcleo isoquinoléico

de la papaverina, sin embargo, en los resultados obtenidos resulto negativo
descartándose la presencia de este toxico.6

Los ensayos cromatográficos muestran que no hay presencia de bradicina, atropina,

papaverina, estricnina y codeína en la muestra; sin embargo, cabe señalar que no se
evaluaron otros alcaloides, así como otros posibles productos en el residuo 4 (R4) y
que dada su presuntiva presencia interfieran en los resultados de algunos ensayos
cromáticos.7

VI. CONCLUSIONES
No se identificó la presencia de alcaloides en el residuo de tóxicos alcalinos

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

 Evans W. Trease and Evans – Pharmacognosy. 15va ed. Ed. Saundders.
Edinburgh, 2000.
 Arango G. Alcaloides y compuestos nitrogenados. Universidad de Antioquia:
Facultad de Química Farmacéutica. Medellín, 2008.
 Mercano D, Hasegawa M. Fitoquímica Orgánica. Ed. Universidad Central de
Venezuela. Caracas, 1991.
 Bravo L. Farmacognosia. Elsevier España S.A. Madrid, 2003.
 Universidad Central de Venezuela. Toxicología. [citado el 10 de junio 2018].
Disponible en:
ftp://medweb.med.ucv.ve/Bioanalisis/Toxicologia/contenidos/unidad-
III/reacciones/particulares/morfina.html
 García D. Los metabolitos secundarios de las especies vegetales. Pastos y
Forrajes, Vol. 27, No. 1, 2004.
 Guatelli M. Manual práctico de quimia toxicológica. Editorial universitaria
Macchi. Buenos aires. 1958.