Cultivo de Microalgas

CULTIVO DE MICROALGAS
Resumen
La prctica se llev a cabo todas las fechas desde el mircoles 4 de junio hasta el
mircoles 18 del mismo mes, en el laboratorio de cultivos menores de la Facultad de
Oceanografa, Pesquera, Ciencias Alimentarias y Acuicultura.
Las especies cultivadas fueron: Isocrysis sp. (crisofcea) y Tetraselmis sp. (clorofcea);
en este informe se redactara el crecimiento solo de la especie Tetraselmis sp. en una
sola muestra. Ambas fueron cultivadas en el medio de cultivo Guillard.
Primero se procedio a la reproduccin de la sepa, para luego sembrarlas en un

ambiente de mayor espacio y con oxigenacin permanente. Se hizo un conteo diario y
se anotaron las densidades para luego elaborar la curva de crecimiento de la
microalga.
Introduccin
Son llamadas microalgas a una gran cantidad de especies que constituyen el

fitoplancton que abarca desde organismos auttrofos hasta microflagelados y
microciliados auxtrofos.
Su posicin taxonmica ha sido de gran polmica entre botnicos y zologos, como

ejemplo podemos mencionar el grupo de los dinoflagelados, conocidos por unos como
microalgas y por otros como protozoarios.
Estas especies aportan un alto contenido nutricional para peces, crustceos y

moluscos, adems de ofrecer facilidades de manejo en sistemas de cultivo tanto en
laboratorio como en produccin a gran escala con fines comerciales.
Muchos factores contribuyen para el desarrollo ptimo de los cultivos de microalgas,

algunos de stos afectan las caractersticas del crecimiento.
Los recipientes de cultivo ms comnmente usados son de materiales no txicos como

las cajas de Petri, matraces Erlenmeyer, matraces Ferenback, carboys o garrafas, etc.,
adecuados para cultivos de laboratorio. Para cultivos a gran escala los recipientes de
plstico, madera y concreto son los ms recomendables, incluyendo los estanques
rsticos en reas rurales son los sistemas ms econmicos.
En cultivos masivos la aireacin es un factor muy importante para la homogenizacin

de los nutrientes y para evitar la sedimentacin de las microalgas. Las diatomeas
suelen acumularse en lugares donde el agua no se mezcla, esto tambin depende de la
forma del recipiente de cultivo que cuando no es adecuado retarda el crecimiento.
Otro factor importante es la penetracin de la luz en el cultivo; en los cultivos masivos

la profundidad es tan grande que la intensidad de la luz incidente no es suficiente para
la fotosntesis, hasta el fondo del tanque. En los cultivos masivos a la intemperie la
penetracin de la luz es ms efectiva, pero se debe reducir la intensidad de la luz
fuerte, cubriendo estos estanques con una malla. En cultivos a gran escala es
recomendable la inyeccin de CO2 (0.5%) para contribuir al proceso fotosinttico.
A continuacin se muestra una tabla con las principales microalgas cultivadas:
CARACTERISTICAS DE ALGUNAS DE LAS ESPECIES DE ALGAS

UNICELULARES
UTILIZADAS EN ACUICULTURA (COLL-MORALES J., 1983)
TEMPERATURA DIAMETRO
GENERO CICLO
OPTIMA MEDIO
Phaeodactylum (diatomea) 10 h 25C 10.4
13.1
Skeletonema (diatomea) 18C >20
h
Dunaliella (cloroficea) 24 h 16C 17.8
Chlorella (cloroficea) 7.7 h 25C 5
Tetraselmis (cloroficea) 18 h 18C 18.4
15.3
Monochrysis (crisoficea) 2025C 10
h
30.2
Isochrysis (crisoficea) 20C 10.2
h
Estas especies se han utilizado en acuicultura marina dados su valor nutritivo y

digestibilidad, adems de su capacidad para crecer en cultivos masivos. La duracin del
ciclo celular como los requerimientos de temperatura son susceptibles de variacin
mediante seleccin de variedades.
Como se ve en el cuadro, por su similitud de temperatura con la del ambiente, fueron

escogidas dos de estas para nuestra primera prctica de siembra de microalgas.
Objetivos
Objetivo General:
Aprender el cultivo de microalgas, aspectos relevantes para su desarrollo y su

gran importancia en la acuicultura.
Objetivos Especficos:
Aprender a desarrollar una curva de crecimiento.

Adiestrarnos en el trabajo prctico a fines profesionales.
Aprender la importancia de los medios de cultivo.
Mtodo
Equipos y utensilios:
-Tubos de Ensayo -Algodn
-Erlenmeyer -Pinzas
-Buretas -Fuentes
-Bombillas -Paliglobos
-Mechero bunsen -Rotuladores
-Baguetas -Papel filtro
-Microscopio -Embudos
-Porta y cubre objetos -Manguera
-Varilla de cobre -Autoclave
-Fiolas -Estufa
-Vasos precipitados -Cmara para conteo
-Gradillas -Papel toalla y lente
Reactivos y lquidos:
-Lugol
-Agua de mar
-Agua destilada
-Alcohol
Medio Guillard:
-Nitrato de Sodio 18,75g en 250 ml de agua1.
-Fosfato de Sodio 1,25g en 250 ml de agua.
-Silicato de Sodio 7,5g en 250 ml de agua.
-Metales quelatados 500 ml:
1
Agua destilada en todos los casos.
1. 1,575g de FeCl3
2. 2,18g de Na2EDTA
3. 0,49g de CuSO4 en 50 ml de agua. (solo 0,5 ml)
4. 1,1g de ZnSO4 en 50 ml de agua. (solo 0,5 ml)
5. 9g de CoCl2 en 50 ml de agua.(solo 0,5 ml)
6. 0,315g de Na2MoO4 en 50 ml de agua. (solo 0,5 ml)
-Solucin de vitaminas 100 ml:
1. 10 mg de biotina en 50 ml de agua.
2. 10 mg de cianocobalamina en 50 ml de agua.
Procedimiento:
Reproduccin de cepas:
En un vaso precipitado de 1000 ml se verti agua de mar, previamente filtrada y

esterilizada. A este se le aadi nutrientes del medio Guillard, como son: 1 ml de
nitrato, 1 ml de fosfatos, 1 ml de silicatos, 1 ml de metales quelatados y 0,5 ml de
vitaminas.
Se prepar una batera de 3 tubos de ensayo con cierta cantidad del agua de mar
tratada y nutrida. Se sembr en estas a partir de una muestra otorgada por la
profesora, la especie fue Tetraselmis sp. y se sembr usando una varilla de cobre, una
pipeta y directamente de tubo a tubo, respectivamente a cada uno de los tres tubos.
Toda esta accin se realiz cerca de un mechero encendido para mantener el rea
estril y habiendo tambin esterilizado la zona de trabajo previamente.
Se sellaron los tubos con un tampn de algodn y se colocaron en la gradilla, la cual

fue expuesta bajo la luz artificial de un fluorescente durante toda una semana y
requiri adems, el continuo movimiento diario para la homogenizacin de nutrientes
y oxgeno.
Reproduccin de la cepa en Erlenmeyer:
Pasada la semana de la primera etapa de siembra, se seleccion el tubo de ensayo con

mayor turbidez (mayor contenido de microalgas visiblemente) y se realiz la operacin
de siembra; transportando una pequea parte de la cepa del tubo a un Erlenmeyer de
250 ml con cierta cantidad de agua de mar nutrida de la misma manera que el primer
cultivo. Se elabor un tampn de algodn y se mantuvo nuevamente bajo luz artificial
hasta la semana prxima que se realiz el cultivo.
Siembra final:
En una botella de plstico limpia, se introdujo 1 litro de agua de mar nutrida con el
medio Guillard, siempre cerca de un mechero bunsen encendido, y con un rea
esterilizada, se procedi a hacer la siembra en la botella tomando el Erlenmeyer de la
cepa anterior y echando una poca cantidad de cepa dentro de la botella. Se
acondicion un sistema de oxigenacin mediante mangueras; se elabor un tampn
con un paliglobo en medio para la botella, el cual se conect al sistema de oxigenacin.
Conteo diario:
Se inici el conteo desde el mismo da de siembra, para saber cul fue la densidad
inicial sembrada de la microalga. Con un paliglobo previamente desinfectado con agua
caliente; se procedi a tomar una muestra de la botella sembrada, usando el paliglobo
a modo de pipeta, el cual retena cierta cantidad de muestra y esta fue puesta en un
recipiente. A la muestra obtenida se le agreg unas gotas de lugol y se coloc en la
cmara2 para su conteo en el microscopio. Despus de terminado el conteo los
alumnos deban lavar los utensilios y dejarlos tal y como estaban, acto que fue
repetido durante las dos semanas de la siembra, en los que se anotaron las densidades
y los das para luego poder realizar la curva de crecimiento de la especie cultivada.
Resultados
Del conteo total se obtuvieron los datos mostrados en la tabla 1 a continuacin:
Tabla 1. DATOS OBTENIDOS POR EL CONTEO.
Das Densidad
04/06/2014 6,2
05/06/2014 6,3
06/06/2014 ----
07/06/2014 Fin de Semana
09/06/2014 43,4
10/06/2014 49,1
11/06/2014 41,4
12/06/2014 ----
13/06/2014 26,7
16/06/2014 8,5
17/06/2014 10,8
18/06/2014 11,4
2
Imagen del objeto en la Grfica 1.
La curva de crecimiento para estos datos se presenta anexada en el Grfico 2 al final
del presente informe.
Conclusiones
Se presentan 3 fases en la curva de crecimiento de las microalgas, la primera es la fase

inestable de siembra, donde la densidad de microalgas cultivadas tiende a caer
pequeamente a corto plazo; la segunda fase es la de reproduccin, en la cual las
microalgas alcanzan su mximo nivel de productividad y la tercera fase de limitacin y
decaimiento, donde las microalgas han excedido la poblacin limite y el consumo de
nutrientes por parte de estas hace que reduzca drsticamente los mismos nutrientes y
el oxgeno.
Se debe considerar que la fase ms conveniente para cosechar las microalgas es la

segunda fase en la que su productividad es mxima, y no cuando su densidad es
mayor.
Referencias Bibliogrficas
Torrentera, B. L. y A.G.J. Tacon.1989. La produccin de alimento vivo y su

importancia en acuacultura una diagnosis. FAO. Documento de campo 12.
GCP/RLA/075/ITA, Roma. 120 pp.
Anexos
Grfica 1. CMARA DE CONTEO.

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CULTIVO DE MICROALGAS

Primero se procedio a la reproduccin de la sepa, para luego sembrarlas en un

Son llamadas microalgas a una gran cantidad de especies que constituyen el

Su posicin taxonmica ha sido de gran polmica entre botnicos y zologos, como

Estas especies aportan un alto contenido nutricional para peces, crustceos y

Muchos factores contribuyen para el desarrollo ptimo de los cultivos de microalgas,

Los recipientes de cultivo ms comnmente usados son de materiales no txicos como

En cultivos masivos la aireacin es un factor muy importante para la homogenizacin

Otro factor importante es la penetracin de la luz en el cultivo; en los cultivos masivos

A continuacin se muestra una tabla con las principales microalgas cultivadas:

CARACTERISTICAS DE ALGUNAS DE LAS ESPECIES DE ALGAS

Estas especies se han utilizado en acuicultura marina dados su valor nutritivo y

Como se ve en el cuadro, por su similitud de temperatura con la del ambiente, fueron

Aprender el cultivo de microalgas, aspectos relevantes para su desarrollo y su

Aprender a desarrollar una curva de crecimiento.

-Tubos de Ensayo -Algodn

-Mechero bunsen -Rotuladores

-Baguetas -Papel filtro

-Porta y cubre objetos -Manguera

-Varilla de cobre -Autoclave

-Vasos precipitados -Cmara para conteo

-Gradillas -Papel toalla y lente

-Nitrato de Sodio 18,75g en 250 ml de agua1.

-Fosfato de Sodio 1,25g en 250 ml de agua.

-Silicato de Sodio 7,5g en 250 ml de agua.

-Metales quelatados 500 ml:

-Solucin de vitaminas 100 ml:

En un vaso precipitado de 1000 ml se verti agua de mar, previamente filtrada y

Se sellaron los tubos con un tampn de algodn y se colocaron en la gradilla, la cual

Reproduccin de la cepa en Erlenmeyer:

Pasada la semana de la primera etapa de siembra, se seleccion el tubo de ensayo con

Del conteo total se obtuvieron los datos mostrados en la tabla 1 a continuacin:

Tabla 1. DATOS OBTENIDOS POR EL CONTEO.

Se presentan 3 fases en la curva de crecimiento de las microalgas, la primera es la fase

Se debe considerar que la fase ms conveniente para cosechar las microalgas es la

Torrentera, B. L. y A.G.J. Tacon.1989. La produccin de alimento vivo y su

Grfica 1. CMARA DE CONTEO.

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